新規PTTH受容体の精製と構造決定

• 研究課題/領域番号: 26660266
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 昆虫科学
• 研究機関: 愛知学院大学 (2015-2016); 名古屋大学 (2014)
• 研究代表者: 溝口 明 愛知学院大学, 教養部, 教授 (60183109)
• 研究分担者: 片岡 宏誌 東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 教授 (60202008)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 昆虫 / 前胸腺刺激ホルモン / 受容体 / カイコガ / 精製

研究成果の概要

カイコガ前胸腺の細胞膜上に存在しPTTHに結合するタンパク質をウエスタンブロッティングにより検出した。PTTHとこのタンパク質の複合体の分子質量は約120kDaで、他の組織からは検出されない。この膜タンパク質（受容体と仮称）を精製するため、His-tag付きPTTHと前胸腺を反応させたのち、PTTHと受容体を架橋し、これを界面活性剤により可溶化した。このPTTH－受容体複合体はHis-tagタンパク質精製用磁気ビーズを用いて精製できたが、精製度が不十分で、質量分析による構造決定には至らなかった。もう一段階のアフィニティー精製法として免疫沈降法を試したが、複合体を回収することはできなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Myosuppression is involved in the regulation of pupal diapause in the cabbage army moth Mamestra brassicae.7 (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamada, N., Kataoka, H., Mizoguchi, A.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 7 号: 1 ページ: 41651-41651
  • DOI: 10.1038/srep41651
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Rab proteins in the brain and corpus allatum of Bombyx mori (2016)
  • 著者名/発表者名: Uno.T., Furutani,M.,Watanabe,C., Sakamoto.K., Uno,Y., Kanamaru,K.,
  • 雑誌名: Histochemistry and Cell Biology 巻: 未定 号: 1 ページ: 59-69
  • DOI: 10.1007/s00418-016-1422-y
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Endocrine Mechanisms Regulating Post-Diapause Development in the Cabbage Armyworm, Mamestra brassicae. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yamada, N., Okamoto, N., Kataoka, H., Mizoguchi, A.
  • 雑誌名: PLos One 巻: 11 号: 1 ページ: e0146619-e0146619
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0146619
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isoform-specific expression of the neuropeptide orcokinin in Drosophila melanogaster. (2015)
  • 著者名/発表者名: Chen, J., Choi, M.S., Mizoguchi, A., Veenstra, J.A., Kang, K., Kim, Y.-J., Kwon, J.Y.
  • 雑誌名: Peptides 巻: 68 ページ: 50-57
  • DOI: 10.1016/j.peptides.2015.01.002
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Disruption of diapause induction by TALEN-based gene mutagenesis in relation to a unique neuropeptide signaling pathway in Bombyx. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shiomi, K., Takasu, Y., Kunii, M., Tsuchiya, R., Mukaida, M., Kobayashi, M., Sezutsu, H., Ichida, M., Mizoguchi, A.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 5 号: 1 ページ: 15566-15566
  • DOI: 10.1038/srep15566
  • NAID: 120007101413
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] 蛹休眠の調節機構 ―ヨトウガの蛹休眠を中心に－. (2015)
  • 著者名/発表者名: 溝口明
  • 雑誌名: 蚕糸・昆虫バイオテック 巻: 84 ページ: 135-143
  • NAID: 130006162018
• [雑誌論文] Positive feedback regulation of prothoracicotropic hormone secretion by ecdysteroid - A mechanism that determines the timing of metamorphosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: 57.Mizoguchi, A., Kamimura, M., Kiuchi, M., Kataoka, H.
  • 雑誌名: Insect Biochem. Mol. Biol. 58, 39-45. 巻: 58 ページ: 39-45
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Isoform-specific expression of the neuropeptide orcokinin in Drosophila melanogaster. (2015)
  • 著者名/発表者名: 58.Chen, J., Choi, M.S., Mizoguchi, A., Veenstra, J.A., Kang, K., Kim, Y.-J., Kwon, J.Y.
  • 雑誌名: Peptides 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Orcokinin-like immunoreactivity in central neurons innervating the salivary glands and hindgut of ixodid ticks. (2015)
  • 著者名/発表者名: 59.Roller, L., Simo, L., Mizoguchi, A., Slovak M., Park, Y., Zitnan, D.
  • 雑誌名: Cell Tiss. Res. 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [学会発表] ヨトウガ蛹休眠の休眠覚醒後の成虫発生を制御する内分泌機構 (2015)
  • 著者名/発表者名: 山田信人、溝口明
  • 学会等名: 日本動物学会第86回大会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟）
  • 年月日: 2015-09-17
• [学会発表] カイコガ生殖器原基の成長発達のホルモン調節機構 (2015)
  • 著者名/発表者名: 藤永大輝、溝口明
  • 学会等名: 日本動物学会第86回大会
  • 発表場所: 朱鷺メッセ（新潟）
  • 年月日: 2015-09-17
• [学会発表] ヨトウガ蛹休眠の休眠覚醒を制御する内分泌機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山田信人、溝口明
  • 学会等名: 日本動物学会第85回大会
  • 発表場所: 東北大学（仙台）
  • 年月日: 2014-09-11
• [学会発表] カイコガ生殖器原基の成長発達のホルモン調節機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 藤永大輝、河村祐亮、溝口明
  • 学会等名: 日本動物学会第85回大会
  • 発表場所: 東北大学（仙台）
  • 年月日: 2014-09-11
• [図書] Handbook of Hormones: Comparative Endocrinology for Basic and Clinical Research (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizoguchi, A.
  • 出版者: Elsevier