尿中キラルアミノ酸メタボローム解析を利用する鋭敏な非侵襲診断法の開発

• 研究課題/領域番号: 26860023
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 三次 百合香 九州大学, 薬学研究院, 特任助教 (80707175)
• 研究協力者: 濱瀬 健司 九州大学, 大学院薬学研究院, 教授 (10284522) ; 三田 真史 株式会社資生堂
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2016年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2015年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
• キーワード: アミノ酸 / メタボロミクス / 光学分割 / キラルアミノ酸 / 虚血性腎障害 / 二次元HPLC

研究成果の概要

本研究では、尿試料におけるタンパク質構成アミノ酸のD体及びL体含量を網羅的に個別解析可能な専用装置の開発を達成した。また、質量分析計を検出器として導入し、尿由来の夾雑成分の影響をほとんど受けずに尿中キラルアミノ酸含量解析が可能な高性能分析装置を構築した。開発した装置を用いて、ヒトおよびマウス尿試料において様々なD-アミノ酸の存在を明らかにした。虚血再灌流腎障害モデルマウスにおける尿中キラルアミノ酸メタボロミクスを行い、D-アスパラギン、D-セリン、D-アラニン、D-プロリン等8種のキラルアミノ酸が腎障害マーカーとなり得る可能性を示した。

研究成果

• [雑誌論文] Enantioselective determination of citrulline and ornithine in the urine of D-amino acid oxidase deficient mice using a two-dimensional high-performance liquid chromatographic system (2016)
  • 著者名/発表者名: Reiko KOGA, Yurika MIYOSHI, Yu SATO, Masashi MITA, Ryuichi KONNO, Wolfgang LINDNER, Kenji HAMASE
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: 1467 ページ: 312-317
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2016.07.053
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] D-アミノ酸関連酵素欠損に伴うほ乳類体内のD-アミノ酸含量変化 (2014)
  • 著者名/発表者名: 三次百合香，金野柳一，三田真史，浜瀬健司
  • 雑誌名: Vitamins (Japan) 巻: 88 ページ: 515-523
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Two-demensional HPLC-FL determination of chiral amino acids in foodstuffs (2016)
  • 著者名/発表者名: Yurika MIYOSHI, Maiko NAKANE, Yoshikazu SUGITO, Yosuke TOJO, Reiko KOGA, Masanobu NAGANO, Masashi MITA, Kenji HAMASE
  • 学会等名: XVII International Symposium on Luminescence Spectrometry
  • 発表場所: Taipei, Taiwan
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Two-dimensional HPLC-FL/MS/MS determination of chiral amino acids in physiological fluids of model mice of ischemic acute kidney injury (2015)
  • 著者名/発表者名: Yurika MIYOSHI, Jumpei SASABE, Masataka SUZUKI, Yayoi YONENAGA, Yu SATO, Maiko NAKANE, Masashi MITA, Sadakazu AISO, Kenji HAMASE
  • 学会等名: 26th International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis
  • 発表場所: Tbilisi, Georgia
  • 年月日: 2015-07-05
  • 国際学会
• [学会発表] 神経興奮性キラルアミノ酸を利用する創薬シーズ・診断マーカー探索のための高感度二次元HPLC一斉分析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 三次百合香，笹部潤平，米永弥生，中根舞子，三田真史，金野柳一，相磯貞和，浜瀬健司
  • 学会等名: 第15回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2015-06-24
  • 招待講演
• [学会発表] 二次元HPLC-FL-MS/MSを用いる腎障害モデルのキラルアミノ酸メタボロミクス (2015)
  • 著者名/発表者名: 三次百合香，笹部潤平，鈴木将貴，米永弥生，中根舞子，三田真史，相磯貞和，浜瀬健司
  • 学会等名: Symposium on Molecular Chirality 2015
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2015-06-12
• [学会発表] Enantioselective determination of all proteinogenic amino acids in the serum and urine of patients/mice with renal dysfunction using a two-dimensional HPLC-FL/MS/MS system (2014)
  • 著者名/発表者名: Yurika MIYOSHI, Nao KUSANO, Yayoi YONENAGA, Hirohisa ONIGAHARA, Jumpei SASABE, Eiichi NEGISHI, Maiko NAKANE, Masashi MITA, Tomonori KIMURA, Ryohei YAMAMOTO, Yoshitaka ISAKA, Sadakazu AISO, Kenji HAMASE
  • 学会等名: 30th International Symposium on Chromatography (ISC2014)
  • 発表場所: Salzburg, Austria
  • 年月日: 2014-09-14 – 2014-09-18
• [学会発表] Chiral amino acid metabolomics using two-dimensional HPLC focusing on neuro-active amino acids (2014)
  • 著者名/発表者名: Yurika MIYOSHI, Eiichi NEGISHI, Masanobu NAGANO, Jumpei SASABE, Maiko NAKANE, Masashi MITA, Ryuichi KONNO, Sadakazu AISO, Kenji HAMASE
  • 学会等名: The 2nd International Conference of D-Amino Acid Research
  • 発表場所: Utsunomiya
  • 年月日: 2014-09-02 – 2014-09-05
  • 招待講演
• [学会発表] 慢性腎不全におけるキラルアミノ酸メタボロームの二次元HPLC-FL/MS/MS解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 三次 百合香, 草野尚, 鬼ヶ原弘久, 根岸栄一, 笹部潤平, 中根舞子, 三田真史, 木村友則, 山本陵平, 猪阪善隆, 相磯貞和, 浜瀬健司
  • 学会等名: 第21回クロマトグラフィーシンポジウム
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2014-06-04 – 2014-06-06
• [備考] 研究室ホームページ
  • URL: http://soyaku.phar.kyushu-u.ac.jp/index.html