3次元培養を用いた下垂体前葉細胞の新規機能の探索とその調節機序の解明

• 研究課題/領域番号: 25860147
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 塚田 岳大 自治医科大学, 医学部, 講師 (50596210)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 下垂体前葉 / 濾胞星状細胞 / 3次元培養 / 細胞外マトリックス / コラーゲン / ラミニン / 組織構築 / TGFbeta

研究成果の概要

本研究の目的は、ハンギングドロップ法を用いた下垂体前葉細胞の3次元培養と濾胞星状細胞特異的にGFPタンパクを発現するS100b-GFP遺伝子改変ラットを組み合わせ、下垂体前葉の組織構築における濾胞星状細胞の役割を解き明かすことにある。本研究は、1）濾胞星状細胞がゴナドトロフで合成される基底膜成分ラミニンの放出に重要であること、2）濾胞星状細胞から分泌されるTGFb2が毛細血管の構成細胞である周皮細胞に作用してコラーゲン合成を調節していることを明らかにした。一連の研究により、濾胞星状細胞の新規機能が下垂体前葉の細胞外マトリックス調節であることがわかった。

研究成果

• [雑誌論文] Histochemical Analysis of Laminin α Chains in Diethylstilbestrol-Induced Prolactinoma in Rats (2015)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tofrizal A, Tsukada T, and Yashiro T
  • 雑誌名: Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａ 巻: 48 号: 2 ページ: 69-73
  • DOI: 10.1267/ahc.14067
  • NAID: 130005068299
  • ISSN: 0044-5991, 1347-5800
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isolation of dendritic-cell-like S100β-positive cells in rat anterior pituitary gland. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kotaro Horiguchi, Ken Fujiwara, Saishu Yoshida, Masashi Higuchi, Takehiro Tsukada, Naoko Kanno, Takashi Yashiro, Kozue Tateno, Shunji Osako, Takako Kato, Yukio Kato
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 巻: (印刷中) 号: 1 ページ: 301-308
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1817-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of chemokine CXCL10 in dendritic-cell-like S100β-positive cells in rat anterior pituitary gland (2014)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Fujiwara K,他11名
  • 雑誌名: Cell Tissue Res. 巻: 357 号: 3 ページ: 757-765
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1864-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] In situ hybridization analysis of the temporospatial expression of the midkine/pleiotrophin family in rat embryonic pituitary gland (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K,他9名
  • 雑誌名: Cell Tissue Res. 巻: 357 号: 1 ページ: 337-344
  • DOI: 10.1007/s00441-014-1875-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of Tropomodulin1 Contributes to the Regulation of Actin Filament Architecture in Cardiac Muscle (2014)
  • 著者名/発表者名: Bliss KT, Tsukada T, Novak SM, Dorovkov MV, Shah S, Nworu C, Kostyukova AS, and Gregorio CC
  • 雑誌名: FASEB J 巻: 28 号: 9 ページ: 3987-3995
  • DOI: 10.1096/fj.13-246009
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in Laminin Chain Expression in Pre- and Postnatal Rat Pituitary Gland (2014)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, Fujiwara K, Azuma M, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａ 巻: 47 号: 5 ページ: 231-237
  • DOI: 10.1267/ahc.14031
  • NAID: 130004700244
  • ISSN: 0044-5991, 1347-5800
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Folliculostellate Cells Are Required for Laminin Release from Gonadotrophs in Rat Anterior Pituitary (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Fujiwara K, Horiguchi K, Azuma M, Ramadhani D, Tofrizal A, Batchuluun K, Maliza R, Syaidah R, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａ 巻: 47 号: 5 ページ: 239-245
  • DOI: 10.1267/ahc.14036
  • NAID: 130004700245
  • ISSN: 0044-5991, 1347-5800
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Expression of the heparin-binding growth factor midkine and its receptor, Ptprz1, in adult rat pituitary (2014)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K, Horiguchi K, Maliza R, Tofrizal A, Batchuluun K, Ramadhani D, Syaidah R, Tsukada T, Azuma M, Kikuchi M, Yashiro T
  • 雑誌名: Cell Tissue Res 巻: 359 号: 3 ページ: 909-914
  • DOI: 10.1007/s00441-014-2073-8
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Changes in fine structure of pericytes and novel desmin-immunopositive perivascular cells during postnatal development in rat anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Jindatip D, Fujiwara K, Horiguchi K, Tsukada T, Kouki T, and Yashiro T
  • 雑誌名: Anat Sci Int 巻: Vol. 88 号: 4 ページ: 196-203
  • DOI: 10.1007/s12565-013-0180-3
  • NAID: 10031194446
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laminin and collagen modulate expression of the small leucine-rich proteoglycan fibromodulin in rat anterior pituitary gland (2013)
  • 著者名/発表者名: Syaidah R, Horiguchi K, Fujiwara K, Tsukada T, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Cell Tiss Res 巻: Vol. 354 号: 2 ページ: 633-638
  • DOI: 10.1007/s00441-013-1698-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reassembly of Anterior Pituitary Organization by Hanging Drop Three-Dimensional Cell Culture (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Kouki T, Fujiwara K, Ramadhani D, Horiguchi K, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 雑誌名: Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａ 巻: 46 号: 4 ページ: 121-127
  • DOI: 10.1267/ahc.13015
  • NAID: 130003361079
  • ISSN: 0044-5991, 1347-5800
  • 査読あり
