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CRISPR/Cas9を用いた多重遺伝子ノックアウトラット作製技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 25890011
研究種目

研究活動スタート支援

配分区分補助金
研究分野 実験動物学
研究機関京都大学

研究代表者

吉見 一人  京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (50709813)

研究期間 (年度) 2013-08-30 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワードラット / ゲノム編集 / ノックアウト / ノックイン / CRISPR/Cas9 / CRISPR/Cas / チロシナーゼ
研究成果の概要

本研究では、毛色関連遺伝子Tyr、Asip、Kit遺伝子を対象に、遺伝子改変技術CRISPR/Cas9を利用した効率的なノックアウトラット作製システムの構築を行った。また、一本鎖オリゴヌクレオチドを用いることで、破壊だけでなく特定の配列に置き換えるノックイン技術の確立も行った。ラット受精卵にマイクロインジェクション法によりRNAを導入することで、すべての遺伝子についてノックアウトおよびノックインを得ることができた。これらの遺伝子を修復したノックイン個体は、表現型が修復することを確認した。

報告書

(3件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2015 2014 2013 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (12件) (うち招待講演 2件) 図書 (1件) 備考 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Allele-specific genome editing and correction of disease-associated phenotypes in rats using the CRISPR-Cas platform.2014

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Birger Voigt, Tomoji Mashimo
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 5 号: 1 ページ: 4240-4240

    • DOI

      10.1038/ncomms5240

    • NAID

      120005451811

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] ラットにおけるゲノム編集技術革命(Progress of genome editing technologies in rats)2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、金子武人、真下知士
    • 雑誌名

      実験医学

      巻: 32 (11) ページ: 1715-1720

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [雑誌論文] ラットにおけるTALENおよびCRISPR/Cas9を用いた遺伝子改変2013

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、金子武人、真下知士
    • 雑誌名

      実験医学別冊 最強のステップアップシリーズ「今すぐ始めるゲノム編集」(山本卓/編)

      巻: - ページ: 109-119

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Improved Protocols for Generating Genetically-modified Rats with the CRISPR/Cas9 System2015

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Birger Voigt, Tomoji Mashimo
    • 学会等名
      BRI International Symposium 2015
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2015-03-05 – 2015-03-06
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Improved Protocols for Generating Genetically-modified Rats with the CRISPR/Cas9 System2014

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Birger Voigt, Tomoji Mashimo
    • 学会等名
      2014 Rat Genomics & Models
    • 発表場所
      Hinxton, UK
    • 年月日
      2014-12-01 – 2014-12-04
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Casシステムによるノックインラットの作製法 (Efficient generation of knock-in rats using CRISPR/Cas system)2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、金子武人、真下知士
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会総会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Cas9を利用した効率的な遺伝子改変ラット作製法2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、国広弥生、林真智子、服部晃佑、金子武人、真下知士
    • 学会等名
      第4回ゲノム編集研究会
    • 発表場所
      広島
    • 年月日
      2014-10-06 – 2014-10-07
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ゲノム編集技術がもたらす実験動物の新展開 ~ラットを中心に~2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人
    • 学会等名
      第31回藤田カンファレンス
    • 発表場所
      大阪
    • 年月日
      2014-09-20 – 2014-09-21
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Allele-specific genome editing and correction of coat color-related phenotypes in rats using the CRISPR/Cas system2014

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Birger Voigt, Tomoji Mashimo
    • 学会等名
      Cold Spring Harbor Asia Conference “Systems Biology of Gene Regulation and Genome Editing”
    • 発表場所
      Suzhou, China
    • 年月日
      2014-09-09 – 2014-09-12
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Allele-specific genome editing and correction of coat color-related phenotypes in rats using CRISPR/Cas92014

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi
    • 学会等名
      5th Young EURAT Investigators Symposium
    • 発表場所
      Malaga, Spain
    • 年月日
      2014-06-05 – 2014-06-06
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Casを用いたノックインラットの作製2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、金子武人、真下知士
    • 学会等名
      第61回日本実験動物学会総会
    • 発表場所
      札幌
    • 年月日
      2014-05-15 – 2014-05-17
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Casシステム:ラット遺伝子改変技術のさらなる展開2014

    • 著者名/発表者名
      吉見一人
    • 学会等名
      第7回ラットリソースリサーチ研究会
    • 発表場所
      京都大学、京都
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] CRISPR/Casを用いたSNP特異的遺伝子改変ラットの作製2013

    • 著者名/発表者名
      吉見一人、金子武人、芹川忠夫、真下知士
    • 学会等名
      第3回ゲノム編集研究会
    • 発表場所
      広島大学、東広島
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Knockout and knock-in mutations for rat albino gene generated by CRISPR/Cas2013

    • 著者名/発表者名
      Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Tomoji Mashimo
    • 学会等名
      2013 Rat Genomics & Models Meeting
    • 発表場所
      Cold Spring Harbor, NY, USA
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Gene targeting technologies in rats: ZFN, TALEN, and CRISPR2013

    • 著者名/発表者名
      Tomoji Mashimo, Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Tadao Serikawa
    • 学会等名
      2013 Rat Genomics & Models Meeting
    • 発表場所
      Cold Spring Harbor, NY, USA
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [図書] Targeted Genome Editing Using Site-Specific Nucleases2015

    • 著者名/発表者名
      Takashi Yamamoto, Hiroshi Ochiai, Tetsushi Sakuma, Kazuto Yoshimi, Takehito Kaneko, Birger Voigt, Tomoji Mashimo 他
    • 総ページ数
      205
    • 出版者
      Springer Japan
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] CRISPR/Casシステムを用いたアレル特異的ゲノム編集とラット毛色突然変異の修復

    • URL

      http://www.kyoto-u.ac.jp/ja/research/research_results/2014/140626_1.html

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [産業財産権] 哺乳動物の標的ゲノム領域にDNAをノックインする方法及び細胞2014

    • 発明者名
      真下知士、吉見一人、金子武人
    • 権利者名
      真下知士、吉見一人、金子武人
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2014-11-20
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

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公開日: 2013-09-12   更新日: 2019-07-29  

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