先端的な３Ｄイメージング技法によるゴルジ装置の全体像とその多様性の解明

• 研究課題/領域番号: 26860128
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 旭川医科大学 (2015-2016); 新潟大学 (2014)
• 研究代表者: 甲賀 大輔 旭川医科大学, 医学部, 准教授 (30467071)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円); 2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: ゴルジ装置 / 相関顕微鏡観察法 / Array tomography / 3D再構築法 / 3D再構築 / 連続切片SEM法 / SEM / 相関顕微観察法

研究成果の概要

本研究では、array tomography法を新たに開発した。この手法を用いることで、これまで解析が困難であった空間的に複雑な形状を呈するゴルジ装置の３D全体像の解析が可能となった。その結果、ゴルジ装置の3D形状は多様であり、細胞種によって様々であることがわかった。また、この小器官が一つの連続した構造体であり、細胞質の広領域を占めることも示すことができた。さらに、蛍光イメージングとオスミウム浸軟法を組み合わせた相関顕微鏡観察法により、去勢後の性腺刺激ホルモン産生細胞のゴルジ装置の形態変化の解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] <b>Changes in the three-dimensional ultrastructure of membranous organelles in male rat pituitary gonadotropes after castration</b> (2017)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Bochimoto H, Kusumi S, Ushiki T, Watanabe T
  • 雑誌名: Biomedical Research 巻: 38 号: 1 ページ: 1-18
  • DOI: 10.2220/biomedres.38.1
  • NAID: 130005242939
  • ISSN: 0388-6107, 1880-313X
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Novel scanning electron microscopy methods for analyzing the 3D structure of the Golgi apparatus (2017)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Ushiki T and Watanabe T
  • 雑誌名: Anat Sci Int. 巻: 92 ページ: 37-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Brachylaima ezohelicis sp. nov. (Trematoda: Brachylaimidae) found from the land snail Ezohelix gainesi, with a note of an unidentified Brachylaima species in Hokkaido, Japan (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakao M, Waki T, Sasaki M, Anders JL, Koga D, Asakawa M
  • 雑誌名: Parasitol Int. 巻: 66 号: 3 ページ: 240-249
  • DOI: 10.1016/j.parint.2017.01.015
  • NAID: 120006382496
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct evidence for activated CD8+ T cell transmigration across portal vein endothelial cells in liver graft rejection (2016)
  • 著者名/発表者名: Kariya T, Ueta H, Xu XD, Koga D, Ezaki T, Yu E, Kusumi S, Kitazawa Y, Sawanobori Y, Ushiki T, Issekutz T, Matsuno K
  • 雑誌名: J Gastroenterol. 巻: 51 号: 10 ページ: 985-998
  • DOI: 10.1007/s00535-016-1169-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Backscattered electron image of osmium-impregnated/macerated tissues as a novel technique for identifying the cis-face of the Golgi apparatus by high-resolution scanning electron microscopy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Bochimoto H, Watanabe T, Ushiki T
  • 雑誌名: J Microsc 巻: in press 号: 1 ページ: 87-96
  • DOI: 10.1111/jmi.12379
  • 査読あり
• [雑誌論文] Three-dimensional shape of the Golgi apparatus in different cell types: serial section scanning electron microscopy of the osmium-impregnated Golgi apparatus. (2016)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Kusumi S, Ushiki T
  • 雑誌名: Microscopy 巻: 65 号: 2 ページ: 145-157
  • DOI: 10.1093/jmicro/dfv360
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Correlative Light and Scanning Electron Microscopy for Observing the Three-Dimensional Ultrastructure of Membranous Cell Organelles in Relation to their Molecular Components. (2015)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Kusumi S, Bochimoto H, Watanabe T, Ushiki T
  • 雑誌名: J Histochem Cytochem 巻: 63 号: 12 ページ: 968-979
  • DOI: 10.1369/0022155415609099
  • 査読あり
• [雑誌論文] High resolution imaging by scanning electron microscopy of semithin sections in correlation with light microscopy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Koga D, Kusumi S, Shodo R, Dan Y and Ushiki T
  • 雑誌名: Microscopy 巻: 64 号: 6 ページ: 387-394
  • DOI: 10.1093/jmicro/dfv042
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Three-dimensional reconstruction of serial sections for analysis of the microvasculature of the white pulp and the marginal zone in the human spleen. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kusumi S, Koga D, Kanda Tand Ushiki T
