難聴モデルマウス前庭の形態・機能評価と前庭を標的とした遺伝子導入の検討

• 研究課題/領域番号: 26462567
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 耳鼻咽喉科学
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 岡田 弘子 順天堂大学, 医学部, 助教 (20433774)
• 研究分担者: 神谷 和作 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10374159) ; 飯塚 崇 順天堂大学, 医学部, 非常勤助教 (40372932)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2016年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 遺伝性難聴 / GJB2 / コネキシン26 / 前庭 / トランスジェニックマウス / 遺伝子治療 / アデノ随伴ウィルス / 前庭機能 / Gjb2

研究成果の概要

先天性高度難聴児は幼少児期に末梢平衡機能にも障害を伴う頻度が極めて高いことが知られている。本研究では難聴モデルマウス前庭、特に世界で最も高頻度に発生するGJB2変異難聴の遺伝子改変モデルマウスの形態・機能評価と前庭を標的とした遺伝子治療の効率的な投与法の検討を行った。標的とするCX26変異難聴モデルの前庭組織の形態学的解析を行い、これらの難聴モデルに対し、正円窓経由・半規管経由の注入法で、GFPを発現するアデノ随伴ウイルスベクターを投与した。その結果、新たに行った半規管経由のウィルス液還流法により正円窓経由と同等またはそれ以上の前庭細胞への遺伝子導入効率が確認された。

研究成果

• [雑誌論文] Surgical Management of Myringosclerosis over an Entire Perforated Tympanic Membrane by Simple Underlay Myringoplasty. (2016)
  • 著者名/発表者名: Furukawa M, Hayashi C, Narabayashi O, Kasai M, Okada H, Haruyama T, Minekawa A, Iizuka T, Ikeda K.
  • 雑誌名: Int J Otolaryngol. 巻: 2016 ページ: 2894932-2894932
  • DOI: 10.1155/2016/2894932
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Postnatal Development and Maturation of the Vestibular Organ in Dominant-Negative Connexin 26 Transgenic Mouse. (2015)
  • 著者名/発表者名: Hiroko Okada, Kazusaku Kamiya., Takashi Iizuka and Katsuhisa Ikeda.
  • 雑誌名: J Otol Rhinol 巻: S1 ページ: 37-40
  • DOI: 10.4172/2324-8785.s1-009
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26 Deficient Mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Anzai, T., Fukunaga, I., Hatakeyama, K., Fujimoto, A., Kobayashi, K., Nishikawa, A., Aoki, T., Noda, T., Minowa, O., Ikeda, K., and Kamiya, K
  • 雑誌名: PloS one 巻: 10 号: 10 ページ: e0141258-e0141258
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0141258
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Differentiation of iPS Cells to Cochlear Cells are Regulated Depending on the Part of Co-cultured Organs. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Keiko Karasawa, Kazuma Kobayashi, Asuka Miwa and Katsuhisa Ikeda.
  • 雑誌名: J Otol Rhinol 巻: S1 ページ: 34-36
  • DOI: 10.4172/2324-8785.s1-008
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Perinatal Gjb2 gene transfer rescues hearing in a mouse model of hereditary deafness. (2015)
  • 著者名/発表者名: Izuka T., Kamiya K., Gotoh S., Sugitani Y., Suzuki M., Noda T., Minowa O., Ikeda K.
  • 雑誌名: Hum. Mol.Genet. 巻: 24)13) 号: 13 ページ: 3651-3661
  • DOI: 10.1093/hmg/ddv109
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Connexin26 regulates assembly and maintenance of cochlear gap junction macromolecular complex for normal hearing (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama and Katsuhisa Ikeda
  • 雑誌名: AIP Conference Proceedings 巻: 1703 ページ: 030018-030018
  • DOI: 10.1063/1.4939333
  • 謝辞記載あり
• [学会発表] GJB2変異遺伝性難聴に対する細胞治療・遺伝子治療法の開発 (2016)
  • 著者名/発表者名: 神谷 和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] iPS細胞からのConnexin26発現細胞への分化誘導と細胞間ギャップ結合プラークの構築 (2016)
  • 著者名/発表者名: 福永一朗、畠山佳欧里、 青木徹、藤本あゆみ、 西川貴菜、美野輪治、 池田 勝久、神谷和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] コネキシン26欠損マウスからのiPS細胞の樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 青木徹、福永一朗、 畠山佳欧里、藤本あゆみ、西川貴菜、美野輪治、 池田勝久、神谷和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] 内耳フィーダー細胞を用いたiPS細胞の分化誘導によるCx26ギャップ結合形成細胞の樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 藤本あゆみ、福永一朗、 畠山佳欧里、青木徹、 西川貴菜、池田勝久、 神谷 和作
  • 学会等名: 第15回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2016-03-17
• [学会発表] Restoration og Cochlear Gap Junction for GJB2 (2016)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaｇa
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26-Deficient Mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Generation of induced pluripoten stem cells form connexin26 conditional knock out mouce (2016)
  • 著者名/発表者名: Toru Aoki, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque (2016)
  • 著者名/発表者名: Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Atena Nishikawa, Ayumi Fujimoto, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Induction of iPS cell differentiation into Connexin26 positive cells with gap junction plaques using cochlear feeder cell (2016)
  • 著者名/発表者名: Ayumi Fujimoto, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Atena Nishikawa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Various cochlear gap junction plaque reproduced in human cell line (2016)
  • 著者名/発表者名: Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
  • 発表場所: Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2016-02-20
  • 国際学会
• [学会発表] Cochlear gap junction plaque, stabilized macromolecular complex composed of specific connexins (2015)
  • 著者名/発表者名: Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Ayumi Fujimoto, Atena Nishikawa ,Takashi Anzai, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Caveolins accumulates at the organ of Corti in GJB2 associated deafness (2015)
  • 著者名/発表者名: Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Reproduction of various types of cochlear gap junction plaques in human cell line (2015)
  • 著者名/発表者名: Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会
• [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque (2015)
  • 著者名/発表者名: Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Atena Nishikawa, Ayumi Fujimoto, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
  • 学会等名: 52nd Inner Ear Biology Workshop
  • 発表場所: Campus of the Catholic University of Rome, Italy
  • 年月日: 2015-09-12
  • 国際学会