肝組織に存在する4種類のB型肝炎ウイルスRNA定量測定系の開発

• 研究課題/領域番号: 25461004
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 藤原 圭 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (70635804)
• 研究分担者: 新海 登 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (30543988)
• 研究協力者: 加藤 孝宣
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: HBV / RNA / B型肝炎 / B型肝炎ウイルス

研究成果の概要

今回、B型肝炎ウイルス（HBV）が細胞内で複製する際に転写される複数のmRNAを定量的に検出する新しい測定系を作成するため検討を行った。リアルタイムPCRを行うために各mRNAに対するプライマー、プローブの設定、実験条件の設定を行い、いくつかの定量手法から安定性、定量性に優れている方法を検索し確認した。反応を行う際の基質となる核酸についても純化、濃縮化を行い、それとともに検出感度を高めるためのpre-amplificationによる予備的な遺伝子増幅法を開発した。今後血清マーカー、臨床病態との関連を検討してゆく。

研究成果

• [雑誌論文] Clinical evaluation of sofosbuvir/ledipasvir in chronic hepatitis C genotype 1 with and without prior daclatasvir/asnaprevir therapy. (2017)
  • 著者名/発表者名: Iio E, Shimada N, Takaguchi K, Senoh T, Eguchi Y, Atsukawa M, Tsubota A, Abe H, Kato K, Kusakabe A, Miyaki T, Matsuura K, Matsunami K, Shinkai N, Fujiwara K, Nojiri S, Tanaka Y.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: 印刷中 号: 12 ページ: 1308-1316
  • DOI: 10.1111/hepr.12898
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of branched-chain amino acid supplementation after radiofrequency ablation for hepatocellular carcinoma: A randomized trail. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nojiri S, Fujiwara K, Shinkai N, Iio E, Joh T.
  • 雑誌名: Nutrition 巻: 33 ページ: 20-27
  • DOI: 10.1016/j.nut.2016.07.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel glycobiomarker, Wisteria floribunda agglutinin macrophage colony-stimulating factor receptor, for predicting carcinogenesis of liver cirrhosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Iio E, Ocho M, Togayachi A, Nojima M, Kuno A, Ikehara Y, Hasegawa I, Yatsuhashi H, Yamasaki K, Shimada N, Ide T, Shinkai N, Nojiri S, Fujiwara K, Joh T, Mizokami M, Narimatsu H, Tanaka Y.
  • 雑誌名: Int J Cancer 巻: 138(6) 号: 6 ページ: 1462-1471
  • DOI: 10.1002/ijc.29880
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Influence of genes suppressing interferon effects in peripheral blood mononuclear cells during triple antiviral therapy for chronic hepatitis C. (2015)
  • 著者名/発表者名: Iijima S, Matsuura K, Watanabe T, Onomoto K, Fujita T, Ito K, Iio E, Miyaki T, Fujiwara K, Shinkai N, Kusakabe A, Endo M, Nojiri S, Joh T, Tanaka Y.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 10 号: 2 ページ: 1-9
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0118000
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] ITPA genetic variants influence efficacy of PEG-IFN/RBV therapy in older patients infected with HCV genotype 1 and favourable IL28B type. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsuura K, Tanaka Y, Watanabe T, Fujiwara K, Orito E, Kurosaki M, Izumi N, Sakamoto N, Enomoto N, Yatsuhashi H, Kusakabe A, Shinkai N, Nojiri S, Joh T, Mizokami M.
  • 雑誌名: J Viral Hepat. 巻: 21 号: 7 ページ: 466-474
  • DOI: 10.1111/jvh.12171
  • 査読あり
• [雑誌論文] B型・D型肝炎ウイルス重複感染による肝障害に対してペグインターフェロンが有効であった1例 (2014)
  • 著者名/発表者名: 日下部篤宣、田中靖人、飯尾悦子、村上周子、松浦健太郎、新海登、宮木知克、藤原圭、野尻俊輔、折戸悦朗、城卓志
  • 雑誌名: 肝臓 巻: 55 ページ: 653-660
  • NAID: 130004705844
  • 査読あり
• [雑誌論文] Noninvasive evaluation of hepatic fibrosis in hepatitis C virus-induced patients using ethoxybenzyl-magnetic resonance imaging. (2013)
  • 著者名/発表者名: Syunsuke Nojiri, Atsunori Kusakabe, Kei Fujiwara, Noboru Shinkai, Kentaro Mastuura, Etsuko Iio, Tomokatsu Miyaki, Takashi Joh.
