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レクチンのタンパク質工学的改変による活性発現機構解明とその有用機能開発

研究課題

研究課題/領域番号 26450128
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 応用生物化学
研究機関長崎大学

研究代表者

畠山 智充  長崎大学, 工学研究科, 教授 (50228467)

研究分担者 海野 英昭  長崎大学, 工学研究科, 助教 (10452872)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2016年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワードレクチン / 蛋白質工学 / 糖鎖 / X線結晶構造解析 / 部位特異的変異 / X線結晶構造解析 / 部位特異的変異体
研究成果の概要

多彩な生理活性を発現するレクチンの生理活性発現機構を,タンパク質工学的な改変を行うことにより詳細に活性発現機構を解析するとともに,そこで得られた知見を基盤として新たな有用機能をもつ新規タンパク質の開発を行った。研究対象としては,主に海産無脊椎動物のレクチンを用い,特に数種類のレクチンに関しては,その遺伝子クローニングにより全配列を決定するとともに,X線結晶構造解析によって新規な立体構造の解明を行った。さらにそれらの組換えタンパク質を大腸菌を用いて発現させるとともに,遺伝子組み換え技術を用いて個々のアミノ酸の役割を解明し,新規な活性を有するレクチンの開発などに成功した。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (39件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件、 謝辞記載あり 4件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (31件)

  • [雑誌論文] Mechanism of Action of the Pore-Forming Lectins Mediated by Binding to Cell Surface Carbohydrate Chains2016

    • 著者名/発表者名
      Tomomitsu Hatakeyama, Shuichiro Goda, Hideaki Unno
    • 雑誌名

      Trends in Glycoscience and Glycotechnology

      巻: 28 号: 161 ページ: E55-E60

    • DOI

      10.4052/tigg.1427.1E

    • NAID

      130005153198

    • ISSN
      0915-7352, 1883-2113
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of amino acid mutations in the pore-forming domain of the hemolytic lectin CEL-III2016

    • 著者名/発表者名
      Tomonao Nagao, Risa Masaki, Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Tomomitsu Hatakeyama
    • 雑誌名

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      巻: 80 号: 10 ページ: 1966-1969

    • DOI

      10.1080/09168451.2016.1176520

    • NAID

      120006987658

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Identification, Characterization, and X-ray Crystallographic Analysis of a Novel Type of Mannose-Specific Lectin CGL1 from the Pacific Oyster Crassostrea gigas2016

    • 著者名/発表者名
      Unno H, Matsuyama K, Tsuji Y, Goda S, Hiemori K, Tateno H, Hirabayashi J, Hatakeyama T.
    • 雑誌名

      Sci Rep

      巻: 6 号: 1 ページ: 29135-29135

    • DOI

      10.1038/srep29135

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Mannose-recognition mutant of the galactose/N-acetylgalactosamine-specific C-type lectin CEL-I engineered by site-directed mutagenesis2015

    • 著者名/発表者名
      Moriuchi H, Unno H, Goda S, Tateno H, Hirabayashi J, Hatakeyama T
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta

      巻: 1850 号: 7 ページ: 1457-1465

    • DOI

      10.1016/j.bbagen.2015.04.004

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] cDNA cloning and expression of Contractin A, a phospholipase A2-like protein from the globiferous pedicellariae of the venomous sea urchin Toxopneustes pileolus2015

    • 著者名/発表者名
      Tomomitsu Hatakeyama, Erika Higashi, Hideyuki Nakagawa
    • 雑誌名

      Toxicon

      巻: 108 ページ: 46-52

    • DOI

      10.1016/j.toxicon.2015.09.040

    • NAID

      120006986879

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] cDNA cloning and characterization of a rhamnose-binding lectin SUL-I from the toxopneustid sea urchin Toxopneustes pileolus venom2015

    • 著者名/発表者名
      Tomomitsu Hatakeyama, Ayaka Ichise, Tomokazu Yonekura, Hideaki Unno , Shuichiro
    • 雑誌名

      Toxicon

      巻: 94 ページ: 8-15

    • DOI

      10.1016/j.toxicon.2014.11.236

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Hemolytic lectin CEL-III heptamerizes via a large structural transition from alpha-helices to a beta-barrel during the transmembrane pore-formation process2014

    • 著者名/発表者名
      Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Tomomitsu Hatakeyama
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry

      巻: 289 号: 18 ページ: 12805-12812

    • DOI

      10.1074/jbc.m113.541896

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Manno-oligosaccharide-binding ability of mouse RegIV/GST-fusion protein evaluated by complex formation with the carbohydrate-containing polyamidoamine dendrimer2014

    • 著者名/発表者名
      Yuta KATO, Kazunori KOCHI, Hideaki UNNO, Shuichiro GODA, and
    • 雑誌名

      Biosci. Biotechnol. Biochem.

