G蛋白質N型糖鎖が規定する狂犬病ウイルス増殖亢進機構・弱毒化機構の解明と治療応用

• 研究課題/領域番号: 26712024
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 一部基金
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 大分大学
• 研究代表者: 山田 健太郎 大分大学, 医学部, 准教授 (70458280)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 24,700千円 (直接経費: 19,000千円、間接経費: 5,700千円); 2017年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2016年度: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2015年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円); 2014年度: 15,210千円 (直接経費: 11,700千円、間接経費: 3,510千円)
• キーワード: 狂犬病ウイルス / N型糖鎖 / 膜蛋白質 / 蛋白質相互作用 / 病原性 / 弱毒化 / 近赤外蛍光蛋白質 / in vivoイメージング / ウイルス / 感染症 / 糖鎖 / 獣医学 / リンパ節 / 増殖性 / 相互作用 / in vivo イメージング

研究成果の概要

本研究では、狂犬病ウイルスのG蛋白質N型糖鎖が規定している増殖亢進機構と弱毒化機構について解明を試みた。野生型G蛋白質と相互作用し、N型糖鎖の追加による増殖亢進と関連すると想定される宿主膜蛋白質分子として22分子が得られた。また、狂犬病ウイルスの病原性解明に資するin vivoイメージング法を開発した。すなわち、近赤外蛍光蛋白質iRFP720がウイルス感染動態の蛍光イメージングに最適であること、赤方偏移型ルシフェラーゼを用いた発光イメージングでは高感度にウイルス感染動態が追跡できること、さらにN型糖鎖変異弱毒株が宿主体内で排除される過程を時空間的に追跡することが可能であることを示した。

研究成果

• [雑誌論文] Near-infrared fluorescent protein iRFP720 is optimal for in vivo fluorescence imaging of rabies virus infection (2017)
  • 著者名/発表者名: Isomura Minori、Yamada Kentaro、Noguchi Kazuko、Nishizono Akira
  • 雑誌名: Journal of General Virology 巻: 98 号: 11 ページ: 2689-2698
  • DOI: 10.1099/jgv.0.000950
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathological lesions in the central nervous system and peripheral tissues of <i>dd</i>Y mice with street rabies virus (1088 strain) (2017)
  • 著者名/発表者名: Kimitsuki, K., Yamada, Y., Shiwa, N., Inoue, S. and Park, CH.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 79 号: 6 ページ: 970-978
  • DOI: 10.1292/jvms.17-0028
  • NAID: 130005695725
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] iRFP720 is optimal for in vivo fluorescent imaging of rabies virus infection (2018)
  • 著者名/発表者名: Kentaro Yamada, Minori Isomura, Kazuko Noguchi, Akira Nishizono
  • 学会等名: 50th Joint Working Conference on Viral Diseases, US-Japan Cooperative Medical Science Program
  • 国際学会
• [学会発表] 近赤外蛍光蛋白質iRFP720は狂犬病ウイルスのin vivo蛍光イメージング解析に適する (2017)
  • 著者名/発表者名: 山田健太郎、磯村美乃里、野口賀津子、西園 晃
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] 近赤外蛍光蛋白質iRFP720は狂犬病ウイルスのin vivo蛍光イメージング解析に適する (2017)
  • 著者名/発表者名: 山田健太郎、磯村美乃里、野口賀津子、西園 晃
  • 学会等名: 第65回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] 赤色蛍光蛋白質E2-Crimson発現組換え狂犬病ウイルス街上毒の作出とin vivoイメージング解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 山田健太郎、磯村美乃里、野口賀津子、西園晃
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（北海道札幌市）
  • 年月日: 2016-10-23
• [学会発表] in vivo蛍光イメージングに資する赤色蛍光蛋白質E2-Crimson発現組換え狂犬病ウイルス街上毒株の作出 (2016)
  • 著者名/発表者名: 磯村美乃里、山田健太郎、野口賀津子、西園晃
  • 学会等名: 第159回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部（神奈川県藤沢市）
  • 年月日: 2016-09-06
• [学会発表] 狂犬病ウイルスのin vivo蛍光イメージング解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 山田健太郎、磯村美乃里、野口賀津子、西園晃
  • 学会等名: 第159回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部（神奈川県藤沢市）
  • 年月日: 2016-09-06
• [学会発表] Generation of a recombinant street rabies virus expressing a far-red protein to be applied to in vivo imaging analysis (2016)
  • 著者名/発表者名: Kentaro Yamada, Minori Isomura, Kazuko Noguchi, Akira Nishizono
  • 学会等名: 日米医学協力研究会ウイルス性疾患部門・第49回日米合同シンポジウム
  • 発表場所: Marriott North Bethesda, Rockville, Maryland, USA
  • 年月日: 2016-01-13
  • 国際学会