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四型分泌機構を利用した革新的植物ゲノム改変技術の確立

研究課題

研究課題/領域番号 25660007
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 遺伝育種科学
研究機関広島大学

研究代表者

守口 和基  広島大学, 理学研究科, 講師 (30294523)

研究期間 (年度) 2013-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード四型分泌系 / ジーンターゲティング / 遺伝子水平伝達 / 四型分泌系(T4SS) / プラスミド / ジーンターゲティング技術の開発 / 酵母への簡便迅速遺伝子導入法 / 4型分泌系 / VirB/D4-T4SS / RP4-T4SS / pBBR plasmid / ジーンターゲティング法 / 生物界間接合 / 高等植物のジーンターゲティング / RK2-T4SS / oriT
研究成果の概要

我々は,RP4プラスミドの持つRP4-T4SSが酵母細胞内にssDNAを挿入した後に挿入DNAが正確に再環状化する現象を発見したことから,植物細胞のジーンターゲティング技術として応用することを目指した。
大腸菌から植物細胞へのRP4-T4SSを介した遺伝子導入は十分な移行効率ではなかった為,アグロバクテリアのVirB/D4-T4SSによるDNA移行を試みた結果,高効率で移行し植物細胞内で再環状化するプラスミドを見出した。このプラスミドを骨格にベクターを作成し,加えて組換え効率を上昇させる遺伝子を保持したヘルパープラスミドを作成し,ジーンターゲティングを試みたが,形質転換体の検出には至らなかった。

報告書

(5件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 2013 実施状況報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2016 2014 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (2件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] A Fast and Practical Yeast Transformation Method Mediated by Escherichia coli Based on a Trans-Kingdom Conjugal Transfer System: Just Mix Two Cultures and Wait One Hour2016

    • 著者名/発表者名
      Kazuki Moriguchi, Shinji Yamamoto, Yuta Ohmine, Katsunori Suzuki
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 11(2) 号: 2 ページ: e0148989-e0148989

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0148989

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書 2015 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 培養液を混合するだけ:生物界間接合を利用した迅速・簡便な出芽酵母形質転換法の確立2016

    • 著者名/発表者名
      守口和基
    • 学会等名
      第39回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2016-11-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] アグロバクテリアVirB ⁄D4システムによる植物細胞への広宿主域型プラスミドの移行2014

    • 著者名/発表者名
      井上 万莉野
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2014-11-25
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [備考] 広島大学 大学院 理学研究科 生物科学専攻 植物分子細胞構築学研究室

    • URL

      http://home.hiroshima-u.ac.jp/koutiku/

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [備考] 広島大学 大学院 理学研究科 生物科学専攻 植物分子細胞構築学研究室

    • URL

      http://home.hiroshima-u.ac.jp/bio/PMOLBBI/index.html

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書

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公開日: 2014-07-25   更新日: 2019-07-29  

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