人工脂質膜を用いたRabの膜局在機構の解析

• 研究課題/領域番号: 25650018
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 伊藤 桜子 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教 (60597152)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
• キーワード: Rab / 膜 / GEF / 小胞 / 膜たんぱく質 / 膜タンパク質

研究成果の概要

低分子量GTPaseであるRabファミリータンパク質は、膜系表面に局在して各膜系の属性を示す。Rabは細胞質中でRabGDIと結合している。各膜系に応じて、適切なRabが、Rab-RabGDI複合体から解離されて膜に埋め込まれる。
本研究では、Yipファミリー膜タンパク質によるRabの膜挿入機構を人工脂質膜上に再構築することを目指した。まず、Yipを含むリポソームとRab-RabGDI複合体の調製方法を確立した。また、近年、複数のRabGEFが膜挿入活性を持つことが示されたので、数種類のRabGEFの調製方法も確立した。今後はこれらを用いてRabの膜挿入系の再構築を目指す。

研究成果

• [雑誌論文] Mechanisms of splicing-dependent trans-synaptic adhesion by PTPδ-IL1RAPL1/IL-1RAcP for synaptic differentiation (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamagata A., Yoshida, T., Sato, Y., Goto-Ito, S., Uemura, T., Maeda, A., Shiroshima, T., Iwasawa-Okamoto, S., Mori, H., Mishina, M., Fukai , S.
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 6 号: 1 ページ: 6926-6926
  • DOI: 10.1038/ncomms7926
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Structure of Slitrk2-PTPδ complex reveals mechanisms for splicing-dependent trans-synaptic adhesion (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamagata A., Sato, Y., Goto-Ito, S., Uemura, T., Maeda, A., Shiroshima, T., Yoshida, T., Fukai , S.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 5 号: 1 ページ: 9686-9686
  • DOI: 10.1038/srep09686
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Structural Basis for methyl-donor-dependent and sequence-specific binding to tRNA substrates by knotted methyltransferase TrmD (2015)
  • 著者名/発表者名: Takuhiro Ito, Isao Masuda, Ken-ichi Yoshida, Sakurako Goto-Ito, Shun-ichi Sekine, Se Won Suh, Ya-Ming Hou, Shigeyuki Yokoyama
  • 雑誌名: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 巻: 112 号: 31 ページ: 4197-205
  • DOI: 10.1073/pnas.1422981112
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著