| 研究課題/領域番号 |
25892012
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| 研究種目 |
研究活動スタート支援
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
獣医学
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
野口 俊助 山口大学, 獣医学部, 准教授 (10701295)
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| 研究期間 (年度) |
2013-08-30 – 2015-03-31
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| 研究課題ステータス |
採択後辞退 (2014年度)
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| 配分額 *注記 |
2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | メラノーマ / microRNA-203 / メラノソーム輸送 / KIF5ｂ |
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| 研究概要 |
平成25年度は、ヒトメラノーマ細胞を用いて、miR-203のメラノソーム輸送及びそれに関与する標的遺伝子の同定を行った。
ヒトメラノーマ細胞にmiR-203を導入すると、メラニン産生に重要なチロシナーゼのタンパク発現が上昇し、免疫蛍光染色においてメラノソームのマーカーであるHMB45が核周囲に集積することが明らかとなった。また、ウエスタンブロッティング及びルシフェラーゼアッセイにより、細胞内の物質輸送に関わるKIF5ｂがmiR-203の標的遺伝子であることが明らかとなった。さらに、siRNAを用いてKIF5ｂをノックダウンすると、miR-203を導入したときと同様にチロシナーゼの発現上昇とメラノソームの核周囲における集積が認められた。
以上のことから、miR-203はKIF5ｂを標的とし、その発現を抑制することでメラノーマ細胞におけるメラノソーム輸送の阻害及びメラニン顆粒の産生亢進に関わっていることが示唆された。以上の成果をJournal of Investigative Dermatology誌に投稿し、受理された。
本研究で明らかとなったmiR-203の機能がin vivoでも再現可能かを、ヌードマウスに移植したメラノーマ細胞にmiR-203を局所投与して、組織学的に免疫蛍光染色で検証を行ったが、光学顕微鏡では細胞内のメラノソームの微細な局在を評価することが困難であった。
miR-203がメラノーマにおけるがん抑制遺伝子であることが明らかとなりつつあるが、メラニン産生やメラニン輸送といったメラニン細胞に特異的な機能にmiR-203が関与することが、本研究より明らかとなった。したがって、miR-203はメラノーマの発生や進行に中心的に関与するmiRNAであると考えられ、miR-203の発現を調節することはメラノーマの治療に有効である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
理由
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
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