  • 雑誌名: J Gastroenterol Hepatol. 巻: 28 号: 6 ページ: 1032-9
  • DOI: 10.1111/jgh.12181
  • 査読あり
• [学会発表] HBVの新しい遺伝子変化“Complex structural variation”に伴うHBX蛋白変異 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤原圭、新海登、飯尾悦子、松波加代子、野尻俊輔、城卓志
  • 学会等名: 第52回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ幕張（千葉県千葉市）
• [学会発表] B型肝炎ウイルスにみられるComplex structural variationの解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤原圭、新海登、飯尾悦子、松波加代子、野尻俊輔、城卓志
  • 学会等名: 第20回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 神戸コンベンションセンター（兵庫県神戸市）
• [学会発表] 当院のB型慢性肝炎患者におけるテノホビルの治療成績 (2016)
  • 著者名/発表者名: 松波加代子、飯尾悦子、藤原圭、野尻俊輔、城卓志、田中靖人
  • 学会等名: 第20回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 神戸コンベンションセンター（兵庫県神戸市）
• [学会発表] 当院のB型肝性肝炎患者におけるテノホビル（TDF）治療の現状 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松波加代子、 飯尾悦子、新海 登、 藤原 圭、 野尻俊輔、 城 卓志、田中 靖人
  • 学会等名: 第41回日本肝臓学会西部会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2015-12-03
• [学会発表] B型肝炎ウイルスの新しい遺伝子変異 (2015)
  • 著者名/発表者名: 藤原 圭、新海 登、野尻俊輔
  • 学会等名: 第51回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 熊本ホテルキャッスル 熊本県熊本市
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] B型慢性肝炎に対する核酸アナログ治療における次世代シークエンサーを用いた耐性変異の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松波加代子、 新海 登、 飯尾悦子、 渡邊綱正、藤原圭、 野尻俊輔、城 卓志、田中靖人
  • 学会等名: 第51回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 熊本ホテルキャッスル 熊本県熊本市
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] 肝癌治療における分岐鎖アミノ酸製剤投与の有用性（無作為前向き試験） (2015)
  • 著者名/発表者名: 野尻俊輔、 藤原 圭、 城 卓志
  • 学会等名: 第51回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 熊本ホテルキャッスル 熊本県熊本市
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] 腎移植後C型慢性肝炎患者の自然経過および抗ウイルス療法の治療成績について (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤原圭、 日下部篤宣、折戸悦朗
  • 学会等名: 第50回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ（東京）
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [学会発表] 当院のB型慢性肝炎に対するテノフォビルの使用経験 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松波加代子、渡邊綱正、飯尾悦子、遠藤美生、新海登、藤原圭、野尻俊輔、城卓志、田中靖人
  • 学会等名: 第50回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ（東京）
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [学会発表] EOBプリモビストMRIを使用したC型慢性肝炎の発癌予想 (2014)
  • 著者名/発表者名: 野尻俊輔、藤原圭、 新海登、遠藤美生、飯尾悦子、城卓志
  • 学会等名: 第50回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ（東京）
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの細胞培養系を用いた第二世代NS5A阻害剤の抗ウイルス活性の評価 (2014)
  • 著者名/発表者名: 村山麻子、藤原圭、脇田隆字、加藤孝宣
  • 学会等名: 第50回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: ホテルニューオータニ（東京）
  • 年月日: 2014-05-29 – 2014-05-30
• [学会発表] 腎移植後C型慢性肝炎患者に対するペグインターフェロン・リバビリン併用療法. (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤原圭、日下部篤宣、林克巳、山田智則、坂哲臣、蟹江浩、青木美帆、野尻俊輔、新海登、松浦健太郎、遠藤美生、飯尾悦子、城卓志、折戸悦朗、
  • 学会等名: 第17回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪（東京）
• [学会発表] 高齢者C型慢性肝炎に対するTelaprevir/PEG-IFN/RBV三剤併用療法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤原圭、新海登、遠藤美生、飯尾悦子、松波加代子、野尻俊輔、田中靖人、城卓志
  • 学会等名: 第40回日本肝臓学会西部会
  • 発表場所: 長良川国際会議場（岐阜）
• [学会発表] Analysis of novel complex structural variants in hepatitis B virus. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kei Fujiwara, Noboru Shinkai, Shunsuke Nojiri, Mio Endo, Etsuko Iio, Takashi Joh.
  • 学会等名: American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Walter E. Washington Convention Center (Washington, DC, USA)