逆遺伝子操作による鳥ロタウイルスの病原性発現分子機構の解明

• 研究課題/領域番号: 26292148
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 一部基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 杉山 誠 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (80196774)
• 研究分担者: 伊藤 直人 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (20334922)
• 研究協力者: 岡寺 康太 ; 三竹 博道 ; 岡田 和真 ; 中川 賢人 ; 山田 大悟
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 13,390千円 (直接経費: 10,300千円、間接経費: 3,090千円); 2016年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2015年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2014年度: 5,980千円 (直接経費: 4,600千円、間接経費: 1,380千円)
• キーワード: 鳥ロタウイルスA / 遺伝的多様性 / 遺伝子操作系 / ロタウイルス / 病原性発現機構 / 逆遺伝子操作 / 獣医学 / 逆遺伝子操作系

研究成果の概要

鳥ロタウイルスA(RVA)の哺乳類への病原性の分子機構を解明するため、初めに鳥RVAの遺伝的多様性を明らかにした。解読した鳥RVA3株と既知RVAのゲノムの全分節ORFについて比較解析した。我々が解読した2遺伝子が、ロタウイルス遺伝子型認定機関により新規遺伝子型に認定された。次に、哺乳動物に病原性を示す鳥RVA・PO-13株ゲノムの細胞内合成にT7プロモーターとpolIIプロモーターを用いた逆遺伝子操作系を作製した。いずれの方法でも、ウイルスを回収できなかった。しかし、polIIプロモーターを用いた系ではRVAレプリコンの構築が確認でき、細胞内でのウイルスの転写・複製の再現が示された。

研究成果

• [雑誌論文] Isolation and Characterization of a Novel Type of Rotavirus Species A in Sugar Gliders (Petaurus Breviceps). (2016)
  • 著者名/発表者名: Okadera, K., Abe, M., Ito, N., Mitake, H., Okada, K., Nakagawa, K., Une, Y., Tsunemitsu, H. and Sugiyama, M.
  • 雑誌名: J. Gen. Virol. 巻: 97 号: 5 ページ: 1158-1167
  • DOI: 10.1099/jgv.0.000433
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genome Sequences of Rotavirus A Strains Ty-1 and Ty-3, Isolated from Turkeys in Ireland in 1979. (2016)
  • 著者名/発表者名: Fujii, Y., Mitake, H., Yamada, D., Nagai, M., Okadera, K., Ito, N., Okada, K., Nakagawa, K., Mizutani, T. and Sugiyama, M.
  • 雑誌名: Genome Announc. 巻: 4 号: 1
  • DOI: 10.1128/genomea.01565-15
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Persistence of the rotavirus A genome in mesenteric lymph nodes of cattle raised on farms. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mitake, H., Ito, N., Okadera, K., Okada, K., Nakagawa, K., Tanaka, T., Katsuragi, K., Kasahara, K., Nihongi, T., Sakurai, S., Tsunemitsu, H. and Sugiyama, M.
  • 雑誌名: J. Gen. Virol. 巻: 96 号: 9 ページ: 2708-2713
  • DOI: 10.1099/vir.0.000191
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Detection of avian-like rotavirus A VP4 from a calf in Japan (2015)
  • 著者名/発表者名: Mitake, H., Ito, N., Okadera, K., Okada, K., Nakagawa, K., Tanaka, T., Katsuragi, K., Nihongi, T., Tsunemitsu, H., Sugiyama, M.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 77 号: 2 ページ: 221-224
  • DOI: 10.1292/jvms.14-0379
  • NAID: 130004693916
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] アライグマ（Procyon lotor） から検出された鳥類ロタウイルスＡの全遺伝子の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 鳶田好将、三竹博道、岡寺康太、長井誠、伊藤直人、大松勤、水谷哲也、杉山誠
  • 学会等名: 第159回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2016-09-06
• [学会発表] ウシにおけるロタウイルスの存続様式 (2015)
  • 著者名/発表者名: 三竹博道、岡寺康太、伊藤直人、岡田和真、中川賢人、田中知未、葛城粛仁、笠原香澄、二本木俊英、杉山 誠
  • 学会等名: 第１５８回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北里大学獣医学部（十和田）
  • 年月日: 2015-09-07
• [学会発表] 渡り鳥から検出された新型ロタウイルスAの遺伝学的解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 藤井祐至、岡寺康太、三竹博道、伊藤直人、岡田和真、中川賢人、岡崎克則、迫田義博、高田礼人、小澤真、正谷達謄、杉山誠
  • 学会等名: 第１５８回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北里大学獣医学部（十和田）
  • 年月日: 2015-09-07
• [学会発表] 鳥類由来ロタウイルスAの遺伝学的解析による分子基盤の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山田大悟、岡寺康太、三竹博道、伊藤直人、岡田和真、中川賢人、杉山 誠
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（札幌）
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12