ヘリコバクター・ピロリ病原因子CagAによるCsk撹乱の構造生物学的解析

• 研究課題/領域番号: 26860284
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 細菌学(含真菌学)
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 林 剛瑠 東京大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10722209)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: ピロリ菌 / CagA / 細胞内シグナル撹乱 / 構造-機能解析 / ピロリ菌感染 / タンパク質複合体構造解析 / タンパク質複合体機能解析

研究成果の概要

大腸菌発現系を用いてピロリ菌CagAがんタンパク質のチロシンリン酸化体を発現・精製する方法を樹立した。精製タンパク質を用いることでCagAとその標的分子であるCskとの相互作用が物理的な結合であることを明らかにし、CagAとの複合体形成によってCskが異常活性化することを見出した。CagA分子内に存在する複数のチロシンリン酸化モチーフ（EPIYAモチーフ）のうち、CagA-Csk複合体形成に重要なモチーフを同定した。さらに結晶構造解析によりCagA-Csk相互作用の様子を構造学的に明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Determination of the catalytic activity of LEOPARD syndrome- associated SHP2 mutants toward parafibromin, a bona fide SHP2 substrate involved in Wnt signaling (2016)
  • 著者名/発表者名: Saori Noda, Atsushi Takahashi, Takeru Hayashi, Sei-ichi Tanuma and Masanori Hatakeyama
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 469 号: 4 ページ: 1133-1139
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.12.117
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Improvement of Helicobacter pylori CagA crystals by the multi-step soaking method (2016)
  • 著者名/発表者名: Senda, M.
  • 雑誌名: Cryst. Growth Des. 巻: 16 号: 3 ページ: 1565-1571
  • DOI: 10.1021/acs.cgd.5b01692
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Host SHP1 phosphatase antagonizes Helicobacter pylori CagA and can be downregulated by EBV. (2016)
  • 著者名/発表者名: Saju, P., Murata-Kamiya, N., Hayashi, T., Senda, Y., Nagase, L., Noda, S., Matusaka, K., Funata, S., Kunita, A., Urabe, M., Seto, Y., Fukayama, M., Kaneda, A., Hatakeyama, M.
  • 雑誌名: Nature Microbiology 巻: 1 号: 4 ページ: 16026-16026
  • DOI: 10.1038/nmicrobiol.2016.26
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Dramatic increase in SHP2 binding activity of Helicobacter pylori Western CagA by EPIYA-C duplication: its implications in gastric carcinogenesis (2015)
  • 著者名/発表者名: Nagase, L.
  • 雑誌名: Sci. Rep. 巻: 5 号: 1 ページ: 15749-15749
  • DOI: 10.1038/srep15749
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] ピロリ菌CagAによる宿主分子撹乱機構の構造と機能 (2014)
  • 著者名/発表者名: 林剛瑠、長瀬里沙、千田美紀、千田俊哉、畠山昌則
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
  • 招待講演
• [学会発表] ピロリ菌がんタンパク質CagAと標的分子Cskとの相互作用における生物物理化学的解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 林剛瑠、畠山昌則
  • 学会等名: 第73回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [図書] 実験医学 増刊 (2014)
  • 著者名/発表者名: 千田俊哉、千田美紀、林剛瑠、畠山昌則
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 羊土社