研究課題/領域番号 |
25640057
|
研究種目 |
挑戦的萌芽研究
|
配分区分 | 基金 |
研究分野 |
実験動物学
|
研究機関 | 公益財団法人東京都医学総合研究所 |
研究代表者 |
米川 博通 公益財団法人東京都医学総合研究所, 基盤技術研究センター, 特任研究員 (30142110)
|
研究分担者 |
設楽 浩志 公益財団法人東京都医学総合研究所, 基盤技術研究センター, 主任基盤技術研究職員 (90321885)
|
研究期間 (年度) |
2013-04-01 – 2015-03-31
|
研究課題ステータス |
完了 (2014年度)
|
配分額 *注記 |
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2013年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
|
キーワード | mtDNA / 遺伝子操作 / 人工ヌクレアーゼ / ミトコンドリア内局在型 / マウス / トランスジェニックマウス / TALEN / ミトコンドリアDNA / ミトコンドリア局在型TALEN / モデルマウス / ミトコンドリア病 |
研究成果の概要 |
本研究の目的は、人工ヌクレアーゼをmtDNAに直接作用可能な遺伝子操作技術を開発することである。そこで、TALEN法を応用し、TALEN cDNAにミトコンドリア移行シグナルとHA-tagなどを付加したミトコンドリア局在型TALENの発現ベクターを構築した。本ベクターで形質転換した培養細胞で免疫染色を行ったところ、TALEN蛋白がミトコンドリアに局在することを確認した。次いで、mtDNA上の標的配列に対する切断効果を検証するために、本ベクターからRNAを合成し、マイクロインジェクション法によってマウス初期胚へ導入したが、現在までに明らかな切断効果は認められておらず、さらなる検討を進めている。。
|