骨膜細胞の３次元構造のためのタンパク質間ネットワーク

• 研究課題/領域番号: 26462986
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 歯科医用工学・再生歯学
• 研究機関: 大阪歯科大学
• 研究代表者: 秋山 真理 大阪歯科大学, 歯学部, 助教 (60340618)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2016年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 骨膜由来細胞 / 骨再生 / タンパク質相互作用 / 質量分析 / ２重免疫染色 / 二重免疫染色 / FBXW２ / 骨膜組織 / 骨膜細胞

研究成果の概要

今までに培養上清中に含まれるタンパク質を質量分析し、免疫染色（単染色）との組み合わせによりウシ骨膜由来細胞に発現しているタンパク質のグループを明らかにしてきたが、本研究課題ではタンパク質の相互作用を調べた。２重免疫染色によってタイプ１プロコラーゲン（青）とTMX2（赤）は発現部位が一致し、相互作用している可能性が示唆された。
培養上清中のサンプルの質量分析と免疫染色の組み合わせも継続して行い、Fボックスタンパク質の１つ、FBXW2が培養細胞側ではなく、骨膜組織の内部で発現していることを明らかにした。さらに骨膜由来細胞の細胞質抽出液の質量分析を行い、候補タンパク質の免疫染色を行った。

研究成果

• [雑誌論文] FBXW2 localizes with osteocalcin in bovine periosteum on culture dishes as visualized by double immunostaining (2018)
  • 著者名/発表者名: Mari Akiyama
  • 雑誌名: Heliyon 巻: 4 号: 9 ページ: 00782-00782
  • DOI: 10.1016/j.heliyon.2018.e00782
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Characterization of the F-box Proteins FBXW2 and FBXL14 in the Initiation of Bone Regeneration in Transplants given to Nude Mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Akiyama M
  • 雑誌名: Current Tissue Engineering 巻: －
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] ウシ骨膜におけるオステオカルシンとFBXW2の役割 (2018)
  • 著者名/発表者名: 秋山 真理、今井 弘一
  • 学会等名: 第71回日本歯科理工学会学術講演会
• [学会発表] 多層構造を有するウシ骨膜細胞におけるタンパク質の挙動-培養開始から骨形成時まで． (2016)
  • 著者名/発表者名: 秋山 真理, 今井 弘一．
  • 学会等名: 第23回日本歯科医学総会
  • 発表場所: 福岡国際会議場（福岡市）
  • 年月日: 2016-10-21
• [学会発表] ウシ骨膜由来培養細胞の足あとによるタンパク質の解析． (2016)
  • 著者名/発表者名: 秋山 真理．
  • 学会等名: 日本歯科理工学会 近畿・中四国地方会
  • 発表場所: 大阪府立男女共同参画・青少年センター（大阪市）
  • 年月日: 2016-08-20