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PEG化タンパク質位置異性体の変性構造を固液界面で特異認識する精密分離プロセス

研究課題

研究課題/領域番号 26820363
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関山口大学

研究代表者

吉本 則子  山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40432736)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2014年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワードPEG化タンパク質 / イオン交換クロマトグラフィー / 異性体分離 / chromatography / PEGylation / PEGylated protein / 変性 / リフォールディング
研究成果の概要

イオン交換クロマトグラフィーにおけるPEG化タンパク質修飾位置異性体の分離機構について塩濃度勾配溶出法(LEG)およびpHグラジエントにより解析した。PEG化タンパク質位置異性体の保持係数は、PEG鎖が修飾されたlysine残基のpKaの値に依存し、LEGおよびpHグラジエント法のいずれにおいてもpKaの値が低いものほど早く溶出されることが分かった。また変性PEG化タンパク質・PEG化DNAの修飾位置異性体分離において正味の電荷の違いではなく立体構造が重要であることを明らかにした。またPEG化タンパク質の分子拡散係数および細孔内拡散係数を測定し、カラム内における物質移動特性を明らかにした。

報告書

(3件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2016 2015 2014 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (1件) (うち国際共著 1件、 査読あり 1件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (6件)

  • [国際共同研究] リュビアナ大学(スロベニア)

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [雑誌論文] Monolith disk chromatography separates PEGylated protein positional isoforms within minutes at low pressure2015

    • 著者名/発表者名
      Yu Isakari, Ales Podgornik, Noriko Yoshimoto, Shuichi Yamamoto
    • 雑誌名

      Biotechnology Journal

      巻: 11 号: 1 ページ: 100-106

    • DOI

      10.1002/biot.201500294

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [学会発表] モノリスイオン交換クロマトグラフィーにおけるPEG化タンパク質異性体の分離機構2016

    • 著者名/発表者名
      吉本 則子
    • 学会等名
      化学工学会 第81年会
    • 発表場所
      関西大学 千里山キャンパス (大阪府、吹田市)
    • 年月日
      2016-03-14
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Optimization of monomer separation processes by electrostatic-interaction chromatography2015

    • 著者名/発表者名
      Shuichi Yamamoto , Noriko Yoshimoto , Yu Isakari , Ales Podgornik
    • 学会等名
      249th ACS National Meeting & Exposition
    • 発表場所
      USA, Atlanta
    • 年月日
      2015-03-22
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] On-Column (solid-phase) Pegylation and Separation of Pegylated Proteins2014

    • 著者名/発表者名
      Yu Isakari, Noriko Yoshimoto, Shuichi Yamamoto and Ales Podgornik
    • 学会等名
      14AIChE Annual meeting
    • 発表場所
      USA, Atlanta
    • 年月日
      2014-11-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Diffusion Coefficients of DNAs and Pegylated Proteins for Estimating the Performance of Chromatography2014

    • 著者名/発表者名
      Masataka Hamachi, Yu Isakari, Noriko Yoshimoto, Shuichi Yamamoto and Ales Podgornik
    • 学会等名
      14AIChE Annual meeting
    • 発表場所
      USA, Atlanta
    • 年月日
      2014-11-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Predicting the Efficiency of Capture Chromatography of Proteins2014

    • 著者名/発表者名
      Noriko Yoshimoto, Yu Isakari, and Shuichi Yamamoto
    • 学会等名
      ICSST14
    • 発表場所
      奈良県、奈良市、奈良県新公会堂
    • 年月日
      2014-10-31
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Analysis of chromatographic separation for PEGylated proteins on the basis of their diffusion behaviours in porous particle2014

    • 著者名/発表者名
      Yu Isakari, Noriko Yoshimoto, Shuichi Yamamoto
    • 学会等名
      2nd International Symposium on Multiscale Multiphase Process Engineering (MMPE2)
    • 発表場所
      Germany, Hamburg
    • 年月日
      2014-09-15
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2017-05-10  

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