血小板とフォンウィルブランド因子の相互作用を中心とした血栓形成の制御

• 研究課題/領域番号: 25461463
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 松井 太衛 藤田保健衛生大学, 保健学研究科, 教授 (90183946)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: フォン・ビルブランド因子 / 血小板 / GPIb / ボトロセチン2 / 血小板凝集 / 抗血栓 / 組換えタンパク質 / 血小板GPIb / 抗血栓剤 / ヘビ毒 / ボトロセチン / フォンウィルブランド因子 / 遺伝子組み換え / 血栓形成 / ヘビ毒タンパク質

研究成果の概要

血栓は、血小板GPIbと血漿タンパク質であるフォン・ビルブランド因子(VWF）の相互作用が発端となって形成される。本研究では、VWFに特異的に結合してGPIb依存性の血小板凝集を惹起するヘビ毒由来タンパク質のボトロセチン2に着目し、VWFやGPIbとの結合に重要なアミノ酸残基を同定した。さらにGPIbとの結合に関与する２つの塩基性アミノ酸を酸性アミノ酸に置換することで、VWFに結合するが血小板凝集を惹起せず、逆にVWFのによる血小板凝集を阻害する変異体ボトロセチン2の作製に成功した。本研究はVWFを標的としたユニークな抗血栓剤の開発につながる可能性を示唆した。

