ゼノ・フィーダーフリー培養で維持可能なiPS細胞の分離：新規表面マーカーの同定法

• 研究課題/領域番号: 26560219
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生体医工学・生体材料学
• 研究機関: 首都大学東京
• 研究代表者: 田岡 万悟 首都大学東京, 理工学研究科, 准教授 (60271160)
• 研究分担者: 泉 友則 山口大学, 医学(系)研究科, 准教授 (00261694) ; 嶋本 顕 広島大学, 医歯薬保健学研究院, 准教授 (70432713)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: プロテオミクス / 糖鎖 / 細胞表面タンパク質 / 糖タンパク質 / 表面マーカー / iPS細胞

研究成果の概要

iPS細胞の細胞表面に存在するタンパク質を知ることは幹細胞の品質の確認に重要である。そこで細胞表面のタンパク質を効率よく同定・定量するために、STAGEチップ法と順相クロマトグラフィーを組合せた方法を開発した。この方法で1400種類以上の細胞表面に存在するN結合型糖タンパク質が500μgのゼノフィーダーフリー培養したiPS細胞のタンパク質から同定された。iPS化する前の細胞や分化後の細胞とラベルフリーの定量によって比較したところ、10種類のゼノフィーダーフリー培養iPS細胞に特異的なタンパク質を得ることができた。

研究成果

• [雑誌論文] Global PROTOMAP Profiling to Search for Biomarkers of Early-Recurrent Hepatocellular Carcinoma (2014)
  • 著者名/発表者名: Taoka, Masato; Morofuji, Noriaki; Yamauchi, Yoshio; Ojima, Hidenori; Kubota, Daisuke; Terukina, Goro; Nobe, Yuko; Nakayama, Hiroshi; Takahashi, Nobuhiro; Kosuge, Tomoo; Isobe, Toshiaki; Kondo, Tadashi
  • 雑誌名: J. Proteome Res. 巻: 13 号: 11 ページ: 4847-4858
  • DOI: 10.1021/pr500262p
  • 査読あり
• [学会発表] CELL-SURFACE PROTEOME：N型糖タンパク質を指標にした細胞表面タンパク質の簡便な同定法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 田岡万悟 藤田千春 山内芳雄 嶋本顕 礒辺俊明
  • 学会等名: 日本プロテオーム学会2015年会
  • 発表場所: 熊本県熊本市
  • 年月日: 2015-07-23