新奇無細胞タンパク質合成系を用いたサリチル酸受容体の構造解析

• 研究課題/領域番号: 25660037
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 植物保護科学
• 研究機関: 名古屋大学 (2014); 香川大学 (2013)
• 研究代表者: 多田 安臣 名古屋大学, 学内共同利用施設等, 教授 (40552740)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 無細胞タンパク質合成系 / 植物免疫 / 無細胞タンパク質合成

研究成果の概要

無細胞タンパク質合成系によるタンパク質誘導能の最適化を行った。本研究により、アミノ酸、ATPやGTPの至適濃度を決定した。さらに、転写鋳型作成時に用いる3'UTR配列の至適化を行い、従来1000 bp以上の長い3'UTRを必要とするところを約20 bpまでに削減することに成功した。本配列及び、上記至適条件により、従来のタンパク質合成量と比較し、10倍以上の合成能力を得ることができた。現在本系を用いて、サリチル酸受容体のタンパク質立体構造解析を目的とした大量合成を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] SENSITIVE TO PROTON RHIZOTOXICITY1, CALMODULIN BINDING TRANSCRIPTION ACTIVATOR2, and other transcription factors are involved in ALUMINUM-ACTIVATED MALATE TRANSPORTER1 expression. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tokizawa M, Kobayashi Y, Saito T, Kobayashi M, Iuchi S, Nomoto M, Tada Y, Yamamoto YY, Koyama H
  • 雑誌名: Plant Physiology 巻: 167 号: 3 ページ: 991-1003
  • DOI: 10.1104/pp.114.256552
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Selective protein denitrosylation activity of Thioredoxin-h5 modulates plant Immunity (2014)
  • 著者名/発表者名: Kneeshaw S, Gelineau S, Tada Y, Loake GJ, Spoel SH
  • 雑誌名: Mol Cell 巻: 56 号: 1 ページ: 153-162
  • DOI: 10.1016/j.molcel.2014.08.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] DELLA functions as a transcriptional activator through the DNA binding of the INDETERMINATE DOMAIN family proteins (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, H., Hirano, K., Satoh, T., Mitsuda, N., Nomoto, M., Maeo, K., Kohketsu, E., Mitani, R., Kawamura, M., Is higuro, S., Tada, Y., Ohme-Takagi, M., Matsuoka, M., Ueguchi-Tanaka, M.
  • 雑誌名: Proceedings of the National Academy of Sciences 巻: 111 号: 21 ページ: 7861-7866
  • DOI: 10.1073/pnas.1321669111
  • 査読あり / オープンアクセス
• [産業財産権] 無細胞タンパク質合成系に用いるための翻訳促進剤及びその利用 (2015)
  • 発明者名: 多田安臣、野元美佳
  • 権利者名: 国立大学法人名古屋大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2015-03-09