網膜スライスパッチクランプ法によるChR発現神経節細胞の機能解析

• 研究課題/領域番号: 26861432
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 東北大学 (2015); 岩手大学 (2014)
• 研究代表者: 村山 奈美枝 東北大学, 大学病院, 産学官連携研究員 (60597516)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 眼生理 / パッチクランプ

研究成果の概要

チャネルロドプシンは、視機能再建のツールとして研究されているが、網膜神経伝達機構に関する研究はまだ少ない。本研究は、ラットの網膜の個々の細胞の反応についてスライス標本を用いて電気生理学的に検討することを目的とした。
スライス標本作製プロトコールを決定し、細胞直視下で行うスライスパッチクランプ実験系を確立した。ON型双極細胞に特異的に発現するアデノ随伴ウイルスベクター(AAV-mGluR6-ChR2V)を作製し、ON型双極細胞への発現を確認することができたが、導入効率が低く、スライス標本でのパッチクランプは困難であった。今後は、網膜伸展標本用いた手法により検討する必要があると考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Restoration of the majority of the visual spectrum by using modified Volvox channelrhodopsin-1. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita H,Sugano E,Murayama N,Ozaki T,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M.
  • 雑誌名: Mol Ther. 巻: 22(8) ページ: 1434-1440
  • NAID: 120007179833
  • 査読あり
• [学会発表] Application optogenetic technologies to restore vision in genetically blind rats (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita H,Sugano E,Murayama N,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M.
  • 学会等名: ライフエンジニアリングシンポジウム2014（招待講演）
  • 発表場所: 金沢大学鶴間キャンパス（金沢）
  • 年月日: 2014-09-18 – 2014-09-19
  • 招待講演
• [学会発表] 改変型チャネルロドプシン遺伝子を導入したラットの視機能評価 (2014)
  • 著者名/発表者名: 西山史朗、冨田浩史、菅野江里子、村山奈美枝、尾崎拓、田端希多子、髙橋麻紀、斎藤建彦、玉井信
  • 学会等名: 日本動物学会第85回大会
  • 発表場所: 東北大学川内北キャンパス（仙台）
  • 年月日: 2014-09-13
• [学会発表] アデノ随伴ウイルスの感染効率を左右する因子の検索 (2014)
  • 著者名/発表者名: 苫米地一駿、菅野江里子、村山奈美枝、髙橋麻紀、田端希多子、冨田浩史
  • 学会等名: 日本動物学会第85回大会
  • 発表場所: 東北大学川内北キャンパス（仙台）
  • 年月日: 2014-09-13
• [学会発表] Gene therapy using channelrhodopsins for restoring vision (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita H,Sugano E,Murayama N,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M.
  • 学会等名: 第37回日本神経科学学会（招待講演）
  • 発表場所: パシフィコ横浜（Yokohama）
  • 年月日: 2014-09-11 – 2014-09-13
  • 招待講演
• [学会発表] RESTORATION OF THE MAJORITY OF THE VISUAL SPECTRUM IN RCS RATS USING AAV-MEDIATED MODIFIED VOLVOX CHANNELRHODOPSIN-1 GENE TRANSFER (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita H,Sugano E,Murayama N,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M.
  • 学会等名: International Society for Eye Research（招待講演）
  • 発表場所: Hyatt Regency San Francisco(San Francisco, U.S)
  • 年月日: 2014-07-20 – 2014-07-24
  • 招待講演
• [学会発表] VISUAL PROPERTIES OF RCS RATS TRANSDUCED WITH MODIFIED VOLVOX CHANNELRHODOPSIN-1 (2014)
  • 著者名/発表者名: Sugano E,Murayama N,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M,Tomita H.
  • 学会等名: International Society for Eye Research
  • 発表場所: Hyatt Regency San Francisco(San Francisco, U.S)
  • 年月日: 2014-07-20 – 2014-07-24
• [学会発表] アデノ随伴ウイルスの感染効率を左右する因子の検索 (2014)
  • 著者名/発表者名: 苫米地一駿、菅野江里子、村山奈美枝、髙橋麻紀、田端希多子、冨田浩史
  • 学会等名: 平成26年度日本動物学会東北支部大会
  • 発表場所: 岩手大学（盛岡）
  • 年月日: 2014-07-12 – 2014-07-13
• [学会発表] 行動解析による視覚機能評価法の確立 (2014)
  • 著者名/発表者名: 西山史朗、冨田浩史、菅野江里子、村山奈美枝、尾崎拓、田端希多子、髙橋麻紀、斎藤建彦、玉井信
  • 学会等名: 平成26年度日本動物学会東北支部大会
  • 発表場所: 岩手大学（盛岡）
  • 年月日: 2014-07-12 – 2014-07-13
• [学会発表] チャネルロドプシン遺伝子導入による視機能再建 (2014)
  • 著者名/発表者名: 冨田浩史、菅野江里子、村山奈美枝、田端希多子、髙橋麻紀、斎藤建彦、西山史朗、玉井信
  • 学会等名: 第118回 日本眼科学会（招待講演）
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（東京）
  • 年月日: 2014-04-02 – 2014-04-06
  • 招待講演
• [学会発表] Application of optogenetic technologies to vision -Restoring vision to patients with blindness- (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita H,Sugano E,Murayama N,Nishiyama F,Tabata K,Takahashi M,Saito T,Tamai M.
  • 学会等名: World Ophthalmology Congress（招待講演）
  • 発表場所: 東京国際フォーラム（Tokyo）
  • 年月日: 2014-04-02 – 2014-04-06
  • 招待講演