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ペプチド・タンパクへの選択性に焦点を当てたフルオラス・分析化学の新機軸

研究課題

研究課題/領域番号 26410166
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 分析化学
研究機関福岡大学

研究代表者

能田 均  福岡大学, 薬学部, 教授 (20164668)

連携研究者 山口 政俊  福岡大学, 薬学部, 教授 (50117280)
巴山 忠  福岡大学, 薬学部, 准教授 (90549693)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2015年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
キーワードフルオラス化学 / 前処理 / ペプチド / タンパク質 / 誘導体化 / アミノ基 / リン酸基 / ペプチド分析 / タンパク質分析 / パーフルオロアルキル / LC/MS/MS / パーフルオラス化合物 / フルオラスカラム / 分析化学 / フルオラスケミストリー / 分離分析 / 液体クロマトグラフィー / 金属キレートアフィニティー / 溶媒・固相抽出
研究成果の概要

生体試料中の生理活性ペプチド及びタンパク質の高感度分析のための高選択的かつ高効率な抽出法として、「フルオラスケミストリー」に基づいた次の2種方法論を開発した。(1)ペプチド中の特定官能基をパーフルオロアルキル基で修飾し、その誘導体をフルオラス溶媒抽出することにより、LC/MS分析に最適な前処理が可能となった。(2)配位結合能を持ったフルオラス性試薬を用いてリン酸化ペプチド補足してフルオラス溶媒抽出することにより、非リン酸化ペプチドと完全分離が可能となった

報告書

(5件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実施状況報告書
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (41件)

すべて 2018 2017 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (15件) (うち国際共著 1件、 査読あり 12件、 オープンアクセス 8件) 学会発表 (26件) (うち国際学会 3件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Fluorous-assisted Metal Chelate Affinity Extraction for Nucleotides Followed by HILIC-MS Analysis2018

    • 著者名/発表者名
      Ena Kiyokawa, Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Journal of Chromatography B

      巻: 1074-1075 ページ: 86-90

    • DOI

      10.1016/j.jchromb.2017.12.036

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Assessment of Anticancer Drug Effects on Pancreatic Cancer Cells under Glucose-Depleted Conditions Using Intracellular and Extracellular Amino Acid Metabolomics2018

    • 著者名/発表者名
      Ryoko Tomita, Kenchiro Todoroki, Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Toshihiro Fujioka, Manabu Nakashima, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Biological & Pharmaceutical Bulletin

      巻: 41 号: 2 ページ: 220-228

    • DOI

      10.1248/bpb.b17-00746

    • NAID

      130006329269

    • ISSN
      0918-6158, 1347-5215
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Multi-Perfluoroalkyl Derivatization of Polyamines for Selective Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometric Analysis Utilizing Fluorous Affinity2017

    • 著者名/発表者名
      Tadashi Hayama, Erina Tamashima, Hideyuki Yoshida, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      CHROMATOGRAPHY

      巻: 38 号: 3 ページ: 107-113

    • DOI

      10.15583/jpchrom.2017.012

    • NAID

      130007040470

    • ISSN
      1342-8284, 1348-3315
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Fluorous-assisted metal chelate affinity extraction technique for analysis of protein kinase activity2016

    • 著者名/発表者名
      Tadashi Hayama, Ena Kiyokawa, Hideyuki Yoshida, Osamu Imakyure, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Talanta

      巻: 156/157 ページ: 1-5

    • DOI

      10.1016/j.talanta.2016.04.058

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Amino Acid Metabolomics Using LC-MS/MS: Assessment of Cancer-Cell Resistance in a Simulated Tumor Microenvironment2016

    • 著者名/発表者名
      Ryoko Tomita, Kenichiro Todoroki, Hiroshi Maruoka, Hideyuki Yoshida, Toshihiro Fujioka, Manabu Nakashima, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 32 号: 8 ページ: 893-900

