マダニ由来培養細胞株の樹立ならびにマダニ類が保有するウイルスの網羅的探索

• 研究課題/領域番号: 25893151
• 研究種目: 研究活動スタート支援
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 寄生虫学(含衛生動物学)
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 鍬田 龍星 山口大学, 理工学研究科, 研究員 (00711219)
• 研究期間 (年度): 2013-08-30 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2013年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
• キーワード: マダニ / 培養細胞 / ウイルス / 感染症 / 媒介節足動物 / 蚊 / 衛生害虫

研究成果の概要

本研究では（1）本邦マダニ由来の細胞株樹立の試みと（2）本邦マダニが保有・媒介するウイルスの網羅的探索を行った。
（1）タカサゴキララマダニ体内組織をVP-12培地（FBS15%TPB15%添加）で培養した実験区において、一部、細胞分化の誘導が認められた。現在、細胞接着能のより高い培養容器を用いて、同条件下での培養を再度試みている。
（2）山口県を中心に、国内で旗振り法または野生動物に寄生しているマダニを採集し、ウイルス保有状況を調査した。その結果、これまで日本で報告の無いウイルスの遺伝子を検出することに成功した。これらの発見に関して、現在、詳細な解析を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Establishment and characterization of two new cell lines from the mosquito Armigeres subalbatus (Coquillett) (Diptera: Culicidae) (2015)
  • 著者名/発表者名: Hoshino K., Isawa H., Kuwata R., Tajima S., Takasaki T., Iwabuchi K., Sawabe K., Kobayashi M., Sasaki T.
  • 雑誌名: In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal 巻: 12 Mar 号: 7 ページ: 00-00
  • DOI: 10.1007/s11626-015-9883-1
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Analysis of mosquito-borne flavivirus superinfection in Culex tritaeniorhynchus cells persistently infected with Culex flavivirus. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kuwata R, Isawa H, Hoshino K, Sasaki T, Kobayashi M, Maeda K, Sawabe K
  • 雑誌名: Journal of Medical Entomology 巻: 52 号: 2 ページ: 222-229
  • DOI: 10.1093/jme/tju059
  • 査読あり
• [雑誌論文] Heterogeneity of the large subunit of ribosomal RNA gene sequences in a Halicephalobus gingivalis isolate. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshiga T, Kuwata R, Takai H, Nishimura K
  • 雑誌名: Nematology 巻: 16 ページ: 1233-1236
  • 査読あり
• [雑誌論文] Emergence of pathogenic coronaviruses in cats by homologous recombination between feline and canine coronaviruses. (2014)
  • 著者名/発表者名: Terada Y, Matsui N, Noguchi K, Kuwata R, Shimoda H, Soma T, Mochizuki M, Maeda K
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 号: 9 ページ: e106534-e106534
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0106534
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] First isolation and characterization of a mosquito-borne orbivirus belonging to the species Umatilla virus in East Asia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Ejiri H, Kuwata R, Tsuda Y, Sasaki T, Kobayashi M, Sato Y, Sawabe K, Isawa H.
  • 雑誌名: Arch Virol. 巻: 159 号: 10 ページ: 2675-2685
  • DOI: 10.1007/s00705-014-2117-0
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Seroprevalence of Japanese encephalitis virus infection in captive Japanese macaques (Macaca fuscata). (2014)
  • 著者名/発表者名: Shimoda H, Saito A, Noguchi K, Terada Y, Kuwata R, Akari H, Takasaki T, Maeda K
  • 雑誌名: Primates 巻: 55 号: 3 ページ: 441-445
  • DOI: 10.1007/s10329-014-0421-7
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 蚊が保有・媒介するウイルス感染症 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，杉山弘樹，下田宙，前田健
  • 雑誌名: 日本獣医寄生虫学会誌 巻: 13 ページ: 91-101
• [雑誌論文] 日本脳炎媒介蚊コガタアカイエカが保有・媒介するウイルス (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星
  • 雑誌名: 日本衛生動物学会 巻: 65(1) ページ: 1-11
  • NAID: 130004714255
  • 査読あり
