液状検体の遊離DNAを用いた新しい遺伝子変異検出法の確立

• 研究課題/領域番号: 26460462
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 河原 明彦 久留米大学, 大学病院, 医療技術員 (00469347)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 分子病理学 / 遊離DNA / EGFR遺伝子変異 / 体腔液細胞診 / 病理学 / 分子病理学的検査 / 細胞診 / 上澄みDNA / 液状化細胞診 / 肺癌

研究成果の概要

気管支および体腔液細胞診検体中の上澄みに遊離しているDNAを用いてEGFR遺伝子変異の検出が可能か否かを調査した．培養細胞は時間依存的に細胞変性とCC3陽性細胞の増加，遊離DNA量が増加した．気管支細胞診51例の遊離DNAにおいて，EGFR遺伝子変異は22例の陽性症例に検出でき高感度を示したが，陰性症例は変異を検出できなかった．体腔液細胞診22例のEGFR遺伝子変異は陽性症例で高陽性率だったが，陰性症例は 変異を認めなかった．EGFR遺伝子変異の検出において，上澄み遊離DNAはDNAが十分に確保できない症例を補うことが可能であり，沈査と同様にEGFR遺伝子変異を検出するのに役立つことができる.

研究成果

• [雑誌論文] EGFR mutation status in cell-free DNA supernatant of bronchial washings and brushings. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawahara A, Fukumitsu C, Taira T, Abe H, Takase Y, Mutara K, Yamaguchi T, Azuma K, Ishii H, Takamori S, Akiba J, Hoshono T, Kage M.
  • 雑誌名: Cancer Cytopathology 巻: 123 号: 10 ページ: 620-628
  • DOI: 10.1002/cncy.21583
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fixation effect of SurePath preservative fluids using EGFR mutation-specific antibodies for immunocytochemistry. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawahara A, Taira T, Abe H, Watari K, Murakami Y, Fukumitsu C, Takase Y, Yamaguchi T, Akiba J, Azuma K, Ono M, Kage M
  • 雑誌名: Cancer Cytopathology 巻: 122 号: 2 ページ: 145-152
  • DOI: 10.1002/cncy.21355
  • 査読あり
• [雑誌論文] EML4-ALK-positive lung adenocarcinoma with signet-ring cells (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawahara A, Akiba J, Abe H, Yamaguchi T, Taira T, Azuma K, and Kage M
  • 雑誌名: Diagnostic cytopathology 巻: 42 号: 5 ページ: 460-463
  • DOI: 10.1002/dc.22936
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of immunohistochemistry using two different antibodies and procedures for primary lung adenocarcinoma harboring anaplastic lymphoma kinase rearrangement (2014)
  • 著者名/発表者名: Akiba J, Kawahara A, Abe H, Azuma K, Yamaguchi T, Taira T, Fukumitsu C, Takase Y, Yasumoto M, Umeno Y, Todoroki K, Kurita T, Yamaguchi R, Kage M, Yano H
  • 雑誌名: Oncol Letters 巻: 8 号: 5 ページ: 2155-2159
  • DOI: 10.3892/ol.2014.2511
  • 査読あり
• [雑誌論文] FGFR1 activation is an escape mechanism in human lung cancer cells resistant to afatinib, a pan-EGFR family kinase inhibitor (2014)
  • 著者名/発表者名: Azuma K, Kawahara A, Sonoda K, Nakashima K, Tashiro K, Watari K, Izumi H, Kage M, Kuwano M, Ono M, Hoshino T
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 5 ページ: 5908-5919
  • 査読あり
• [雑誌論文] Humoral immune responses to EGFR-derived peptides predict progression-free and overall survival of non-small cell lung cancer patients receiving gefitinib. (2014)
  • 著者名/発表者名: Azuma K, Komatsu N, Hattori S, Matsueda S, Kawahara A, Sasada T, Itoh K, Hoshino T.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 9 号: 1 ページ: e86667-e86667
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0086667
  • 査読あり
• [学会発表] Detection of EGFR mutation status in cell-free DNA supernatant of effusion cytology (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawahara Akihiko, Fukumitsu Chihiro, Taira Tomoki, Abe Hideyuki, Takase Yorihiko, Murata Kazuya, Yamaguchi Tomohiko, Naito Yoshiki, Akiba Jun
  • 学会等名: 40th European Congress of Cytology
  • 発表場所: イギリス リバプール
  • 年月日: 2016-10-02
  • 国際学会
• [学会発表] Epidermal growth factor receptor mutation status in cell-free DNA supernatant of bronchial cytology samples (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawahara Akihiko, Fukumitsu Chihiro, Taira Tomoki, Abe Hideyuki, Takase Yorihiko, Murata Kazuya, Yamaguchi Tomohiko, Akiba Jun, Kage Masayoshi
  • 学会等名: The 19th International Congress of Cytology (ICC2016)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-05-29
  • 国際学会
• [学会発表] Detection of activating EGFR mutation status using cytology cell free DNA in supernatant from liquid-based cytology of bronchial washing and bronchial brushing samples. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawahara Akihiko, Fukumitsu Chihiro, Taira Tomoki, Abe Hideyuki, Takase Yorihiko, Murata Kazuya, Yamaguchi Tomohiko, Tanikawa Ken and Masayoshi Kage.
  • 学会等名: 39th European Congress of Cytology.
  • 発表場所: Italy, Milan.
  • 年月日: 2015-09-20
  • 国際学会
• [学会発表] Fixation effect of SurePath preservative fluids using EGFR mutation-specific antibodies for immunocytochemistry (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawahara Akihiko, Taira Tomoki, Abe Hideyuki, Fukumitsu Chihiro, Takase Yorihiko, Yamaguchi Tomohiko, Akiba Jun, Masayoshi Kage
  • 学会等名: 38th European Congress of Cytology
  • 発表場所: Switzerland, Geneva
  • 年月日: 2014-09-27 – 2014-09-30
• [学会発表] LBCの導入効果と分子病理診断への可能性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 河原明彦
  • 学会等名: 第28回関東臨床細胞学会
  • 発表場所: 静岡県沼津市
  • 年月日: 2014-09-13
  • 招待講演
• [学会発表] EGFR遺伝子変異特異的抗体を用いたSurePath細胞保存液の固定効果 (2014)
  • 著者名/発表者名: 河原明彦，多比良朋希，安倍秀幸，山口知彦，吉田友子，髙瀨頼妃呼，福満千容，谷川 健，秋葉 純，鹿毛政義
  • 学会等名: 第55回日本臨床細胞学会総会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2014-06-05 – 2014-06-07