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人工ヌクレアーゼを用いた歯根膜細胞の細胞外マトリックス分泌機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 26462822
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関北海道医療大学

研究代表者

田隈 泰信  北海道医療大学, 歯学部, 名誉教授 (40095336)

研究分担者 岡山 三紀  北海道医療大学, 歯学部, 助教 (30382500)
荒川 俊哉  北海道医療大学, 歯学部, 准教授 (40306254)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2016年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2014年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワードゲノム編集 / SNARE / 構成的分泌 / CRISPR/Cas9 / SNAP23 / 歯根膜細胞 / HAP1細胞 / TALEN / 遺伝子ノックアウト / 人工ヌクレアーゼ / 遺伝子ノックアウト細胞 / HeLa細胞 / ハプロイド細胞
研究成果の概要

人工ヌクレアーゼを用いたゲノム編集は、最新の遺伝子改変技術である。本研究では、第2世代のゲノム編集技術TALENと第3世代のCRISPR/Cas9を用い、歯根膜細胞の細胞外マトリックス分泌など、構成的な分泌機構の解明を目的とした。その前段階として、染色体を1セット(n)しかもたないHAP1細胞をモデル細胞として用い、構成的な分泌で重要な役割を果たすと予想されるSNAREファミリーの一員、SNAP23を選び、CRISPR/Cas9法で遺伝子KOを行った。その結果、SNAP23 KO細胞の増殖と構成的分泌に大きな異常が認められず、SNAP23はこれらの細胞過程に必須ではないことが明らかとなった。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2016 2015

すべて 学会発表 (6件)

  • [学会発表] SNAREタンパク質ノックアウトHAP1細胞の遺伝子発現比較解析.2016

    • 著者名/発表者名
      荒川俊哉,岡山三紀,溝口到,田隈泰信
    • 学会等名
      第89回日本生化学会大会
    • 発表場所
      仙台国際センター
    • 年月日
      2016-09-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] SNAREノックアウトHAP1細胞における遺伝子発現解析-SNAP23, Syntaxin4, Syntaxin2ノックアウトでの遺伝子発現比較.2016

    • 著者名/発表者名
      荒川俊哉,岡山三紀,溝口到,田隈泰信
    • 学会等名
      第58回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2016-08-24
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] CRISPR/Cas9法でSNAP23をKOした細胞の機構解析2015

    • 著者名/発表者名
      田隈泰信、荒川俊哉、岡山三紀、溝口到
    • 学会等名
      第60回日本唾液腺学会学術集会
    • 発表場所
      文京学院大学本郷キャンパス
    • 年月日
      2015-12-05
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] SNAP23およびSyntaxin4ノックアウトHAP1細胞における遺伝子発現と細胞機能の解析2015

    • 著者名/発表者名
      荒川俊哉、岡山三紀、溝口到、田隈泰信
    • 学会等名
      第88回日本生化学会大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] SNAP23ノックアウトHAP1細胞の機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      荒川俊哉、岡山三紀、溝口到、田隈泰信
    • 学会等名
      第57回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      新潟コンベンションセンター
    • 年月日
      2015-09-11
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Is SNAP23 essential for constitutive exocytosis?2015

    • 著者名/発表者名
      Takuma T, Arakawa T, Okayama M, Mizoguchi I
    • 学会等名
      IADR (International Association for Dental Research)
    • 発表場所
      アメリカ合衆国マサチューセッツ州ボストン、コンベンションセンター
    • 年月日
      2015-03-11 – 2015-03-14
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

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