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疾患バイオマーカーの微量検出を目的とする超高親和力変異抗体の効率的創出法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 26860378
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 病態検査学
研究機関神戸薬科大学

研究代表者

大山 浩之  神戸薬科大学, 薬学部, 助教 (80572966)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
キーワード抗体工学 / 臨床化学 / タンパク質工学 / 進化分子工学 / 免疫化学
研究成果の概要

高親和力で特異的な抗体は、臨床検査における体外および体内診断薬として有用である。しかし、従来のハイブリドーマ法で得られる抗体の性能には限界がある。そこで、天然の抗体遺伝子を改変する抗体工学が期待されているが、膨大な多様性をもつ抗体提示ファージライブラリーから目的の改良分子種を効率的に選別することは困難である。この問題を解決するために、本研究ではフローサイトメトリーの原理を基盤とする改良抗体の革新的な単離法の確立を目指した。必要なキー試薬であるモノクローナル抗ファージ抗体を作製し、これを人工のミニ抗体 (scFv) に改変した。さらに、発光タンパク質との融合体を調製し、その有用性を検討した。

報告書

(3件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Gaussia Luciferase as a Genetic Fusion Partner with Antibody Fragments for Sensitive Immunoassay Monitoring of Clinical Biomarkers2015

    • 著者名/発表者名
      Oyama Hiroyuki; Morita Izumi; Kiguchi Yuki; Miyake Sayaka; Moriuchi Ayaka; Akisada Tatsuki; Kobayashi Norihiro; Niwa Toshifumi
    • 雑誌名

      Analytical chemistry

      巻: 87(24) 号: 24 ページ: 12387-12395

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.5b04015

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 抗コルチゾールscFvの親和性成熟における部位特異的点変異の効果2016

    • 著者名/発表者名
      大山浩之, 德重仁美, 知念絵美里, 森下知美, 森田いずみ, 小林典裕
    • 学会等名
      日本薬学会第136年会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2016-03-28
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 試験管内親和性成熟による実用抗体の創製: 低分子バイオマーカーを例に2015

    • 著者名/発表者名
      大山浩之
    • 学会等名
      生物化学的測定研究会第20回学術シンポジウム
    • 発表場所
      神戸
    • 年月日
      2015-11-13
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 高親和力抗エストラジオール変異scFvの創製とその親和性成熟機構の解析2015

    • 著者名/発表者名
      大山浩之, 江浪友理, 山本知佳, 田川達矢, 小林典裕
    • 学会等名
      第55回日本臨床化学会年次学術集会
    • 発表場所
      吹田
    • 年月日
      2015-10-31
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 改良型抗エストラジオールscFvの親和性成熟機構の解析2015

    • 著者名/発表者名
      大山浩之, 江浪友理, 田川達矢, 山本知佳, 森田いずみ, 小林典裕
    • 学会等名
      日本分析化学会64年会
    • 発表場所
      博多
    • 年月日
      2015-09-11
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] “Antibody breeding” for more sensitive immunoassays 1: Three-step affinity maturation generated an improved scFv suitable for serum estradiol-17 beta ELISA2015

    • 著者名/発表者名
      Hiroyuki Oyama, Norihiro Kobayashi
    • 学会等名
      European Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
    • 発表場所
      Paris, France
    • 年月日
      2015-06-22
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 抗エストラジオールscFv試験管内親和性成熟機構の解析2015

    • 著者名/発表者名
      大山浩之, 江浪友理, 木口裕貴, 森田いずみ, 小林典裕
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸市
    • 年月日
      2015-03-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 抗コチニンscFvの親和性成熟における部位特異的点変異の効果2015

    • 著者名/発表者名
      森田いずみ, 西村沙貴, 蓑田早耶香, 木口裕貴, 大山浩之, 小林典裕
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸市
    • 年月日
      2015-03-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] アミロイドーシスの病態解明を目指した抗ApoA-Iモノクローナル抗体の作製2015

    • 著者名/発表者名
      堀江有紀, 土屋沙織, 大山浩之, 小林典裕, 斎藤博幸
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸市
    • 年月日
      2015-03-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 大麻成分に対するモノクローナル抗体の調製とキャラクタリゼーション2015

    • 著者名/発表者名
      伊藤綾, 安尾まゆみ, 竜田都加, 森田いずみ, 大山浩之, 小林典裕
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸市
    • 年月日
      2015-03-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 高感度ヒト血清中コルチゾールELISAの開発を目的とするscFv-ルシフェラーゼ融合タンパク質の創製2014

    • 著者名/発表者名
      大山浩之, 三宅沙也香, 森田いずみ, 丹羽俊文, 小林典裕
    • 学会等名
      日本分析化学会第63年会
    • 発表場所
      東広島市
    • 年月日
      2014-09-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] 改良型変異scFvフラグメントを用いるヒト尿中コチニンのモノクローナルELISA2014

    • 著者名/発表者名
      森田いずみ, 平井杏奈, 西村沙貴, 大山浩之, 太田光煕, 小林典裕
    • 学会等名
      日本分析化学会第63年会
    • 発表場所
      東広島市
    • 年月日
      2014-09-19
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [図書] 免疫測定法 基礎から先端まで2014

    • 著者名/発表者名
      生物化学的測定研究会(編)
    • 総ページ数
      336
    • 出版者
      講談社
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2017-05-10  

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