研究成果

• [雑誌論文] MytiLec, a mussel R-type lectin, interacts with surface glycan Gb3 on Burkitt’s lymphoma cells to trigger apoptosis through multiple pathways (2015)
  • 著者名/発表者名: Imtiaj Hasan, Shigeki Sugawara, Yuki Fujii, Yasuhiro Koide, Daiki Terada, Naoya Iimura, Toshiyuki Fujiwara, Keisuke G. Takahashi, Nobuhiko Kojima, Sultana Rajia, Sarkar M. A. Kawsar, Robert A. Kanaly, Hideho Uchiyama, Masahiro Hosono, Yukiko Ogawa, Hideaki Fujita, Jiharu Hamako, Taei Matsui, Yasuhiro Ozeki
  • 雑誌名: Marine Drugs 巻: 13 号: 12 ページ: 7377-7389
  • DOI: 10.3390/md13127071
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] フォンウィルブランド因子の糖鎖構造と機能～ABO血液型～ (2014)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛，濵子二治
  • 雑誌名: 血液フロンティア 巻: 24 ページ: 45-54
• [雑誌論文] Identification of a gene for an ancient cytokine, interleukin 15-like, in mammals; interleukins 2 and 15 co-evolved with this third family member, all sharing binding motifs for IL-15Rα. (2014)
  • 著者名/発表者名: Dijkstra JM, Takizawa F, Fischer U, Friedrich M, Soto-Lampe V, Lefèvre C, Lenk M, Karger A, Matsui T, Hashimoto K
  • 雑誌名: Immunogenetics 66:93-103 巻: 66 号: 2 ページ: 93-103
  • DOI: 10.1007/s00251-013-0747-0
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A Galactose-Binding Lectin Isolated from Aplysia kurodai (Sea Hare) Eggs Inhibits Streptolysin-Induced Hemolysis (2014)
  • 著者名/発表者名: Hasan I., Watanabe M., Ishizaki N., Sugita-Konishi Y., Kawakami Y., Suzuki J., Dogasaki C., Rajia S., Kawsar SM., Koide Y., Kanaly RA., Sugawara S., Hosono M., Ogawa Y., Fujii Y., Iriko H., Hamako J., Matsui T., Ozeki Y.
  • 雑誌名: Molecules 巻: 5 ページ: 13990-14003
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] pHとずり応力に感受性を持つ血漿タンパク質であるvon Willebrand因子の構造と機能 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛、濵子二治
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 24 ページ: 68-75
  • NAID: 130003367346
• [学会発表] Regulation of VWF-GPIB interaction with modified recombinant botrocetin (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsui T, Hori A, Hamako J, Matsushita F, Takagishi N, Kondo K, Kano T, Hayakawa M,Matsumoto M, Fujimura Y.
  • 学会等名: ISTH2015（国際血栓止血学会2015）
  • 発表場所: Toronto, Canada
  • 年月日: 2015-06-20
  • 国際学会
• [学会発表] Modification of ABO(H) blood group antigens on human VWF with plasma glycosyltransferase (2015)
  • 著者名/発表者名: Kano, T., Matsushita, F., Hamako, J., Kondo, K., Matsui, T.
  • 学会等名: ISTH2015（国際血栓止血学会2015）
  • 発表場所: MetroToronto Convention Centre, Canada
  • 年月日: 2015-06-20
  • 国際学会
• [学会発表] REGULATION OF VWF-GPIB INTERACTION WITH MODIFIED RECOMBINANT BOTROCETIN (2015)
  • 著者名/発表者名: T. Matsui, A. Hori, J. Hamako, F. Matsushita, N. Takagishi, K. Kondo, T. Kano, M. Hayakawa, M. Matsumoto, Y. Fujimura
  • 学会等名: ISTH2015（国際血栓止血学会2015）
  • 発表場所: トロント（カナダ）
  • 年月日: 2015-06-19 – 2015-06-24
• [学会発表] 変異導入組換えボトロセチン-2を用いた血小板凝集の制御 (2015)
  • 著者名/発表者名: 高岸波穂，堀有沙，濵子二治，松下文雄，松本雅則，早川正樹，藤村吉博，狩野泰輝，近藤一直，松井太衛
  • 学会等名: 第37回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 甲府市総合市民会館
  • 年月日: 2015-05-21
• [学会発表] Bitis arietansヘビ毒に含まれる血小板凝集惹起タンパク質ビチセチンの構造と機能 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛
  • 学会等名: H27年トキシンシンポジウムミニセミナー
  • 発表場所: 東京（順天堂大学）
  • 年月日: 2015-02-28
• [学会発表] フォンウィルブランド因子のグリコバイオロジー (2014)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛
  • 学会等名: 第20回ADAMTS13研究会
  • 発表場所: 奈良市（奈良ホテル）
  • 年月日: 2014-09-18
  • 招待講演
• [学会発表] VWF-GPIb依存性血小板凝集を惹起するヘビ毒ボトロセチンの発現と機能制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛，堀有紗，濵子二治，松下文雄，高岸菜穂，松本雅則，藤村吉博
  • 学会等名: 第61回トキシン・シンポジウム
  • 発表場所: 徳島（ルネサンス鳴門）
  • 年月日: 2014-09-03 – 2014-09-05
• [学会発表] VWF-GPIb依存性血小板凝集を制御する組換えボトロセチン-2変異体の発現 (2014)
  • 著者名/発表者名: 高岸波穂，堀有紗，松下文雄，濵子二治，狩野泰輝，近藤一直，松本雅則，藤村吉博，松井太衛
  • 学会等名: 第9回日本輪唱検査学教育学会
  • 発表場所: 東京（大田区産業プラザ）
  • 年月日: 2014-08-20 – 2014-08-22
• [学会発表] VWF-GPIb依存性血小板凝集を惹起するヘビ毒ボトロセチンの発現と機能制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松井太衛，堀有沙，濵子二治，松下文雄，高岸菜穂，松本雅則，藤村吉博
  • 学会等名: 第61回トキシン・シンポジウム
  • 発表場所: 鳴門市・ルネッサンスリゾートホテル
• [学会発表] 組換えボトロセチン-2におけるVWFおよびGPIb結合サイトの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 堀有沙、狩野泰輝、松下文雄、濵子二治、松本雅則、藤村吉博、松井太衛
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形市・山形国際ホテル
• [学会発表] ヒトVWFに存在するABO(H)血液型抗原の付加経路の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 狩野泰輝、堀有沙、松下文雄、濵子二治、松本雅則、藤村吉博、松井太衛
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形市・山形国際ホテル
• [学会発表] アガリクス(Agaricus blazei Murrill)に含まれるアガリチンの各種白血病細胞株に対する抗腫瘍効果について (2013)
  • 著者名/発表者名: 今村誠司、秋山秀彦、雪竹潤、松井太衛
  • 学会等名: 第8回日本臨床検査学教育学会学術大会
  • 発表場所: 吹田市・大阪大学コンベンションセンター
• [学会発表] VWFとGPIb依存性血小板凝集を惹起する組換えボトロセチン-2の作用部位の解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 堀有沙、狩野泰輝、松下文雄、濵子二治、松井太衛
  • 学会等名: 第8回日本臨床検査学教育学会学術大会
  • 発表場所: 吹田市・大阪大学コンベンションセンター
• [学会発表] ELISA系を用いた血液型A、B転移酵素活性の検出 (2013)
  • 著者名/発表者名: 狩野泰輝、堀有沙、松下文雄、濵子二治、近藤一直、松井太衛
  • 学会等名: 第8回日本臨床検査学教育学会学術大会
  • 発表場所: 吹田市・大阪大学コンベンションセンター
• [学会発表] ミャンマーにおける胃腸炎小児患者由来ヒトロタウイルスのGタイプおよびPタイプの分布状況 (2013)
  • 著者名/発表者名: 冨田万祐子、守口匡子、河本聡志、辻孝雄、ヌグエン・バン・サー 、梅田浩二、ショフィカー・ラーマン、小熊惠二、松井太衛、谷口孝喜
  • 学会等名: 第54回日本熱帯医学会大会
  • 発表場所: 長崎市・長崎ブリックホール
• [学会発表] アガリクスに含まれるアガリチンの白血病細胞株に対する抗腫瘍効果について (2013)
  • 著者名/発表者名: 秋山秀彦、今村誠司、雪竹 潤、松井太衛
  • 学会等名: 第60回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 神戸市・神戸国際会議場
• [備考] 藤田保健衛生大学医療科学部臨床検査学科教員紹介（松井 太衛）
  • URL: http://www.fujita-hu.ac.jp/teacher/health/e-health/m-taei/index.html
• [備考] 奈良県立医科大学輸血部
  • URL: http://www.naramed-u.ac.jp/~trans/