合成生物学的手法による酵母及びヒトタンパク質分泌シグナル配列の厳密な定義と最適化

• 研究課題/領域番号: 26450505
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用分子細胞生物学
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 星田 尚司 山口大学, 創成科学研究科, 准教授 (00314823)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2014年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
• キーワード: 分泌シグナル / Kluyveromyces marxianus / 網羅的変異解析 / 人工配列 / ヒト培養細胞 / 分泌 / RFP / イヌリナーゼ / シグナル配列 / GLuc

研究成果の概要

タンパク質を細胞外に分泌させる分泌シグナル配列の網羅的変異解析を出発点とし，その情報を基にした人工配列を設計することで，耐熱性酵母及びヒト培養細胞における分泌シグナルの詳細な解析を行った。その結果，酵母及びヒト細胞でのタンパク質分泌生産に適したシグナル配列のN末側，C末側，疎水性領域の配列の特徴を明らかにした。特に，酵母では，疎水性領域にメチオニンを含む連続配列が分泌に適していることが分かった。

研究成果

• [雑誌論文] Synthetic signal sequences that enable efficient secretory protein production in the yeast Kluyveromyces marxianus. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tohru Yarimizu, Mikiko Nakamura, Hisashi Hoshida and Rinji Akada
  • 雑誌名: Microbial Cell Factories 巻: 14 号: 1 ページ: 20-20
  • DOI: 10.1186/s12934-015-0203-y
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] 酵母Kluyveromyces marxianusによるキシロース条件下でのタンパク質分泌生産 (2016)
  • 著者名/発表者名: 星田 尚司，木寺 研太，瀧下 竜太，藤岡 経久，深川 泰紀，赤田 倫治
  • 学会等名: 第68回日本生物工学会大会
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル富山（富山県富山市）
  • 年月日: 2016-09-30
• [学会発表] 酵母Kluyveromyces marxianusにおけるイヌリナーゼ分泌生産の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 深川泰紀，星田尚司，赤田倫治
  • 学会等名: 第33回 YEAST WORKSHOP
  • 発表場所: せとうち児島ホテル（岡山県倉敷市）
  • 年月日: 2015-11-13
• [学会発表] A synthetic model of secretion signal sequence in the yeast Kluyveromyces marxianus (2015)
  • 著者名/発表者名: Hisashi Hoshida, Tohru Yarimizu, Rinji Akada
  • 学会等名: 27th International conference on yeast genetics and molecular biology
  • 発表場所: Levico Terme, Italy
  • 年月日: 2015-09-11
  • 国際学会
• [学会発表] 酵母における人工的分泌シグナル配列の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 3.緒方梨衣，鎗水透，星田尚司，赤田倫治
  • 学会等名: 第32回YEAST WORKSHOP
  • 発表場所: 呉市，ビューポートくれ
  • 年月日: 2014-11-14 – 2014-11-15