| 研究課題/領域番号 |
26670051
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| 研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
創薬化学
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
真壁 幸樹 山形大学, 理工学研究科, 准教授 (20508072)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2015年度)
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| 配分額 *注記 |
3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 蛋白質工学 / 抗体工学 / 蛋白質トランススプライシング / 二重特異性抗体 / 重鎖抗体 / 抗体 / 蛋白質ライゲーション / インテイン |
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| 研究成果の概要 |
二重特異性抗体Ia1-cAbGFP4と蛍光蛋白質ラベル化体の作製に成功した。
二種類の発現ベクターを同時にBL21(DE3)株に形質転換し、一晩の前培養後に本培養を開始した。IPTGの誘導で発現したIa1-IntNは直ちに既に発現しているIntC-cAbGFP4と反応し、目的産物であるIa1-cABGFP4が作り出された。SDSPAGE上に現れたバンドが目的の物であるかどうかはcAbGFP4のC末端に融合してあるFLAGタグに対する抗体を用いたWestern Blottingにて確認した。二重特異性抗体と蛍光蛋白質ラベル化体の活性をフローサイトメトリーにて確認した。
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