RNAアプタマーによる腫瘍マーカー検出法の開発

• 研究課題/領域番号: 25670151
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 近畿大学 (2015); 名古屋市立大学 (2013-2014)
• 研究代表者: 藤原 俊伸 近畿大学, 薬学部, 教授 (80362804)
• 研究協力者: 上野 義仁 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (20250467)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: RNAアプタマー / 核酸医薬 / アプタマー

研究成果の概要

スフィンゴシン1-リン酸（S1P）は細胞表面に発現しているスフィンゴシン1-リン酸受容体（S1PR）と結合し、生理活性を発揮する。S1PRはこれまでに５つのサブタイプが同定され、それぞれ組織特異的に発現している。そして、近年S1PRがガンの悪性化に深く関わることが明らかになってきており、腫瘍マーカーとしての位置づけも重要となってきた。そこで、S1PRの各サブタイプと特異的に結合できる人工リガンドを「RNA」という高分子マテリアルを利用し、創製することを試みた。しかしながら、S1PR表面提示細胞の構築には成功し、whole Cell SELEXを試みたが、優位なRNAアプタマーは得られなかった。

研究成果

• [雑誌論文] The molecular mechanism of translational control via the communication between the microRNA pathway and RNA-binding proteins (2015)
  • 著者名/発表者名: Akira Fukao, Tomohiko Aoyama, Toshinobu Fujiwara
  • 雑誌名: RNA biology 巻: 12 号: 9 ページ: 922-926
  • DOI: 10.1080/15476286.2015.1073436
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regnase-1 and Roquin Regulate
a Common Element in Inflammatory mRNAs by Spatiotemporally Distinct Mechanisms (2015)
  • 著者名/発表者名: Takashi Mino, Yasuhiro Murakawa, Akira Fukao, Alexis Vandenbon, Hans-Hermann Wessels, Daisuke Ori, Takuya Uehata, Sarang Tartey, Shizuo Akira, Yutaka Suzuki, Carola G. Vinuesa, Uwe Ohler,
Daron M. Standley, Markus Landthaler, Toshinobu Fujiwara, Osamu Takeuchi.
  • 雑誌名: Cell 巻: 161 号: 5 ページ: 1058-1073
  • DOI: 10.1016/j.cell.2015.04.029
  • NAID: 120005608042
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Structural insights into the recruitment of SMRT by the corepressor SHARP under phosphorylative regulation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mikami S, Kanaba T, Takizawa N, Kobayashi A, Maesaki R, Fujiwara T, Ito Y,Mishima M.
  • 雑誌名: Structure. 巻: 22 号: 1 ページ: 35-46
  • DOI: 10.1016/j.str.2013.10.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Microbial fluorescence sensing for human neurotensin receptor type lusing Ga-engineered yeast cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Jun Ishii, Asami Oda, Shota Togawa, Akira Fukao, Toshinobu Fujiwara, Chiaki Ogino and Akihiko Kondo
  • 雑誌名: Analytical Biochemistry 巻: 446 ページ: 37-43
  • DOI: 10.1016/j.ab.2013.10.016
  • 査読あり
• [雑誌論文] The essential role for the RNA triphosphatase Cetlp in nuclear import of the mRNA capping enzyme Cetlp-Ceglp complex of Saccharomyces cerevisiae (2013)
  • 著者名/発表者名: Naoki Takizawa, Toshinobu Fujiwara, Manabu Yamasaki, Ayako Saito, Akira Fukao, Akio Nomoto, Kiyobisa Mizumoto
  • 雑誌名: ProsOne 巻: 8(10) 号: 10 ページ: e78000-e78000
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0078000
  • 査読あり
• [雑誌論文] Targeting cancer cell-specific RNA interference by siRNA delivery using a complex carrier of affibody-displaying bio-nanocapsules and liposomes. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishimura Y, Mieda H, Ishii J, Ogino C, Fujiwara T, Kondo A.
  • 雑誌名: J Nanobiotechnology. 巻: 11 号: 1 ページ: 19-19
  • DOI: 10.1186/1477-3155-11-19
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of the second RRM domain of Nrd1, a fission yeast MAPK target RNA binding protein, and implication for its RNA recognition and regulation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi A, Kanaba T, Satoh R, Fujiwara T, Ito Y, Sugiura R, Mishima M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 437 号: 1 ページ: 12-17
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.06.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Staphylococcal superantigen-like protein 10 (SSL10) inhibits blood coagulation by binding to prothrombin and factor Xa via theirγ-carboxyglutamic acid (Gla) domain (2013)
  • 著者名/発表者名: Itoh S, Yokoyama R, Kamoshida G, Fujiwara T, Okada H, Takii T, Tsuji T, Fujii S, Hashizume H, Onozaki K
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 288 号: 30 ページ: 21569-21580
  • DOI: 10.1074/jbc.m113.451419
  • 査読あり
• [学会発表] in vitro翻訳系を用いた新規創薬ターゲット同定法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 藤原俊伸
  • 学会等名: BMB2015 第38回日本分子生物学会年会 第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫県）
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] High affinity RNA for capping enzyme of Saccharomyces cerevisiae (2015)
  • 著者名/発表者名: Yuka Yamada, Manabu Yamasaki, Naoki Takizawa, Akira Fukao and Toshinobu Fujiwara
  • 学会等名: 11th Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutics Society
  • 発表場所: Leiden, the Netherlands
  • 年月日: 2015-10-11
  • 国際学会
• [学会発表] Analyses of cell type specific translation from the IRES mRNA derived from two different Poliovirus strains (2014)
  • 著者名/発表者名: 貞廣暁利、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] Dissecting roles of Paip1 in HuD mediated translation activation (2014)
  • 著者名/発表者名: 青山智彦、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] Effect of eIF4B phosphorylation by active Akt1 recruited into cap binding complex by HuD on translation (2014)
  • 著者名/発表者名: 矢野雄暉、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] 高辻良文、藤原俊伸 (2014)
  • 著者名/発表者名: Translational regulation by HuD through the interaction with eIF3
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] Functional relationship between HuD and Paip2 in differentiation of PC12 cells (2014)
  • 著者名/発表者名: 大塚衆志、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] Novel cell free translation system using human cultured cell lines (2014)
  • 著者名/発表者名: 深尾亜喜良、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] In vitro selection of RNA aptamer to SSTRs (2014)
  • 著者名/発表者名: 山田由佳、藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] High-throughput screening approach combining siRNA reverse-transfection and reporter mRNA transfection (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤原俊伸
  • 学会等名: 第 8 回 「 長野ミーティング :生物資源の有効利用を目指して」
  • 発表場所: 長野
• [学会発表] The mechanism of translational control which targets a translation initiation complexa (2013)
  • 著者名/発表者名: Akira Fukao, Nahum Sonenberg, Christian Thoma and Toshinobu Fujiwara
  • 学会等名: 2013 RiboClub Annual Meeting
  • 発表場所: ケベック
• [学会発表] The RNA-binding protein HuD regulates cap-dependent translation by binding to the mRNA nuclear export receptor TAP/NXF1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Ryosuke Satoh, Akira Fukao, Akio Nomoto and Toshinobu Fujiwara
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] HuD accelerates cap-dependent translation through eIF4B phosphorylation by active Akt1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Yuki Yano, Akira Fukao and Toshinobu Fujiwara
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [備考] 近畿大学薬学部医療薬学科生化学研究室ホームページ
  • URL: http://www.phar.kindai.ac.jp/biochemistry/index.html