• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

ビデオレート生物発光イメージング法による骨形成関連タンパク質の分泌動態解析

研究課題

研究課題/領域番号 26462828
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関愛知学院大学

研究代表者

鈴木 崇弘  愛知学院大学, 歯学部, 准教授 (70298545)

研究分担者 水野 光政  愛知学院大学, 歯学部, 助教 (20609812)
連携研究者 井上 敏  JNC(株), 横浜研究所, 企画研究員 (40426622)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワードイメージング / 生物発光 / 開口分泌 / 遺伝子発現 / 3D培養 / 細胞接着 / タンパク質分泌 / ルシフェラーゼ / 骨芽細胞 / 骨形成因子 / エキソサイトーシス / 分泌 / 骨形成
研究成果の概要

骨芽細胞を含めた哺乳類細胞におけるルシフェラーゼの発現において、ヒトで使用頻度の高いコドンのみをシンプルに選択する「Preferred法」でコドン最適化を行った遺伝子が有用であることを示した。また、Preferred法でコドン最適化した遺伝子(nanoKAZ)を用いてオプロフォーラスルシフェラーゼ変異体を発現させ、生物発光イメージング法で可視化した。さらに、ガウシアルシフェラーゼをレポーターとする「ビデオレート生物発光イメージング法」を、3D培養細胞からのタンパク質分泌を可視化する方法として確立した。最終的に、骨芽細胞株におけるタンパク質の極性分泌を可視化することに成功した。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2017 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 謝辞記載あり 5件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] Visualization of glucagon secretion from pancreatic α cells by bioluminescence video microscopy: identification of secretion sites in the intercellular contact regions2017

    • 著者名/発表者名
      Yokawa, S., Suzuki, T., Inouye, S., Inoh, Y., Suzuki, R., Kanamori, T., Furuno, T., Hirashima, N.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun.

      巻: 485 号: 4 ページ: 725-730

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2017.02.114

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Quantitative visualization of synchronized insulin secretion from 3D-cultured cells.2017

    • 著者名/発表者名
      Suzuki T, Kanamori T, Inouye S.
    • 雑誌名

      Biochem. Biophys. Res. Commun.

      巻: 486 号: 4 ページ: 886-892

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2017.03.105

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Protein expression of preferred human codon-optimized Gaussia luciferase genes with an artificial open-reading frame in mammalian and bacterial cells.2016

    • 著者名/発表者名
      Inouye S, Suzuki T
    • 雑誌名

      Protein Expr. Purif.

      巻: 128 ページ: 93-100

    • DOI

      10.1016/j.pep.2016.08.006

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Codon optimization of genes for efficient protein expression in mammalian cells by selection of only preferred human codons.2015

    • 著者名/発表者名
      Inouye S, Sahara-Miura Y, Sato J, Suzuki T.
    • 雑誌名

      Protein Expr Purif.

      巻: 109 ページ: 47-54

    • DOI

      10.1016/j.pep.2015.02.002

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Unconventional secretion of the mutated 19 kDa protein of Oplophorus luciferase (nanoKAZ) in mammalian cells.2014

    • 著者名/発表者名
      Inouye S, Sato J-I, Sahara-Miura Y, Hosoya T, Suzuki T
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun.

      巻: 450 号: 4 ページ: 1313-1319

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2014.06.140

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 細胞接着を介した膵島α細胞のグルカゴン分泌調節機構の解明2016

    • 著者名/発表者名
      横川慧, 鈴木崇弘, 井上敏, 伊納義和, 鈴木亮, 古野忠秀, 平嶋尚英
    • 学会等名
      第38回生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
    • 発表場所
      名古屋市立大学薬学部(愛知県名古屋市)
    • 年月日
      2016-11-18
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 生物発光イメージング法を用いた膵島α細胞からのグルカゴン分泌の可視化解析2016

    • 著者名/発表者名
      横川慧, 鈴木崇弘, 井上敏, 伊納義和, 鈴木亮, 古野忠秀, 平嶋尚英
    • 学会等名
      第25回日本バイオイメージング学会学術集会
    • 発表場所
      名古屋市立大学薬学部(愛知県名古屋市)
    • 年月日
      2016-09-05
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 膵β細胞塊における同調性インスリン分泌の可視化2016

    • 著者名/発表者名
      鈴木崇弘, 井上敏
    • 学会等名
      第15回生命科学研究会
    • 発表場所
      メルパルク東京(東京都港区)
    • 年月日
      2016-06-25
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 哺乳類細胞における効率的なルシフェラーゼ遺伝子発現のためのコドン最適化と生物発光イメージング: 歯学研究への応用2015

    • 著者名/発表者名
      鈴木崇弘, 江頭美喜, 河合逹志, 金森孝雄, 井上敏
    • 学会等名
      第57回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ( 新潟県新潟市 )
    • 年月日
      2015-09-11
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書

URL: 

公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi