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脱細胞化肺移植による先天性横隔膜ヘルニアの低形成肺に対する再生医療

研究課題

研究課題/領域番号 26462709
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 小児外科学
研究機関九州大学

研究代表者

永田 公二  九州大学, 大学病院, 助教 (20419568)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 中途終了 (2015年度)
配分額 *注記
5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2016年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワード肺発達 / 脱細胞化 / 間葉系幹細胞 / 肺移植 / 再生医療
研究実績の概要

本年度も引き続き、ニトロフェン誘導CDHモデルラット肺を利用して、肺組織の脱細胞化及び脱細胞化組織への間葉系幹細胞、新生肺の肺移植培養実験を企画した。本実験の工程は3工程に分かれる。即ち、1)肺の脱細胞化、2)脱細胞化肺への間葉系幹細胞投与、3)肺移植である。
1)肺の脱細胞化:妊娠22日目の母獣を犠死せしめる際に母獣の内頸静脈と総頸動脈にカニュレーションし、内頸静脈より還流液である0.1%SDS溶液を2時間還流した後に胎仔肺を摘出した。その後、Western-blottingによって肺サーファクタントなどの肺に特異的分子のDNA数が減少している事を確認した。
2)間葉系幹細胞投与:間葉系幹細胞はプロトコールに従って抽出されたものを使用した。即ち、eGFP成獣肺から摘出した肺をPBSで洗浄して血液をウォッシュアウトした後に気管と結合組織を除去し、肺組織を潰し、0.4%のⅠ型コラーゲンと0.3%のディスパーゼⅡを37℃で1時間培養し、70μlのcell strainerに搭載して抽出した。細胞は24時間培養後にディッシュに接着する細胞のみを20% FBSに投与して培養した。細胞がディッシュ内に充満した後にpassageを確認した。得られた細胞は、間葉系細胞の特徴である紡錘形を有し、ディッシュに接着すること、免疫染色で多分化能を有すること、フローサイトメトリーでCD29陽性、CD45陰性である事を確認した。脱細胞肺への間葉系幹細胞の投与を試みたものの、脱細胞化肺自体の長期間培養は困難であり、間葉系幹細胞投与は困難であった。
3)肺移植:当初、予定であった肺移植実験は、脱細胞化肺の長期培養が困難であった事から移植自体が不可能であり、困難であった。

報告書

(2件)
  • 2015 実績報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (9件) (うち国際共著 4件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (16件) (うち国際学会 3件、 招待講演 2件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Growth Assessment and the Risk of Growth Retardation in Congenital Diaphragmatic Hernia: A Long-Term Follow-Up Study from the Japanese Congenital Diaphragmatic Hernia Study Grou2016

    • 著者名/発表者名
      Terui K, Nagata K, Hayakawa M, Okuyama H, Goishi K, Yokoi A, Tazuke Y, Takayasu H, Yoshida H, Usui N.
    • 雑誌名

      Eur J Pediatric Surg.

      巻: 26 号: 01 ページ: 60-6

    • DOI

      10.1055/s-0035-1566094

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] 新生児編 疾患:いかに的確に対応するか 先天性横隔膜ヘルニア 特集 周産期救急の初期対応:そのポイントとピットフォール 胎児・新生児編.2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二、和田桃子、岩中 剛、江角元史郎、木下義晶、田口智章.
    • 雑誌名

      周産期医学

      巻: 45 ページ: 928-932

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Hirschsprung病類縁疾患成人例の実際2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二、小幡聡、吉丸耕一朗、神保教広、宮田潤子、家入里志、田口智章
    • 雑誌名

      小児外科

      巻: 45 ページ: 693-699

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Reevaluation of acetylcholinesterase staining for the diagnosis of hirschsprung disease and allied disorders.2015

    • 著者名/発表者名
      Budianto IR, Obata S, Kinoshita Y, Yoshimaru K, Yanagi Y, Miyata J, Nagata K, Ieiri S, Taguchi T
    • 雑誌名

      J Pediatr Gastroenterol Nutr

      巻: 60 号: 5 ページ: 606-12

    • DOI

      10.1097/mpg.0000000000000664

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書 2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Extracorporeal membrane oxygenation for congenital diaphragmatic hernia in Japan.2015

    • 著者名/発表者名
      Inamura N, Usui N, Okuyama H, Nagata K, Kanamori Y, Fujino Y, Takahashi S, Hayakawa M, Taguchi T
    • 雑誌名

      Pediatr Int

      巻: 57(4) 号: 4 ページ: 682-6

    • DOI

      10.1111/ped.12554

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Surgical approaches for neonatal congenital diaphragmatic hernia: a systematic review and meta-analysis.2015

    • 著者名/発表者名
      Terui K, Nagata K, Ito M, Yamoto M, Shiraishi M, Taguchi T, Hayakawa M, Okuyama H, Yoshida H, Masumoto K, Kanamori Y, Goishi K, Urushihara N, Kawataki M, Inamura N, Kimura O, Okazaki T, Toyoshima K, Usui N.
    • 雑誌名

      Pediatr Surg Int

      巻: 31(10) 号: 10 ページ: 891-7

    • DOI

      10.1007/s00383-015-3765-1

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Current clinical features in diagnosis and treatment for immaturity of ganglia in Japan: analysis from 10-year nationwide survey.2015

    • 著者名/発表者名
      Ieiri S, Miyoshi K, Nagata K, Miyata J, Kohashi K, Oda Y, Taguchi T.
    • 雑誌名

      Pediatr Surg Int

      巻: 31(10) 号: 10 ページ: 949-54

    • DOI

      10.1007/s00383-015-3774-0

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Risk factors for the recurrence of the congenital diaphragmatic hernia-report from the long-term follow-up study of Japanese CDH study group.2015

    • 著者名/発表者名
      Nagata K, Usui N, Terui K, Takayasu H, Goishi K, Hayakawa M, Tazuke Y, Yokoi A, Okuyama H, Taguchi T.
    • 雑誌名

      Eur J Pediatr Surg

      巻: 25 号: 01 ページ: 9-14

    • DOI

      10.1055/s-0034-1395486

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Therapeutic potential of mesenchymal stem cell transplantation in a nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia rat model.2014

    • 著者名/発表者名
      Yuniartha R, Alatas FS, Nagata K, Kuda M, Yanagi Y, Esumi G, Yamaza T, Kinoshita Y, Taguchi T.
    • 雑誌名

      Pediatr Surg Int

      巻: 30(9) 号: 9 ページ: 907-914

    • DOI

      10.1007/s00383-014-3576-9

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 在宅静脈栄養中の小児短腸症患者におけるmodified cyclic HPNの有用 性に関する検討2016

    • 著者名/発表者名
      永田公二,岩中剛,神保教広,江角元史郎,山下さきの,田口智章
    • 学会等名
      第31回日本静脈経腸栄養学会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2016-02-25
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 胎児鏡下バルーン気管閉塞術後先天性横隔膜ヘルニアの1剖検例2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,岩中剛,三好きな,江角元史郎,木下義晶,田口智章
    • 学会等名
      第13回日本胎児治療学会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2015-11-21
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Congenital Diaphragmatic Hernia ; How to treat with the limited sources-2015

    • 著者名/発表者名
      Nagata K,Iwanaka T,Miyoshi K,Esumi G,Kinoshita Y,Taguchi T.
    • 学会等名
      Annual Meeting of the 23rd Indonesian Pediatric Surgeon
    • 発表場所
      Palembang, Indonesia
    • 年月日
      2015-11-07
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] 在宅静脈栄養管理における栄養評価の重要性2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,江角元史郎,岩中剛,木下義晶,田口智章
    • 学会等名
      第51回日本小児外科代謝栄養研究会
    • 発表場所
      熊本
    • 年月日
      2015-10-29
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 軟性気管支鏡ガイド下挿管が有用であった先天性横隔膜ヘルニアの2例2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,江角元史郎,岩中剛,木下義晶,田口智章
    • 学会等名
      第24回日本小児呼吸器学会
    • 発表場所
      倉敷
    • 年月日
      2015-10-23
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] The timing of surgery and the endoscopic surgery for CDH neonates: update by means of a systematic review and a meta-analysis2015

    • 著者名/発表者名
      Nagata K, Usui N, Terui K, Itou M, Yamoto M, Shiraishi M, Toyoshima K, Taguchi T
    • 学会等名
      CDH Workshop 2015
    • 発表場所
      Tronto, Canada
    • 年月日
      2015-09-15
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 胸腔鏡下横隔膜ヘルニア根治術を施行した先天性横隔膜ヘルニアの1例2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,和田桃子,福原雅弘,栗山直剛,家入里志,田口智章
    • 学会等名
      第25回九州内視鏡下外科研究会
    • 発表場所
      熊本
    • 年月日
      2015-08-29
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] The current status and the future perspectives of the Japanese CDH Study Group2015

    • 著者名/発表者名
      Nagata K
    • 学会等名
      第51回日本周産期新生児学会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2015-07-10
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Laparoscopic vascular hitch operationを行った腎盂尿管移行部通過障害を合併した馬蹄腎の1例2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,栗山直剛,福原雅弘,家入里志,田口智章
    • 学会等名
      第24回日本小児泌尿器学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2015-07-02
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 極低出生体重児の腸瘻閉鎖時期に関する検討2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二,江角元史郎,宗崎良太,宮田潤子,松浦俊治,木下義晶,田口智章
    • 学会等名
      第29回日本小児ストーマ排泄管理研究会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2015-06-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] The outcome comparison between the early operation vs the delayed operation in congenital diaphragmatic hernia-a systematic review, meta-analysis of English and Japanese literature -2015

    • 著者名/発表者名
      Nagata K,Usui N,Terui K,Itou M,Yamoto M,Shiraishi M,Toyoshima K,Taguchi T
    • 学会等名
      16th European Congress of Pediatric Surgery
    • 発表場所
      Ljubljana, Slovenia
    • 年月日
      2015-06-17
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 先天性横隔膜ヘルニアの手術時期に関するsystematic reviewとメタ解析2015

    • 著者名/発表者名
      永田公二、照井慶太、伊藤美春、白石真之、矢本真也、 早川昌弘、奥山宏臣、稲村 昇、金森 豊、五石圭司、 田附裕子、横井暁子、川瀧元良 、漆原直人、岡崎任晴、 木村 修、増本幸二、豊島勝昭、臼井規朗、田口智章
    • 学会等名
      第52回日本小児外科学会
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-05-30
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 周産期医療現場における小児外科医の倫理的諸問題2014

    • 著者名/発表者名
      永田公二,和田桃子,江角元史郎,木下義晶,田口智章
    • 学会等名
      第30回日本小児外科学会周期シンポジウム
    • 発表場所
      淡路島
    • 年月日
      2014-11-01
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 胸腔羊水腔シャントを施行された複数肺葉におよぶ先天性嚢胞性腺腫様奇形(CCAM/CPAM)に対して中葉+下葉区域切除を施行した1例2014

    • 著者名/発表者名
      永田公二,和田桃子,岩中剛,江角元史郎,田口智章
    • 学会等名
      第25回小児呼吸器外科研究会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2014-10-24
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 多施設共同研究における新生児横隔膜ヘルニアの長期予後に関する検討2014

    • 著者名/発表者名
      永田公二
    • 学会等名
      第50回日本周産期新生児医学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2014-07-15
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Risk factors for the recurrence of the congenital diaphragmatic hernia– report from the long-term follow-up study of Japanese CDH Study Group –2014

    • 著者名/発表者名
      Nagata Kouji, Usui Noriaki, Terui Keita, et al.
    • 学会等名
      EUPSA2014
    • 発表場所
      Ireland, Dubrin
    • 年月日
      2014-06-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [図書] 新生児先天性横隔膜ヘルニア(CDH)診療ガイドライン2016

    • 著者名/発表者名
      新生児先天性横隔膜ヘルニア研究グループ
    • 総ページ数
      116
    • 出版者
      メジカルビュー社
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2017-01-06  

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