    • DOI

      10.2116/analsci.32.893

    • NAID

      130005256428

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] エキサイプレックス蛍光現象を利用する多環芳香族炭化水素のHPLC分析2016

    • 著者名/発表者名
      轟木堅一郎,柳郷恵子,吉田秀幸,能田均,山口政俊
    • 雑誌名

      分析化学

      巻: 65 号: 12 ページ: 729-735

    • DOI

      10.2116/bunsekikagaku.65.729

    • NAID

      130005286334

    • ISSN
      0525-1931
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Direct Tandem Mass Spectrometric Analysis of Amino Acids in Plasma Using Fluorous Derivatization and Monolithic Solid-phase Purification2015

    • 著者名/発表者名
      Erina Tamashima, Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Osamu Imakyure, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

      巻: 115 ページ: 201-207

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2015.07.008

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Selective and sensitive liquid chromatographic determination method of 5-hydroxyindoles with fluorous and fluorogenic derivatization2015

    • 著者名/発表者名
      Yohei Sakaguchi, Jun Ikenaga, Hideyuki Yoshida, Tadashi Hayama, Miki Itoyama, Kenichiro Todoroki, Osamu Imakyure, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

      巻: 114 ページ: 348-354

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2015.06.003

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Selective Extraction of Nucleotides with Fluorous Biphasic System Utilizing Perfluoroalkylamine as an Ion-pair Reagent2015

    • 著者名/発表者名
      Tadashi Hayama, Ena Kiyokawa, Hideyuki Yoshida, Osamu Imakyure, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Chromatography

      巻: 36 (1) 号: 1 ページ: 13-18

    • DOI

      10.15583/jpchrom.2015.001

    • NAID

      130005069043

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] フルオラスの選択性を利用した細胞試料中ヌクレオチド類の金属キレートアフィニティー抽出2014

    • 著者名/発表者名
      巴山 忠,薬師寺寿世,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 雑誌名

      Chromatography

      巻: 35sup2 ページ: 21-21

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry with Fluorous Derivatization Method for Selective Analysis of Sialyl Oligosaccharides2014

    • 著者名/発表者名
      Yohei Sakaguchi, Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Miki Itoyama, Kenichiro Todoroki, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Rapid Communication in Mass Spectrometry

      巻: 28 (23) 号: 23 ページ: 2481-2489

    • DOI

      10.1002/rcm.7042

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Assessment of the Efficacy of Anticancer Drugs by Amino Acid Metabolomics Using Fluorescence Derivatization-HPLC2014

    • 著者名/発表者名
      Ryoko Tomita, Kenichiro Todoroki, Kazuyuki Machida, Sho Nishida, Hiroshi Maruoka, Hideyuki Yoshida, Toshihiro Fujioka, Manabu Nakashima, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 30 号: 7 ページ: 751-758

    • DOI

      10.2116/analsci.30.751

    • NAID

      130004442316

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Fluorous Affinity-based Separation Techniques for the Analysis of Biogenic and Related Molecules2014

    • 著者名/発表者名
      Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 雑誌名

      Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

      巻: 101 (1) ページ: 151-160

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2014.04.035

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] フルオラス-金属キレートアフィニティー試薬を用いたリン酸基含有化合物の選択的抽出法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      巴山 忠、井上裕也、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 雑誌名

      Chromatography

      巻: 35sup1 ページ: 107-108

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [雑誌論文] モノリス型フルオラス固相カラムを用いたパーフルオロアルキルアミノ酸の精製とLC-MS/MS分析2014

    • 著者名/発表者名
      玉嶋江莉奈、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 雑誌名

      Chromatography

      巻: 35sup1 ページ: 61-62

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] LC-MS/MS Analysis of Peptides in Brain with Fluorous Derivatization2018

