研究成果の概要 |
本研究は、培養することが困難なシロアリ腸内に共生する原生生物をCRISPR/Casシステムによりゲノムを編集することにより、これまで不可能であった難培養性微生物の遺伝子機能を可能にすることを目的とした。その結果、原生生物のゲノムから、セロビオハイドロラーゼ遺伝子を同定し、切断部位を決定した。また原生生物のコドン使用頻度を求め、cas9, GFP遺伝子をコドン最適化した。cas9 mRNA, gRNA, 相同性組換え用DNAをシロアリ腸内に注入した。また、原生生物ゲノムから細菌由来の配列を除くため、原生生物細胞表面共生細菌のゲノムをシングルセルゲノム解析で明らかにした。
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