      巻: 78 号: 11 ページ: 1906-1909

    • DOI

      10.1080/09168451.2014.940834

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 超好熱アーキアSulfolobus tokodaii由来アルコール脱水素酵素の熱活性化による構造変化2016

    • 著者名/発表者名
      郷田秀一郎,,梶山晃成,永野結花,内田拓郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      東北大学川内北キャンパス(仙台市)
    • 年月日
      2016-09-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ヘテロ二量体からなる新規二枚貝由来C型レクチンSPLの構造と糖結合特性2016

    • 著者名/発表者名
      板倉周平,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      東北大学川内北キャンパス(仙台市)
    • 年月日
      2016-09-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Ca2+非依存性C 型レクチンSPLの糖認識機構2016

    • 著者名/発表者名
      板倉周平,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      日本農芸化学会2016年度西日本支部大会
    • 発表場所
      長崎大学文教キャンパス(長崎市)
    • 年月日
      2016-09-15
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] イシワケイソギンチャク由来Ca2+依存性レクチンGJL-Iの構造と糖認識能2016

    • 著者名/発表者名
      中村梓,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      日本農芸化学会2016年度西日本支部大会
    • 発表場所
      長崎大学文教キャンパス(長崎市)
    • 年月日
      2016-09-15
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] イシワケイソギンチャク由来新規Ca2+依存性レクチンGJL-Iの立体構造と糖認識機構2016

    • 著者名/発表者名
      中村梓, 及川大翔,森 紳伍,舘野浩章,平林 淳,山口健一,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      平成28年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      鹿児島大学(鹿児島市)
    • 年月日
      2016-05-14
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ウチムラサキ由来C型レクチンSPLのcDNAクローニング及びX線結晶構造2016

    • 著者名/発表者名
      板倉周平,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      平成28年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      鹿児島大学(鹿児島市)
    • 年月日
      2016-05-14
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 溶血性レクチンCEL-III の細胞膜ポア形成ドメイン内におけるアミノ酸残基の機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      長尾 知直,真崎 理沙,郷田 秀一郎,海野 英昭,畠山 智充
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会,第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      ポートアイランド(神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] イシワケイソギンチャク由来Ca2+依存的ガラクトース特異性レクチンGJL-Iの糖結合特異性と立体構造2015

    • 著者名/発表者名
      中村 梓,及川 大翔,森 伸伍,郷田 秀一郎,海野 英昭,畠山 智充
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会,第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      ポートアイランド(神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ラッパウニの叉棘毒液由来ラムノース結合レクチンSUL-Iの立体構造解析2015

    • 著者名/発表者名
      川北 晃寛,市瀬 彩香,中川 秀幸,畠山 智充
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会,第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      ポートアイランド(神戸市)
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] イシワケイソギンチャク由来新規Ca2+依存性レクチンGJL-I の構造解析と糖認識機構の解明2015

    • 著者名/発表者名
      中村 梓,及川大翔,森 紳伍,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      日本農芸化学会2015年度中四国・西日本支部合同大会
    • 発表場所
      愛媛大学(松山市)
    • 年月日
      2015-09-17
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ウチムラサキ由来レクチンSPL のcDNA クローニング及び構造機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      板倉周平,細田耕平,須川穣二,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      日本農芸化学会2015年度中四国・西日本支部合同大会
    • 発表場所
      愛媛大学(松山市)
    • 年月日
      2015-09-17
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ポア形成レクチンCEL-III の溶血活性に関与するアミノ酸残基の機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      長尾知直,真崎理沙,郷田秀一郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      日本農芸化学会2015年度中四国・西日本支部合同大会
    • 発表場所
      愛媛大学(松山市)
    • 年月日
      2015-09-17
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ラッパウニ叉棘毒液由来レクチンSUL-Iの組換え体作製とX線結晶構造解析2015

    • 著者名/発表者名
      畠山智充,市瀬彩香,海野英昭,郷田秀一郎,酒井仁美, 中川秀幸
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] 多重変異導入による溶血性レクチンCEL-IIIの溶血活性の向上2015

    • 著者名/発表者名
      小川佳祐,米倉政実,畠山智充,上妻由章
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] マガキ由来レクチンCGL-1 の構造・機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      海野 英昭、郷田 秀一郎、畠山 智充
    • 学会等名
      第15回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      あわぎんホール(徳島市)
    • 年月日
      2015-06-24
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ガラクトース特異的Ca2+依存性レクチンGJL-IのcDNAクローニングとX線結晶構造解析2015

    • 著者名/発表者名
      中村 梓,及川 大翔,森 紳伍,海野英昭,郷田秀一郎,畠山智充
    • 学会等名
      平成27年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      九州大学(福岡市)
    • 年月日
      2015-05-16
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] マガキ由来レクチンCGL-1 の構造・機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      海野英昭,辻 慶輝,伊東利樹,郷田秀一郎,畠山智充
    • 学会等名
      平成27年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      九州大学(福岡市)
    • 年月日
      2015-05-16
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] ラッパウニ毒素タンパク質Contractin AのcDNAクローニングと大腸菌による発現2015

    • 著者名/発表者名
      畠山智充,東 絵梨花,海野英昭,郷田秀一郎,中川秀幸
    • 学会等名
      日本農芸化学会2015年度大会
    • 発表場所
      岡山大学津島キャンパス(岡山市)
    • 年月日
      2015-03-26 – 2015-03-29
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 溶血性レクチンCEL-IIIのオリゴマー構造解析と溶血活性に関与するアミノ酸残基の検索2014