    • 著者名/発表者名
      ○Ena Kiyokawa, Reiko Koga, Tadashi Hayama, Hideyuki Yoshida, Masatoshi Yamaguchi, Hitoshi Nohta
    • 学会等名
      The 45th International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 金属固定化フルオラス試薬を用いたリン脂質の選択的抽出法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈,巴山忠,川見祐介,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      日本薬学会第137年会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      2017-03-25
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 生理活性ペプチドのフルオラス誘導体化LC-MS/MS分析2017

    • 著者名/発表者名
      ○梶山彩乃,清川恵奈,巴山忠,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      第54回化学関連支部合同九州大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 三次元HPLCを用いる生体内シトルリン鏡像異性体の高選択的分析法開発2017

    • 著者名/発表者名
      ○古賀鈴依子,門田靖彦,西尾康弘,三田真史,清川恵奈,吉田秀幸,山口政俊,能田均,浜瀬健司
    • 学会等名
      第30回バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] オンライン-フルオラス誘導体化によるクルクミンの高感度LC-MS/MS分析2017

    • 著者名/発表者名
      ○清川恵奈,竹下阿紗子,巴山忠,古賀鈴依子,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      日本分析化学会第66年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] UPLC-UV分析によるアミノ酸メタボロミクス(2)2017

    • 著者名/発表者名
      ○冨田陵子,黒木由紀,轟木堅一郎,巴山忠,吉田秀幸,中島学,能田均,山口政俊,藤岡稔大
    • 学会等名
      日本分析化学会第66年会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] パーフルオロポリエーテルカルボン酸を用いたリン脂質のフルオラス金属キレートアフィニティー抽出2017

    • 著者名/発表者名
      ○清川恵奈,田坂友里恵,巴山忠,古賀鈴依子,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      第28回クロマトグラフィー科学会議
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 脳内ペプチド類の選択的LC-MS/MS分析法の開発とマウス脳組織への応用2016

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈,久保田桃子,巴山忠,川見祐介,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      33回日本薬学会九州支部大会
    • 発表場所
      鹿児島市
    • 年月日
      2016-12-03
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] nalysis of protein kinase activity with fluorous-assisted metal chelate affinity extraction of phosphopeptide followed by fluorescence detection2016

    • 著者名/発表者名
      KIYOKAWA Ena, HAYAMA Tadashi, YOSHIDA Hideyuki, IMAKYURE Osamu, YAMAGUCHI Masatoshi, NOHTA Hitosh
    • 学会等名
      International Symposium on Luminescence Spectrometry
    • 発表場所
      Taipei, Taiwan
    • 年月日
      2016-11-22
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Fluorous derivatization technique for selective analysis of biogenic-related compounds with HPLC-fluorescence detection2016

    • 著者名/発表者名
      HAYAMA Tadashi, YOSHIDA Hideyuki, SAKAGUCHI Yohei, IKENAGA Jun, TODOROKI Kenichiro, YAMAGUCHI Masatoshi, NOHTA Hitoshi
    • 学会等名
      International Symposium on Luminescence Spectrometry
    • 発表場所
      Taipei, Taiwan
    • 年月日
      2016-11-22
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] マルチフルオラス誘導体化による脳内ペプチド類の選択的LC-MS/MS分析2016

    • 著者名/発表者名
      久保田桃子,清川恵奈,巴山忠,川見祐介,吉田秀幸,山口政俊,能田均
    • 学会等名
      第34回九州分析化学若手の会夏季セミナー
    • 発表場所
      大分県日田市
    • 年月日
      2016-07-29
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] アポトーシス誘導Jurkat細胞中物ヌクレオチド類の選択的抽出とその定量的解析2016

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈、巴山 忠、相川晃慶、川見祐介、糸山美紀、小迫知弘、吉田秀幸、添田秦司、山口政俊、能田 均
    • 学会等名
      日本薬学会第136年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2016-03-29
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Ion-pair fluorous biphasic extraction及びHILICによるヌクレオチド類の選択的分析法開発2015

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第13回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム
    • 発表場所
      長崎(ホテル清風)
    • 年月日
      2015-08-20
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラス相互作用を利用したアミノ酸のタンデムマス分析と病態モデ ルマウス試料への適2015

