DNA損傷応答因子欠損細胞を用いた迅速、簡便かつ高感度な遺伝毒性検出法の研究

• 研究課題/領域番号: 25650124
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 遺伝・染色体動態
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 赤木 純一 国立医薬品食品衛生研究所, 病理部, 研究員 (60512556)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 損傷乗り越え複製 / 遺伝毒性試験 / 遺伝毒性試験法 / 遺伝毒性 / DNA損傷トレランス / Polη / Polι / Polκ

研究成果の概要

本研究ではTLSポリメラーゼのうちPolη、Polι、Polκを三重に欠損したTKO細胞の高感受性を利用した遺伝毒性試験法の実験条件および有用性の検討を行った。TKO細胞はさまざまな遺伝毒性物質に高感受性を示し、野生型細胞とTKO細胞のIC50の比は11種中10種の遺伝毒性物質に対して2倍以上であった。一方で6種の非遺伝毒性物質に対しては、TKO細胞は野生型細胞と同程度の感受性を示した。これらの結果から遺伝毒性物質に対するTKO細胞の高感受性を利用した新規in vitro遺伝毒性試験の有効性が予想され、IC50WT/IC50TKOが化学物質の遺伝毒性を判定する指標となりうると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Excision of translesion synthesis errors orchestrates responses to helix-distorting DNA lesions (2015)
  • 著者名/発表者名: Anastasia Tsaalbi-Shtylik, Cristina Ferrás, Bea Pauw, Giel Hendriks, Piya Temviriyanukul, Leone Carlée, Fabienne Calléja, Sandrine van Hees, Jun-Ichi Akagi, Shigenori Iwai, Fumio Hanaoka, Jacob G. Jansen, and Niels de Wind
  • 雑誌名: The Journal of Cell Biology 巻: 209 号: 1 ページ: 33-46
  • DOI: 10.1083/jcb.201408017
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 損傷乗り越え型DNAポリメラーゼη・ι・κ三重欠損細胞の変異原に対する高感受性を用いた遺伝毒性検出法の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 赤木 純一, 豊田 武士, Cho Young-Man, 横井 雅幸, 大森 治夫, 花岡 文雄, 小川 久美子
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 2014-11-27
• [学会発表] Site-specific replicative analysis of 6-4 photoproduct using a series of TLS polymerases deficient mouse cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Jun-ichi Akagi, Keiji Hashimoto, Masayuki Yokoi, Haruo Ohmori, Sigenori Iwai, Masaaki Moriya and Fumio Hanaoka
  • 学会等名: International Symposium on Xeroderma Pigmentosum and Related Diseases
  • 発表場所: 神戸国際会議場