• [雑誌論文] Surveillance of Japanese encephalitis virus infection in mosquitoes in Vietnam from 2006 to 2008. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuwata R. Nga P.T., Yen N.T., Hoshino K., Isawa H., Higa Y., Hoang N.V., Trang B.M., Loan D.P., Phong T.V., Sasaki T., Tsuda Y., Kobayashi M., Sawabe K., Takagi M
  • 雑誌名: Am. J. Trop. Med. Hyg. 巻: 88 号: 4 ページ: 681-688
  • DOI: 10.4269/ajtmh.12-0407
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dak Nong virus, a novel insect nidovirus isolated from Culex mosquitoes in Vietnam (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuwata R., Satoh T., Isawa H., Yen N.T., Phong T.V., Nga P.T., Kurashige T., Hiramatsu Y., Fukumitsu Y., Hoshino K., Sasaki T., Kobayashi M., Mizutani T., Sawabe K
  • 雑誌名: Arch. Virol 巻: 158(in press) 号: 11 ページ: 2273-84
  • DOI: 10.1007/s00705-013-1741-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] マダニが保有・媒介するウイルス感染症 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星、高野愛、下田宙、前田健
  • 雑誌名: 獣医寄生虫学会誌 巻: 12(1) ページ: 32-43
• [学会発表] 蚊より分離されたRNAウイルスについて (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • 学会等名: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市）
  • 年月日: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [学会発表] SFTSウイルスの生活環における動物の重要性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 前田健，濱崎千菜美，下田宙，鍬田龍星，野口慧多，米満研三，高野愛，鈴木和男，森川茂
  • 学会等名: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市）
  • 年月日: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [学会発表] 致死性猫コロナウイルス流行の分子疫学調査 (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺田豊，堀小郁，相馬武久，Van Dung Nguyen，野口慧多，鍬田龍星，下田宙，宇根有美，前田健
  • 学会等名: 第62回 日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-10 – 2014-11-12
• [学会発表] 牛舎捕集蚊の消長と分離ウイルスについて (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • 学会等名: 第21回 トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市）
  • 年月日: 2014-11-09
• [学会発表] 野生動物、ダニからフラビウイルス遺伝子検出 (2014)
  • 著者名/発表者名: 米満研三，下田宙，鍬田龍星，寺田豊，高野愛，前田健
  • 学会等名: 第21回 トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜市）
  • 年月日: 2014-11-09
• [学会発表] 日本脳炎ウイルスの細胞馴化に伴う遺伝子変異について (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，竹之内惇，木村菜穂，寺田豊，野口慧多，白藤浩明，下島昌幸，下田宙，前田健
  • 学会等名: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] 国内捕集蚊およびマダニ由来のオルビウイルス (2014)
  • 著者名/発表者名: 江尻寛子，鍬田龍星，伊澤晴彦，林昌宏，山口幸恵，伊藤睦代， 高崎智彦，小滝徹，佐々木年則，津田良夫，林利彦，小林睦生，西條政幸，沢辺京子
  • 学会等名: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の疫学調査 (2014)
  • 著者名/発表者名: 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • 学会等名: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] 国内の野生動物およびダニから新規フラビウイルスの検出 (2014)
  • 著者名/発表者名: 下田宙，米満研三，早坂大輔，好井健太朗，寺田豊，野口慧多， 鍬田龍星，高野愛，前田健
  • 学会等名: 第157回 日本獣医学会 学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] 山口捕集蚊より分離されたウイルスの性状解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，杉山弘樹，濵﨑千菜美，南昌平，鈴木絢子，服部志保， 米満研三，寺田豊，野口慧多，下田宙，前田健
  • 学会等名: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • 発表場所: 山口大学（山口市）
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [学会発表] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の拡大傾向 (2014)
  • 著者名/発表者名: 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • 学会等名: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • 発表場所: 山口大学（山口市）
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [学会発表] スンクスからの新規コロナウイルスの検出 (2014)
  • 著者名/発表者名: 寺田豊，下田宙，野口慧多，Nguyen Van Dung，鍬田龍星，高野愛， 本道栄一，前田健
  • 学会等名: 第29回 中国四国ウイルス研究会
  • 発表場所: 山口大学（山口市）
