水平伝播を利用した細胞間ダイレクトクローニング技術の開発

• 研究課題/領域番号: 26430197
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: システムゲノム科学
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 金子 真也 東京工業大学, 生命理工学院, 助教 (10399694)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: ダイレクトクローニング / 大腸菌 / 枯草菌 / 応用微生物 / 形質転換 / 核酸 / ゲノム / バイオテクノロジー

研究成果の概要

微生物間におけるDNAの水平伝播を模して、DNAを抽出・精製することなく、迅速かつ簡便に他の宿主に移行する「細胞間ダイレクトクローニング技術」の開発において、プラスミドDNAを保持する大腸菌をビルレントファージによって溶菌させ、溶菌液を直接用いて枯草菌を形質転換させる詳細な条件検討を行い、効率良くプラスミドDNAを大腸菌から枯草菌へ送り込む最適条件を確立することができた。連続的に用いることで枯草菌のゲノム中に外来のDNAを再構築させる実践的な活用法も開発した。さらに大腸菌→シアノバクテリアでも実施可能であり、汎用性の広い技術として今後広く活用されることが期待される。

研究成果

• [雑誌論文] 細胞外核酸を利用した簡便で迅速な形質転換系の確立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 雑誌名: 化学と生物 巻: 54 号: 9 ページ: 668-673
  • DOI: 10.1271/kagakutoseibutsu.54.668
  • NAID: 130005815154
  • ISSN: 0453-073X, 1883-6852
• [学会発表] ゲノム合成を意識した溶菌法(CELyTED)の活用 Application of CELyTED for Genome Project-Write(GP-Write) (2017)
  • 著者名/発表者名: 金子真也、中濱みさ子、板谷光泰
  • 学会等名: 日本農芸化学会2017年度(平成29年度)大会[京都] 一般講演(口頭発表) 3C20a05
  • 発表場所: 京都女子大学 (京都)
  • 年月日: 2017-03-19
• [学会発表] 水平伝播を利用した簡便で迅速な形質転換法の活用 Gene delivery system from Escherichia coli by designed horizontal transfer (2016)
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 学会等名: 日本農芸化学会2016年度(平成28年度)大会[札幌]
  • 発表場所: SORA 札幌コンベンションセンター (北海道)
  • 年月日: 2016-03-27