核ラミン変異体の網羅的な溶液NMR解析によるラミノパシーの病態生理の解明

• 研究課題/領域番号: 26840050
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物物理学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 杉木 俊彦 大阪大学, たんぱく質研究所, 助教 (70635698)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
• キーワード: NMR / 核ラミン

研究成果の概要

Lamin A (LMNA) 蛋白質は、核膜裏打ち蛋白質であり、細胞の生存や性状な増殖に重要な働きをしている。LMNA に突然変異が入ると、重篤な遺伝病ラミノパシーを引き起こすことが知られている。しかしその発症のメカニズムは未知な点が多い。
本研究で、Lamin A (LMNA)蛋白質について、安定同位体標識蛋白質の大量発現・精製法を確立し、溶液NMR法により、野生型および４種類のラミノパシー原因変異体の立体構造を高精度に決定することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Amorphous Aggregation of Cytochrome c with Inherently Low Amyloidogenicity Is Characterized by the Metastability of Supersaturation and the Phase Diagram (2016)
  • 著者名/発表者名: Lin Yuxi, Kardos József, Imai Mizue, Ikenoue Tatsuya, Kinoshita Misaki, Sugiki Toshihiko, Ishimori Koichiro, Goto Yuji, and Lee Young-Ho
  • 雑誌名: Langmuir 巻: 32 号: 8 ページ: 2010-2022
  • DOI: 10.1021/acs.langmuir.5b03810
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Physicochemical Nature of Interfaces Controlling Ferredoxin NADP+ Reductase Activity through Its Interprotein Interactions with Ferredoxin (2015)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita Misaki, Kim Ju Yaen, Kume Satoshi, Sakakibara Yukiko, Sugiki Toshihiko, Kojima Chojiro, Kurisu Genji, Ikegami Takahisa, Hase Toshiharu, Kimata-Ariga Yoko, Lee Young-Ho
  • 雑誌名: Biochimica et Biophysica Acta-Bioenergetics 巻: 1847 号: 10 ページ: 1200-1211
  • DOI: 10.1016/j.bbabio.2015.05.023
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The crystal structure of the plant small GTPase OsRacl reveals its mode of binding to NADPH oxidase. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kosami KI, Ohki I, Nagano M, Furuita F, Sugiki T, Kawano Y, Kawasaki T, Fujiwara T, Nakagawa A, Shimamoto K, Kojima C
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: 289 号: 41 ページ: 28569-78
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.603282
  • 説明: (in press)(印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Utilization of paramagnetic relaxation enhancements for high-resolution NMR structure determination of a soluble loop-rich protein with sparse NOE distance restraints (2015)
  • 著者名/発表者名: Kyoko Furuita, Saori Kataoka, Toshihiko Sugiki, Yoshikazu Hattori, Naohiro Kobayashi, Takahisa Ikegami, Kazuhiro Shiozaki, Toshimichi Fujiwara and Chojiro Kojima
  • 雑誌名: J. Biomol. NMR 巻: 61 号: 1 ページ: 55-64
  • DOI: 10.1007/s10858-014-9882-7
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Latest approaches for efficient protein production in drug discovery (2014)
  • 著者名/発表者名: Toshihiko Sugiki, Toshimichi Fujiwara and Chojiro Kojima
  • 雑誌名: Expert Opin. Drug Discov. 巻: 9 号: 10 ページ: 1189-1204
  • DOI: 10.1517/17460441.2014.941801
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 核膜タンパク質A型ラミンの電子顕微鏡構造解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 三尾 宗代、角田 舞、山下 隼人、杉木 俊彦、三尾 和弘
  • 学会等名: BMB2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫県、神戸市）
  • 年月日: 2015-12-02
• [学会発表] ヒト内在性神経保護ペプチドHumaninの立体構造および機能発現に関するNMR解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 杉木 俊彦、Alsanousi Nesreen1、古板 恭子、藤原 敏道、児嶋 長次郎
  • 学会等名: BMB2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド（兵庫県、神戸市）
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] Scrambling-freeなアミノ酸選択的13C標識法と13C標識の高選択性を利用したアミノ酸選択的 (2015)
  • 著者名/発表者名: 杉木俊彦、藤原敏道、児嶋長次郎
  • 学会等名: 第54回NMR討論会
  • 発表場所: 千葉工業大学（千葉県、習志野市）
  • 年月日: 2015-11-06
• [学会発表] 微生物による組換え蛋白質発現 (2015)
  • 著者名/発表者名: 杉木俊彦
  • 学会等名: 日本蛋白質科学会
  • 発表場所: あわぎんホール（徳島県、徳島市）
  • 年月日: 2015-06-25
  • 招待講演