  • 年月日: 2014-06-28 – 2014-06-29
• [学会発表] 牛舎の蚊からのウイルス検出について (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星，竹之内惇，米満研三，服部志保，鈴木絢子，南昌平，濵﨑千菜美，野口慧多，寺田豊，下田宙，藤島政博，前田健
  • 学会等名: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: ホテルニュータナカ（山口市）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [学会発表] 野生動物におけるSFTSウイルス感染の疫学調査 (2014)
  • 著者名/発表者名: 浜崎千菜美，鍬田龍星，野口慧多，寺田豊，下田宙，高野愛，鈴木和男，森川茂，前田健
  • 学会等名: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: ホテルニュータナカ（山口市）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [学会発表] 国内で捕集された蚊およびマダニから分離されたオルビウイルスの性状解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 江尻寛子，鍬田龍星，伊澤晴彦，佐々木年則，津田良夫，林利彦，小滝徹，高崎智彦，小林睦生，沢辺京子
  • 学会等名: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: ホテルニュータナカ（山口市）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [学会発表] 海外飛来コガタアカイエカ調査及びミトコンドリアDNA COI遺伝子の制限酵素切断パターンによる鑑別 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大迫英夫，吉岡健太，鍬田龍星，沢辺京子，原田誠也
  • 学会等名: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: ホテルニュータナカ（山口市）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [学会発表] マダニ相に関する国内調査 (2014)
  • 著者名/発表者名: 沢辺京子，山内健生，橋本知幸，野田伸一，渡辺護，鍬田龍星，前田健，佐藤智美，前川芳秀，林利彦，小林睦生
  • 学会等名: 第49回 日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: ホテルニュータナカ（山口市）
  • 年月日: 2014-05-16 – 2014-05-17
• [学会発表] マダニおよび野生動物におけるSFTSウイルスの感染状況 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星
  • 学会等名: 第66回日本衛生動物学会大会
  • 発表場所: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
  • 招待講演
• [学会発表] 牛舎における蚊の消長とウイルス保有状況 (2014)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星、竹之内惇、米満研三、服部志保、鈴木絢子、南昌平、濵﨑千菜美、野口慧多、寺田豊、藤島政博、下田宙、前田健
  • 学会等名: 第66回日本衛生動物学会大会
  • 発表場所: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [学会発表] 国内捕集蚊からのオルビウイルスの分離ならびに性状解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 江尻寛子、伊澤晴彦、津田良夫、鍬田龍星、小林睦生、佐々木年則、佐藤雪太、沢辺京子
  • 学会等名: 第66回日本衛生動物学会大会
  • 発表場所: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [学会発表] ヤブカ属蚊由来培養細胞の樹立の試み (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林大介、伊澤晴彦、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、太田伸生、沢辺京子
  • 学会等名: 第66回日本衛生動物学会大会
  • 発表場所: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [学会発表] 2013年晩秋に実施したマダニ相に関する国内調査 (2014)
  • 著者名/発表者名: 沢辺京子、山内健生、橋本知幸、野田伸一、渡辺護、平林公男、鍬田龍星、前田健、安藤勝彦、鎮西康雄、佐藤智美、前川芳秀、林利彦、小林睦生
  • 学会等名: 第66回日本衛生動物学会大会
  • 発表場所: 岐阜大学（岐阜県岐阜市）
• [学会発表] 昆虫特異的フラビウイルス Aedes flavivirus の自然界における維持機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小林大介、伊澤晴彦、糸川健太郎、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、糸山享、太田伸生、沢辺京子
  • 学会等名: 第58回日本応用動物昆虫学会大会
  • 発表場所: 高知大学（高知県高知市）
• [学会発表] ベトナム捕集蚊より分離された新規ニドウイルスの性状解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鍬田龍星、佐藤朝光、伊澤晴彦、Yen, Nguyen Thi、Phong, Tran Vu、Nga, Phan Thi、倉重友和、平松征洋、福光由起、星野啓太、佐々木年則、水谷哲也、前田健、小林睦生、沢辺京子
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [学会発表] 日本脳炎ウイルスの細胞馴化による感染性の変化 (2013)
  • 著者名/発表者名: 竹之内惇、下田宙、下島昌幸、鍬田龍星、前田 健
  • 学会等名: 第20回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [学会発表] 山口県のイノシシからダニ媒介性脳炎ウイルス様遺伝子の検出 (2013)
  • 著者名/発表者名: 下田宙、早坂大輔、好井健太郎、米満研三、寺田豊、野口慧多、鍬田龍星、高野愛、前田健
  • 学会等名: 第20回トガ・フラビ・ペスチウイルス研究会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
• [学会発表] 昆虫特異的フラビウイルスAedes flavivirus (AEFV)の性状解析ならびに伝播様式の解析
  • 著者名/発表者名: 小林大介、伊澤晴彦、鍬田龍星、星野啓太、江尻寛子、佐々木年則、小林睦生、糸山享、太田伸生、沢辺京子
  • 学会等名: 第65回日本衛生動物学会東日本支部大会
  • 発表場所: 川口総合文化センター（埼玉県川口市）