  • 雑誌名: Biomedical research 巻: 印刷中
  • NAID: 130005083856
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 連続切片SEM法とゴルジ装置の3D構造解析への応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、牛木辰男
  • 雑誌名: 顕微鏡 巻: 49 ページ: 171-175
  • NAID: 130007701730
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] SEM試料作製法の基礎 (2017)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔
  • 学会等名: 第73回日本顕微鏡学会学術講演会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2017-05-30
  • 招待講演
• [学会発表] 免疫組織化学染色切片とオスミウム浸軟組織の相関顕微鏡法 (2017)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、牛木辰男、渡部剛
  • 学会等名: 第73回日本顕微鏡学会学術講演会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2017-05-30
  • 招待講演
• [学会発表] 連続切片SEM法による内分泌細胞ゴルジ装置の3D構造解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、柴田昌宏、渡部剛
  • 学会等名: 第122回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • 発表場所: 長崎大学
  • 年月日: 2017-03-28
• [学会発表] ゴルジ装置の3D構造解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、渡部剛
  • 学会等名: 平成28年度日本顕微鏡学会北海道支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学
  • 年月日: 2016-12-10
• [学会発表] SEMによる準超薄切片の超薄像観察 (2016)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、暮地本宙己、牛木辰男、渡部剛
  • 学会等名: 日本解剖学会第62回東北・北海道連合支部学術集会
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2016-09-03
• [学会発表] SEMによる準超薄切片の超薄像観察 (2016)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、暮地本宙己、渡部剛、牛木辰男
  • 学会等名: 第72回日本顕微鏡学会学術講演会
  • 発表場所: 仙台国際センター
  • 年月日: 2016-06-14
• [学会発表] 走査電子顕微鏡試料作製法 (2016)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔
  • 学会等名: 第72回日本顕微鏡学会学術講演会
  • 発表場所: 仙台国際センター
  • 年月日: 2016-06-14
  • 招待講演
• [学会発表] 最先端の3Dイメージング技法によるゴルジ装置の形態的多様性の観察 (2016)
  • 著者名/発表者名: 甲賀 大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 牛木辰男, 渡部剛
  • 学会等名: 第121回日本解剖学会 総会・全国学術集会 (シンポジウム講演)
  • 発表場所: ビックパレットふくしま
  • 年月日: 2016-03-28
• [学会発表] 準超薄切片の超薄像観察法(SEM切片法)の開発と応用 (2015)
  • 著者名/発表者名: 甲賀 大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛
  • 学会等名: 平成27年度日本顕微鏡学会北海道支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学 工学部 フロンティア応用化学研究棟
  • 年月日: 2015-12-12
  • 招待講演
• [学会発表] 凍結割断による生物試料の観察 (2015)
  • 著者名/発表者名: 甲賀 大輔
  • 学会等名: SCANTACH 2015 (シンポジウム講演)
  • 発表場所: 東京都市大学 世田谷キャンパス
  • 年月日: 2015-09-11
• [学会発表] 甲賀 大輔 , 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛, 牛木辰男 (2015)
  • 著者名/発表者名: 蛍光免疫染色像とオスミウム浸軟ＳＥＭ像の相関顕微観察法の開発
  • 学会等名: 第61回東北・北海道連合支部学術集会 (日本解剖学会)
  • 発表場所: 盛岡市観光分化交流センター プラザおでって
  • 年月日: 2015-08-29
• [学会発表] 連続切片走査電子顕微鏡観察・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、牛木辰男
  • 学会等名: 第71回日本顕微鏡学会 (シンポジウム講演)
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 年月日: 2015-05-13 – 2015-05-15
• [学会発表] 連続切片走査電子顕微鏡観察・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男
  • 学会等名: 第71回日本顕微鏡学会学術講演会 (シンポジウム講演)
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 年月日: 2015-05-13
• [学会発表] Serial section scanning electron microscopy and its application for the morphological analysis of the Golgi apparatus. (2015)
  • 著者名/発表者名: D. Koga, S. Kusumi and T. Ushiki
  • 学会等名: 第120回日本解剖学会総会･全国学術集会・第92回 日本生理学会大会合同大会 (シンポジウム講演)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [学会発表] 連続切片SEM法によるゴルジ装置の3D構造解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、牛木辰男
  • 学会等名: 生理学研究所研究会
  • 発表場所: 生理学研究所(岡崎)
  • 年月日: 2014-11-12 – 2014-11-13
  • 招待講演
• [学会発表] 走査電子顕微鏡による下垂体前葉細胞の3D微細構造解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、牛木辰男
  • 学会等名: 第18回日本内分泌病理学会学術総会
  • 発表場所: 都道府県会館（東京都千代田区）
  • 年月日: 2014-11-01 – 2014-11-02
  • 招待講演
• [学会発表] バイオ研究におけるSEMの応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、牛木辰男
  • 学会等名: SCAN TECH 2014
  • 発表場所: 東京都市大学
  • 年月日: 2014-09-12
  • 招待講演
• [学会発表] 連続切片走査電子顕微鏡法・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、牛木辰男
  • 学会等名: 第70回日本顕微鏡学会
  • 発表場所: 幕張メッセ
  • 年月日: 2014-05-11 – 2014-05-13
  • 招待講演
• [学会発表] 蛍光イメージングと走査電子顕微鏡像の対比法 (2014)
  • 著者名/発表者名: 甲賀大輔、久住聡、暮地本宙己、渡部剛、牛木辰男
  • 学会等名: 第70回日本顕微鏡学会
  • 発表場所: 幕張メッセ
  • 年月日: 2014-05-11 – 2014-05-13
  • 招待講演