エンドソームにおけるユビキチンホメオスタシス制御

• 研究課題/領域番号: 26440070
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 静岡大学
• 研究代表者: 木村 洋子 静岡大学, 農学部, 教授 (80291152)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2016年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: ユビキチン / ホメオスタシス / エンドソーム / タンパク質分解 / 脱ユビキチン化酵素 / Rfu1 / Bro1 / 熱ストレス / Vドメイン / Alix / Ｒｉｍ２０ / 酵母 / V ドメイン

研究成果の概要

Rfu1はエンドソームに局在し、脱ユビキチン化酵素 Doa4を阻害して単量体ユビキチン量を制御する。Doa4をエンドソームにリクルートするBro1はRfu1もリクルートした。Bro1とRfu1は直接結合し、Bro1のVドメイン (V)とRfu1のYPELが必須だった。哺乳類Alix V とYP(X)nLの結合と同様にBro1 VとRfu1の結合にも保存されたPheが必要だった。Rfu1は熱ストレス時にRsp5が関与する経路で分解され、Bro1 V過剰発現は分解を抑えた。さらにRim20とRim101の結合も、Rim20 VとRim101中のYPIKLを介した結合であることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Conserved Mode of Interaction between Yeast Bro1 Family V Domains and YP(X)nL Motif-Containing Target Proteins (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoko Kimura, Mirai Tanigawa, Junko Kawawaki, Kenji Takagi, Tsunehiro Mizushima, Tatsuya Maeda, Keiji Tanaka
  • 雑誌名: Eukaryotic Cell 巻: 14 号: 10 ページ: 976-982
  • DOI: 10.1128/ec.00091-15
  • NAID: 120005671359
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] VCP/Cdc48 rescues the growth defect of a GPI10 mutant in yeast. (2015)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma Y, Takata T, Kawawaki J, Yasuda K, Tanaka K, Kimura Y, Kakizuka A.
  • 雑誌名: FEBS Lett. 巻: 589 号: 5 ページ: 576-80
  • DOI: 10.1016/j.febslet.2015.01.017
  • NAID: 120005531440
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The ESCRT-III adaptor protein Brol controls functions of regulator for free ubiauitin chains 1 (Rful) in ubiquitin homeostasis (2014)
  • 著者名/発表者名: Kimura Y, Kawawaki J, Kakiyama Y, Shimoda A, and Tanaka K
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 289 号: 31 ページ: 21760-21769
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.550871
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ubiquitin is phosphorylated by PINK1 to activate parkin. (2014)
  • 著者名/発表者名: Koyano, F., Okatsu, K., Kosako, H., Tamura, Y., Go, E., Kimura, M., Kimura, Y., Tsuchiya, H., Yoshihara, H., Hirokawa, T., Endo, T., Fon. E. A., Trempe, J. F., Saeki, Y., Tanaka, K., and Matsuda, N.
  • 雑誌名: Nature 巻: 510(in press) 号: 7503 ページ: 162-166
  • DOI: 10.1038/nature13392
  • 査読あり
• [学会発表] Analysis of interaction between yeast Bro1 family V domains and YP(X)nL motif-containing target proteins (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoko Kimura
  • 学会等名: 14th International Congress on Yeasts
  • 発表場所: Awaji Yumebudai, Awaji, Hyogo, Japan
  • 年月日: 2016-09-11
  • 国際学会
• [学会発表] Conserved Mode of Interaction between Yeast Bro1 Family V Domains and YP(X)nL Motif-Containing Target Proteins (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoko Kimura, Mirai Tanigawa, Junko Kawawaki, Kenji Takagi, Tsunehiro Mizushima, Tatsuya Maeda, Keiji Tanaka
  • 学会等名: BMB2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（神戸市中央区）
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] 酵母Bro1およびRim20のV ドメインの解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 木村 洋子、谷川美頼、川脇純子、高木賢治、水島恒裕、前田達哉・田中啓二
  • 学会等名: 酵母遺伝学フォーラム
  • 発表場所: 広島大学〈広島県東広島市）
  • 年月日: 2015-08-31
• [学会発表] エンドソーム関連タンパク質Bro1とユビキチンの量的制御因子Rfu1の相互作用の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: A1木村洋子.川脇純子.田中啓二
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] VCP/Cdc48過剰発現スクリーニングから得られたgpi10変異体の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 大沼洋平・木村洋子・川脇純子・田中啓二・垣塚彰
  • 学会等名: 酵母遺伝学フォーラム
  • 発表場所: 東京大学・東京
  • 年月日: 2014-09-01 – 2014-09-03
• [備考] 静岡大学 木村研究室
  • URL: http://kimurapqchs.agr.shizuoka.ac.jp/
• [備考] 静岡大学 木村研究室
  • URL: http://kimurapqchs.agr.shizuoka.ac.jp/wordpress/