腱・靭帯形成におけるmicroRNAの機能解析

• 研究課題/領域番号: 25860139
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 伊藤 義晃 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (50511044)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2013年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: microRNA / 腱・靭帯

研究成果の概要

腱に発現する転写因子であるMkxのVenusノックインマウスを用いて、E14.5組織からVenus陽性細胞をソーティングにより分離した細胞のtaqman array解析を行った。この中から骨格筋と比較してアキレス腱で発現の高い3つのmiRNAを同定した。約5000遺伝子の全長cDNA配列をルシフェラーゼ遺伝子の3’UTRに挿入したレポーターライブラリーを用いてmiRNAの標的遺伝子のスクリーニングを行い、3つの標的遺伝子を同定した。ゲノム編集技術を用いたノックアウトマウス作製法を開発し、腱で発現が高かったmiRNAのノックアウトマウスを作製・解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Targeted gene deletion of miRNAs in mice by TALEN system. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takada S, Sato T, Ito Y, Yamashita S, Kato T, Kawasumi M, Kanai-Azuma M, Igarashi A, Kato T, Tamano M, Amahara H.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 8 号: 10 ページ: e76004-e76004
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0076004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mohawk homeobox遺伝子による腱発生の制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 伊藤 義晃
  • 雑誌名: Pharma Medica 巻: 31(4) ページ: 47-50
• [学会発表] レポーターライブラリーシステムによるRNA結合タンパク質およびmicroRNAの標的遺伝子スクリーニング (2014)
  • 著者名/発表者名: 伊藤 義晃
  • 学会等名: 日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27