• [学会発表] Transforming growth factor beta 2 from folliculostellate cells induces collagen synthesis in pericytes of rat anterior pituitary gland (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Ramadhani D, Syaidah R, Yashiro T
  • 学会等名: 第120回日本解剖学会
  • 発表場所: 兵庫
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [学会発表] Identification of tissue inhibitors of metalloproteinases-expressing cells in rat anterior pituitary gland (2014)
  • 著者名/発表者名: Azuma M, Batchuluun K, FujiwaraK, Tsukada T, Kikuchi M, Yashiro T
  • 学会等名: 第39回日本比較内分泌学学会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-09
• [学会発表] Immunohistochemical analysis of laminin isoform expression in diethylstilbestrol (DES)-treated rat as prolactinoma model (2014)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, Syaidah R, Yashiro T
  • 学会等名: 第18回日本内分泌病理学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-11-01 – 2014-11-02
• [学会発表] 下垂体前葉内S100タンパク質陽性細胞から分泌されるケモカインCXCL10のIFN-γによる制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎、吉田彩舟、藤原研、樋口雅司、塚田岳大、加藤たか子、舘野こずえ、長谷川瑠美、瀧上 周、大迫俊二、屋代 隆、加藤幸雄
  • 学会等名: 第41回日本神経内分泌学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるTGFb2の作用とTGFb受容体の組織内局在 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、藤原研、屋代隆
  • 学会等名: 第55回日本組織細胞化学会
  • 発表場所: 長野
  • 年月日: 2014-09-27 – 2014-09-28
• [学会発表] Alteration of laminin isoform expression in pituitary adenoma of diethylstilbestrol (DES)-treated rat (2014)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, and Yashiro
  • 学会等名: 第29回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-08-08 – 2014-08-19
• [学会発表] 樹状細胞様S100タンパク質陽性細胞から分泌されるケモカインCXCL10の機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎、吉田彩舟、藤原研、樋口雅司、塚田岳大、加藤たか子、舘野こずえ、長谷川瑠美、瀧上 周、大迫俊二、屋代 隆、加藤幸雄
  • 学会等名: 第29回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-08-08 – 2014-08-10
• [学会発表] ラット下垂体前葉における濾胞星状細胞と周皮細胞の相互作用： Transforming growth factor beta2を介したコラーゲン合成 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、Ramadhani Dini、藤原研、矢田部恵、喜幸富、屋代隆
  • 学会等名: 第29回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-08-08 – 2014-08-10
• [学会発表] Folliculostellate Cells Are Required for Laminin Release from Gonadotrophs in Rat Anterior Pituitary Gland (2014)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Azuma M, Ramadhani D, Batchuluun K, and Yashiro T
  • 学会等名: 16th International Congress of Endocrinology and The Endocrine Society’s 96th Annual Meeting & Expo
  • 発表場所: Chicago, IL, USA
  • 年月日: 2014-06-21 – 2014-06-24
• [学会発表] 下垂体前葉細胞のクロストーク―三次元培養法を用いた新たなアプローチ― (2014)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第87回日本内分泌学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2014-04-24 – 2014-04-26
  • 招待講演
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるエンケファリン前駆体遺伝子発現細胞の同定 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤原研、塚田岳大、Tofrizal bin Alimuddin、Rita Maliza、Khongorzul Batchuluun、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第119回日本解剖学会
  • 発表場所: 栃木
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるTGFbeta2を介した濾胞星状細胞と周皮細胞の新規細胞間相互作用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、藤原研、Ramadhani Dini、矢田部恵、屋代隆
  • 学会等名: 第119回日本解剖学会
  • 発表場所: 栃木
• [学会発表] aminin isoform expression during the anterior pituitary development of rat (2013)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, and Yashiro T
  • 学会等名: The Endocrine Society’s 95th Annual Meeting & Expo
  • 発表場所: San Francisco
• [学会発表] Folliculostellate cells interact with microvessel mural cell ‘pericyte’ to maintain collagen arrangement in rat anterior pituitary (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Fujiwara K, Ramadhani D, Kouki T, Kikuchi M, and Yashiro T
  • 学会等名: The Endocrine Society’s 95th Annual Meeting & Expo
  • 発表場所: San Francisco
• [学会発表] 胎生ラット下垂体におけるミッドカインの発現 (2013)
  • 著者名/発表者名: 藤原研、Rita Maliza、Khongorzul Batchuluun、Dini Ramadhani、矢田部恵、塚田岳大、屋代隆
  • 学会等名: 第28回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 岩手
• [学会発表] Spatio-temporal expression of laminin isoforms in rat anterior pituitary gland during the postnatal development (2013)
  • 著者名/発表者名: Ramadhani D, Tsukada T, Azuma M, Tofrizal A, Maliza R, Batchuluun K, Syaidah R, and Yashiro T
  • 学会等名: 第17回日本内分泌病理学会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] ラット下垂体前葉におけるTGFb2の発現とその作用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塚田岳大、堀口幸太郎、菊地元史、屋代隆
  • 学会等名: 第38回日本比較内分泌学学会
  • 発表場所: 宮崎
• [図書] “B-type natriuretic peptide”, “C-type natriuretic peptides” and “Ventricular natriuretic peptide” in Handbook of Hormones: Comparative and General Endocrinology (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T
  • 出版者: Elsevier
• [図書] "Evolution of Natriuretic Peptide System" in Reference Module in Biomedical Research (2014)
  • 著者名/発表者名: Takei Y and Tsukada T
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: Elsevier
• [図書] Eel Physiology (2013)
  • 著者名/発表者名: Tsukada T, Wong MK, Ogoshi M, and Yuge S
  • 総ページ数: 370
  • 出版者: CRC press