    • 著者名/発表者名
      真崎 理沙, 長尾 知直, 郷田 秀一郎, 海野 英昭, 畠山 智充
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(横浜市)
    • 年月日
      2014-11-25 – 2014-11-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Alteration of the carbohydrate-binding specificity of the C-type lectin CEL-I by site-directed mutagenesis2014

    • 著者名/発表者名
      Hiromi Moriuchi, Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Tomomitsu Hatakeyama
    • 学会等名
      SFG & JSCR 2014 Joint Annual Meeting
    • 発表場所
      Hilton Hawaiian Village Waikiki Beach Resort (アメリカ合衆国)
    • 年月日
      2014-11-16 – 2014-11-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Expression and characterization of the recombinant lectin SUL-1 derived from the venom of the sea urchin Toxopneustes pileolus2014

    • 著者名/発表者名
      Ayaka Ichise, Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Hideyuki Nakagawa,Tomomitsu Hatakeyama
    • 学会等名
      SFG & JSCR 2014 Joint Annual Meeting
    • 発表場所
      Hilton Hawaiian Village Waikiki Beach Resort (アメリカ合衆国)
    • 年月日
      2014-11-16 – 2014-11-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] マガキ由来レクチンCGL-1の構造・機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      海野英昭,辻 慶輝,伊東利樹,郷田秀一郎,畠山智充
    • 学会等名
      第87回日本生化学会大会
    • 発表場所
      国立京都国際会館・グランドプリンスホテル京都(京都市)
    • 年月日
      2014-10-15 – 2014-10-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] ラッパウニ叉棘由来ガラクトース特異的レクチンSUL-1の遺伝子クローニングと機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      市瀬彩香,海野英昭,郷田秀一郎,中川秀幸,畠山智充
    • 学会等名
      第87回日本生化学会大会
    • 発表場所
      国立京都国際会館・グランドプリンスホテル京都(京都市)
    • 年月日
      2014-10-15 – 2014-10-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 超好熱アーキア由来アルコール脱水素酵素の活性化による構造変化2014

    • 著者名/発表者名
      郷田秀一郎, 永野結花,内田拓郎,海野英昭,畠山智充
    • 学会等名
      第87回日本生化学会大会
    • 発表場所
      国立京都国際会館・グランドプリンスホテル京都(京都市)
    • 年月日
      2014-10-15 – 2014-10-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] C型レクチンCEL-Iの部位特異的変異による糖結合特異性変換とその結晶構造2014

    • 著者名/発表者名
      森内 裕美,海野 英昭,郷田 秀一郎,畠山 智充
    • 学会等名
      2014年度日本農芸化学会西日本支部大会
    • 発表場所
      佐賀大学農学部(佐賀市)
    • 年月日
      2014-09-18 – 2014-09-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] ラッパウニ叉棘レクチンSUL-1の遺伝子クローニングと機能解析2014

    • 著者名/発表者名
      市瀬彩香,海野英昭,郷田秀一郎,中川秀幸,畠山智充
    • 学会等名
      2014年度日本農芸化学会西日本支部大会
    • 発表場所
      佐賀大学農学部(佐賀市)
    • 年月日
      2014-09-18 – 2014-09-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 溶血性レクチンCEL-IIIの膜孔形成機構2014

    • 著者名/発表者名
      海野 英昭, 郷田秀一郎, 畠山 智充
    • 学会等名
      第14回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      ワークピア横浜/横浜産貿ホール マリネリア(横浜市)
    • 年月日
      2014-06-25 – 2014-06-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Gal/GalNAc特異的C型レクチンCEL-Iの部位特異的変異によるMan特異性への変換2014

    • 著者名/発表者名
      森内 裕美,海野 英昭,郷田 秀一郎,舘野 浩章,平林 淳,畠山 智充
    • 学会等名
      第14回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      ワークピア横浜/横浜産貿ホール マリネリア(横浜市)
    • 年月日
      2014-06-25 – 2014-06-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 超好熱アーキア由来不活性型グルタミン酸脱水素酵素の生産機構の解明2014

    • 著者名/発表者名
      郷田 秀一郎,本多 克也,松川 貴博,海野 英昭,畠山 智充
    • 学会等名
      第14回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      ワークピア横浜/横浜産貿ホール マリネリア(横浜市)
    • 年月日
      2014-06-25 – 2014-06-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 溶血性レクチンCEL-IIIの膜孔形成機構2014

    • 著者名/発表者名
      海野 英昭, 郷田秀一郎, 畠山 智充
    • 学会等名
      平成26年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      九州大学薬学部(福岡市)
    • 年月日
      2014-05-17 – 2014-05-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Man特異的C型レクチン変異体EPNH-CEL-Iの糖認識機構2014

    • 著者名/発表者名
      森内裕美,海野英昭,郷田秀一郎,畠山智充
    • 学会等名
      平成26年度日本生化学会九州支部例会
    • 発表場所
      九州大学薬学部(福岡市)
    • 年月日
      2014-05-17 – 2014-05-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

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