• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

呼吸鎖複合体-Iの1分子計測を実現する特異的化学修飾法の確立

研究課題

研究課題/領域番号 26292060
研究種目

基盤研究(B)

配分区分一部基金
応募区分一般
研究分野 生物有機化学
研究機関京都大学

研究代表者

三芳 秀人  京都大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (20190829)

連携研究者 村井 正俊  京都大学, 大学院農学研究科, 助教 (80543925)
古池 晶  大阪医科大学, 医学部, 講師 (60392875)
藤原 敬宏  京都大学, 物質細胞統合システム拠点, 講師 (80423060)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
16,380千円 (直接経費: 12,600千円、間接経費: 3,780千円)
2016年度: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円)
2015年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2014年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
キーワード生物制御化学 / 呼吸鎖複合体-I / 化学修飾 / ユビキノン / ミトコンドリア呼吸鎖 / トシル化学 / 複合体-I / ミトコンドリア / 呼吸鎖 / 呼吸鎖酵素
研究成果の概要

呼吸鎖NADH-キノン酸化還元酵素(以後、複合体-I)のX線結晶構造に基づいて、ピストン運動モデルが2013年に提案された。この酵素の動きを1分子計測によって検証することを目標に見据え、動きを検出するプローブ分子を、複合体-Iに対して位置特異的に化学修飾することにより、1分子計測を可能にする技術的基盤を開拓することを目指した。トシル化学法によって、ウシ心筋ミトコンドリア複合体-Iのキノン結合ポケットを構成する49 kDaサブユニットのAsp160を特異的にアジド化する方法論を確立した。さらに、このアジド基を足場として、いろいろな2次タグをクリックケミストリーで導入できることを示した。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2017 2016 2015 2014 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (5件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Specific methylation of Asp160 (49 kDa subunit) located inside the quinone binding cavity of bovine mitochondrial complex I2016

    • 著者名/発表者名
      Murai, M., Inaoka, H., Masuya, T., Aburaya, S., Aoki, W., and Miyoshi, H.
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 55 号: 23 ページ: 3189-3197

    • DOI

      10.1021/acs.biochem.6b00190

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Characterization of the reaction of decoupling ubiquinone with bovine mitochondrial respiratory complex I2016

    • 著者名/発表者名
      Masuya, T., Okuda, K., Murai, M. and Miyoshi, H.
    • 雑誌名

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      巻: 80 号: 8 ページ: 1463-1469

    • DOI

      10.1080/09168451.2016.1179095

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reduction of synthetic ubiquinone QT catalyzed by bovine mitochondrial complex I is decoupled with proton translocation2016

    • 著者名/発表者名
      Okuda, K., Murai, M., Aburaya, S., Aoki, W. and Miyoshi, H.
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 55 号: 3 ページ: 470-481

    • DOI

      10.1021/acs.biochem.5b01090

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Identification of the binding position of amilorides in the quinone binding pocket of mitochondrial complex I2015

    • 著者名/発表者名
      Ito, T. Murai, M., Morisaka, H., and Miyoshi, H.
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 54 号: 23 ページ: 3677-3686

    • DOI

      10.1021/acs.biochem.5b00385

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Site-specific chemical labeling of mitochonodrial respiratory complex I through ligand-directed tosylate chemistry2014

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Masutani, Masatoshi Murai, Kentaro Ifuku, Hironobu Morisaka, Hideto Miyoshi
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 53 号: 14 ページ: 2307-2317

    • DOI

      10.1021/bi500205x

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Pinpoint chemical modification of Asp160 in the 49 kDa subunit of bovine mitochondrial complex I via a combination of ligand-directed tosyl chemistry and click chemistry2014

    • 著者名/発表者名
      Masuya, T., Murai, M., Morisaka, H. and Miyoshi, H.
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 53 号: 49 ページ: 7816-7823

    • DOI

      10.1021/bi501342w

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] ミトコンドリア呼吸鎖複合体-Iの位置特異的化学修飾2017

    • 著者名/発表者名
      桝谷貴弘、村井正俊、三芳秀人
    • 学会等名
      日本農芸化学会
    • 発表場所
      京都女子大
    • 年月日
      2017-03-18
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iによる合成ユビキノンQTの還元2016

    • 著者名/発表者名
      桝谷貴洋、奥田健司、村井正俊、三芳秀人
    • 学会等名
      日本農薬学会第41回大会
    • 発表場所
      島根大学
    • 年月日
      2016-03-17
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ミトコンドリア複合体-I阻害剤としてのアミロライド類の作用機構研究2016

    • 著者名/発表者名
      伊藤剛、村井正俊、村上園美、森坂裕信、三芳秀人
    • 学会等名
      日本農薬学会第41回大会
    • 発表場所
      島根大学
    • 年月日
      2016-03-17
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iのピンポイント化学就職2015

    • 著者名/発表者名
      桝谷貴洋、村井正俊、森坂裕信、三芳秀人
    • 学会等名
      日本農芸化学会2015年度大会
    • 発表場所
      岡山大学・津島キャンパス
    • 年月日
      2015-03-27 – 2015-03-29
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ミトコンドリア複合体-Iのピンポイント化学就職2014

    • 著者名/発表者名
      桝谷貴洋、村井正俊、三芳秀人
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会
    • 発表場所
      愛媛大学・南加記念ホール
    • 年月日
      2014-12-11 – 2014-12-13
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] 生物機能制御化学研究室ホームページ

    • URL

      http://www.biofunc-chem.kais.kyoto-u.ac.jp/

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書 2014 実績報告書

URL: 

公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi