LCP法とLSP法を併用した膜タンパク質の結晶構造解析

• 研究課題/領域番号: 25650019
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 西澤 知宏 東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (80599077)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2013年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
• キーワード: X線結晶構造解析 / 膜タンパク質 / 結晶化

研究概要

膜タンパク質の結晶構造解析における、結晶化法の技術開発を行った。通常、膜タンパク質の精製、結晶化は界面活性剤により可溶化された不安定な条件で行われることが多かったが、近年モノアシルグリセロールの形成する特殊な連続相を用いて、脂質中で膜タンパク質を結晶化させるLCP法が、高分解能の結晶構造解析に有効であることが示されてきた。本研究ではLCP法と、その発展形であるLSP法を併用することで、比較的幅広いターゲットに対してこの技術を適用することができるようになり、Ca2+/H+交換輸送体であるCAX、タイトジャンクション形成タンパクであるクローディンなどの構造解析に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Crystal structure of a claudin provides insight into the architecture of tight junctions (2014)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H, Nishizawa T, Tani K, Yamazaki Y, Tamura A, Ishitani R, Dohmae N, Tsukita S, Nureki O, Fujiyoshi Y
  • 雑誌名: Science 巻: 344 号: 6181 ページ: 304
  • DOI: 10.1126/science.1248571
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Crystal structure of a claudin provides insight into the architecture of tight junctions (2013)
  • 著者名/発表者名: Suzuki H、Nishizawa T、 Tani K、Yamazaki Y、Tamura A、 Ishitani R、Dohmae N、Tsukita S、 Nureki O、Fujiyoshi Y
  • 雑誌名: Science 巻: 344巻 ページ: 304-307
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for the counter-transport mechanism of a H+/Ca2+ exchanger (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa T、Kita S、Maturana AD、Furuya N、Hirata K、 Kasuya G、Ogasawara S、Dohmae N、 Iwamoto T、Ishitani R、Nureki O
  • 雑誌名: Science 巻: 341巻 ページ: 168-172
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural Basis for the Counter-Transport Mechanism of a H+/Ca2+ Exchanger (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishizawa T, Kita S, Maturana AD, Furuya N, Hirata K, Kasuya G, Ogasawara S, Dohmae N, Iwamoto T, Ishitani R, Nureki O
  • 雑誌名: Science 巻: 341 号: 6142 ページ: 168-172
  • DOI: 10.1126/science.1239002
  • 査読あり
• [学会発表] LCP結晶化ノウハウ (2013)
  • 著者名/発表者名: 西澤知宏
  • 学会等名: 平成25年度日本結晶学会年会および総会
  • 発表場所: 熊本大学(熊本)
  • 年月日: 2013-10-13
  • 招待講演
• [学会発表] プロトン・カルシウム交換輸送体における構造基盤 (2013)
  • 著者名/発表者名: 西澤知宏、石谷隆一郎、古屋憲孝、喜多紗斗美、岩本隆宏、アンドレアスマツラナ、濡木理
  • 学会等名: 第86回日本生化学大会インターナショナルシンポジウム
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 2013-09-13
  • 招待講演
• [学会発表] LCP結晶化ノウハウ (2013)
  • 著者名/発表者名: 西澤知宏
  • 学会等名: 平成25年度 日本結晶学会 年会および総会
  • 発表場所: 熊本大学(熊本）
  • 招待講演
• [学会発表] Structural Basis for the Counter-transport Mechanism of a H+/Ca2+ Exchanger (2013)
  • 著者名/発表者名: 西澤知宏, 石谷隆一郎, 古屋憲孝, 喜多紗斗美､ 岩本隆宏, アンドレアス マツラナ, 濡木理
  • 学会等名: 第86回日本生化学大会インターナショナルシンポジウム
  • 発表場所: 横浜パシフィコ（神奈川）
  • 招待講演