新規WNKキナーゼ制御系であるKLHL3-Cullin3の病態生理学的役割の検討

• 研究課題/領域番号: 26860629
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 腎臓内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 若林 麻衣 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 非常勤講師 (00707292)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 高血圧症 / オートファジー / WNK / KLHL3 / PHAII / p62 / 偽性低アルドステロン血症II型(PHAII) / NaCl共輸送体(NCC) / ユビキチン / E3リガーゼ / ノックインマウス / 蛍光相関分光法(FCS)

研究成果の概要

KLHL3はWNK4をユビキチン化し血圧制御に関わる。本研究ではWNK4分解系におけるp62/SQSTM1(p62)、選択的オートファジー、偽性低アルドステロン症II型(PHAII)の関与を検証した。HEK293T細胞においてKLHL3はp62と結合し、WNK4はこれらを介してオートファゴソームに取り込まれた。プロテアソーム阻害下p62ノックダウンによりWNK4とKLHL3はともに増加したが、PHAII変異KLHL3存在下ではその増加は見られなかった。以上からWNK4はp62を介した選択的オートファジーによる制御を受け、PHAIIではオートファジーに伴うWNK4分解も阻害されることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Involvement of selective autophagy mediated by p62/SQSTM1 in KLHL3-dependent WNK4 degradation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori Y, Mori T, Wakabayashi M, Yoshizaki Y, Zeniya M, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: Biochem J. 巻: 472 号: 1 ページ: 33-41
  • DOI: 10.1042/bj20150500
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Impaired degradation of WNK by Akt and PKA phosphorylation of KLHL3. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshizaki Y, Mori Y, Tsuzaki Y, Mori T, Nomura N, Wakabayashi M, Takahashi D, Zeniya M, Kikuchi E, Araki Y, Ando F, Isobe K, Nishida H, Ohta A, Susa K, Inoue Y, Chiga M, Rai T, Sasaki S, Uchida S, Sohara E.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 467 号: 2 ページ: 229-234
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.09.184
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] PKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との結合を制御する (2015)
  • 著者名/発表者名: 吉崎幸、蘇原映誠、森崇寧、若林麻衣、高橋大栄、銭谷慕子、菊池絵梨子、森雄太郎、荒木雄也、安藤史顕、頼建光、佐々木成、内田 信一
  • 学会等名: 第58回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋 名古屋国際会議場
  • 年月日: 2015-06-05 – 2015-06-07
• [学会発表] p62/SQSTM1が関わるWNK4の選択的オートファジーと偽性低アルドステロン症II型との関わり (2015)
  • 著者名/発表者名: 森雄太郎、森崇寧、若林麻衣、銭谷慕子、蘇原映誠、頼建光、佐々木成、内田 信一
  • 学会等名: 第58回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋 名古屋国際会議場
  • 年月日: 2015-06-05 – 2015-06-07
• [学会発表] Phosphorylation of KLHL3 in the Kelch-Repeat Regulates Its Binding Ability to WNK4 (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshizaki Y, Sohara E, Mori T, Mori Y, Wakabayashi M, Rai T, Sasaki S, Uchida S
  • 学会等名: American Society of Nephrology Kidney Week 2014
  • 発表場所: Philadelphia USA
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-15
• [学会発表] p62-Mediated Selective Autophagy Is Involved in KLHL3-Dependent WNK4 Degradation (2014)
  • 著者名/発表者名: Mori Y, Wakabayashi M, Takayasu Mori T, Zeniya M, Sohara E, Rai T, Sasaki S, Uchida S
  • 学会等名: American Society of Nephrology Kidney Week 2014
  • 発表場所: Philadelphia USA
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-15
• [学会発表] p62が関わる選択的オートファジーがKLHL3依存性のWNK4分解機構に関与している (2014)
  • 著者名/発表者名: 森雄太郎、若林麻衣、蘇原映誠、頼建光、内田信一、佐々木成
  • 学会等名: 第57回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 横浜 パシフィコ横浜会議センター
  • 年月日: 2014-07-04 – 2014-07-06
• [図書] Annual Review循環器2014巻 (2014)
  • 著者名/発表者名: 若林麻衣、内田信一
  • 総ページ数: 9
  • 出版者: 中外医学社