    • 著者名/発表者名
      玉嶋江莉奈、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第13回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム
    • 発表場所
      長崎(ホテル清風)
    • 年月日
      2015-08-20
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラス-金属キレートアフィニティー抽出を利用したプロテインキナーゼ活性の蛍光測定2015

    • 著者名/発表者名
      長野元貴、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第33回九州分析化学若手の会 夏季セミナー
    • 発表場所
      天草(亀屋ホテル)
    • 年月日
      2015-07-24
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラスイオンペア抽出法によるヌクレオチド類の選択的分析と白血病由来細胞試料への適用2015

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第22回クロマトグラフィーシンポジウム
    • 発表場所
      近畿大学 東大阪キャンパス
    • 年月日
      2015-05-29
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] LC-MS/MSによるアミノ酸メタボロミクス ー低酸素・栄養飢餓状態で培養した大腸がん細胞DLD1についてー2015

    • 著者名/発表者名
      冨田陵子、西田 翔、巴山 忠、轟木堅一郎、吉田秀幸、丸岡 博、中島 学、能田 均、山口政俊、藤岡稔大
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-03-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラスの選択性を利用した細胞試料中ヌクレオチド類の金属キレートアフィニティー抽出2014

    • 著者名/発表者名
      巴山 忠,薬師寺寿世,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 学会等名
      第25回クロマトグラフィー科学会議
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2014-12-12
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 亜鉛固定化Krytoxを利用したテトラサイクリン系薬剤の選択的フルオラス二相系抽出2014

    • 著者名/発表者名
      古森貴子,清川恵奈,巴山 忠,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 学会等名
      第31回日本薬学会九州支部大会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2014-12-06
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 金属固定化フルオラス試薬を利用したテトラサイクリン系抗生物質の選択的抽出法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      清川恵奈,古森貴子,巴山 忠,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 学会等名
      第27回バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2014-08-20
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] ジルコニア-リン酸基間の特異的親和性を利用した分離指向性誘導体化法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      大塚恵未、川見祐介、糸山美紀、巴山 忠、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第32回九州分析化学若手の会 夏季セミナー
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      2014-07-25
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] マイケル付加反応を介したクルクミンのフルオラス誘導体化と選択的HPLC分析2014

    • 著者名/発表者名
      林英里奈、寺崎友理、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第32回九州分析化学若手の会 夏季セミナー
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      2014-07-24
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラス誘導体化LC-MS3によるバソプレシンの高感度かつ高選択的分析法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      竹下理紗、玉嶋江莉奈、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第32回九州分析化学若手の会 夏季セミナー
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      2014-07-24
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] イミノ二酢酸型フルオラス試薬を利用したリン酸基含有化合物の金属キレートアフィニティー/フルオラス二相系抽出2014

    • 著者名/発表者名
      薬師寺寿世、濱古賀好、巴山 忠、川見祐介、糸山美紀、吉田秀幸、能田 均、山口政俊
    • 学会等名
      第32回九州分析化学若手の会 夏季セミナー
    • 発表場所
      北九州
    • 年月日
      2014-07-24
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] フルオラス-金属キレートアフィニティー試薬を用いたリン酸基含有化合物の選択的抽出法の開発2014

    • 著者名/発表者名
      巴山 忠,井上裕也,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 学会等名
      第21回クロマトグラフィーシンポジウム
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      2014-06-05
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] モノリス型フルオラス固相カラムを用いたパーフルオロアルキル化アミノ酸の選択的抽出とLC-MS/MS分析2014

    • 著者名/発表者名
      玉嶋江莉奈,巴山 忠,川見祐介,糸山美紀,吉田秀幸,能田 均,山口政俊
    • 学会等名
      第21回クロマトグラフィーシンポジウム
    • 発表場所
      名古屋
    • 年月日
      2014-06-05
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2019-03-29  

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