CRISPITT法によるオーダーメイド型免疫系ヒト化NOGマウスの開発

• 研究課題/領域番号: 26870077
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 統合動物科学; 実験動物学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 水野 聖哉 筑波大学, 医学医療系, 助教 (10633141)
• 研究協力者: 杉山 文博 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90226481) ; 高橋 武司 実験動物中央研究所, 免疫研究室, 室長 (80335215) ; 飯島 沙織 ; ディン・ティ・ホン・チャ
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2015年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: ゲノム編集 / 受精卵ゲノム編集 / マウスリソース開発 / ヒト化マウス

研究成果の概要

ゲノム編集技術は目的の変異をもつマウスを迅速かつ簡便に作製できる。特にCRISPR/Cas9システムは受精卵にsingle guide RNAとCas9を導入するだけで、目的遺伝子座に変異を導入することができるために、大きな注目を集めている。更に、single guide RNA、Cas9とともに切断部位近傍と相同な配列に間に導入したい遺伝子を配置したドナーDNAを導入するとノックインマウスが作製できる。このノックインマウスは、様々なヒト疾患の大変有用なモデル動物となり得る。
本研究では、ノックインの導入効率を上げ、ヒト遺伝子を有する優れたモデルマウス等を作出することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] SHISA6 Confers Resistance to Differentiation-Promoting Wnt/β-Catenin Signaling in Mouse Spermatogenic Stem Cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Tokue M, Ikami K, Mizuno S, Takagi C, Miyagi A, Takada R, Noda C, Kitadate Y, Hara K, Mizuguchi H, Sato T, Taketo MM, Sugiyama F, Ogawa T, Kobayashi S, Ueno N, Takahashi S, Takada S, Yoshida S.
  • 雑誌名: Stem Cell Reports. 巻: 8 号: 3 ページ: 561-575
  • DOI: 10.1016/j.stemcr.2017.01.006
  • NAID: 120005997826
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Forward-genetics analysis of sleep in randomly mutagenized mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Funato H and Yanagisawa M et al.
  • 雑誌名: Nature 巻: 539(7629) 号: 46 ページ: 378-383
  • DOI: 10.1038/nature20142
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hyperlipidemia and hepatitis in liver-specific CREB3L3 knockout mice generated using a one-step CRISPR/Cas9 system. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Y, Oikawa F, Ohno H, Yagishita Y, Satoh A, Osaki Y, Takei K, Kikuchi T, Song-iee H, Mizuno S. Matsuzaka T, Iwasaki H, Kobayashi K, Yatoh S, Yahagi N, Suzuki H, Sone H, Takahashi S, Yamada N, Shimano H.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 6 号: 1 ページ: 27857-27857
  • DOI: 10.1038/srep27857
  • NAID: 120007135376
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Generation of CRISPR/Cas9-mediated bicistronic knock-in <i>ins1-cre</i> driver mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshikazu Hasegawa, Yoshikazu Hoshino, Abdelaziz E. Ibrahim, Kanako Kato, Yoko Daitoku1, Yoko Tanimoto, Yoshihisa Ikeda, Hisashi Oishi, Satoru Takahashi, Atsushi Yoshiki, Ken-ichi Yagami, Hiroyoshi Iseki, Seiya Mizuno, Fumihiro Sugiyama
  • 雑誌名: Experimental Animals 巻: 65 号: 3 ページ: 319-327
  • DOI: 10.1538/expanim.16-0016
  • NAID: 130006882371
  • ISSN: 0007-5124, 1341-1357, 1881-7122
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Lineage-affiliated transcription factors bind the Gata3 Tce1 enhancer to mediate lineage-specific programs. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakie Ohmura, Seiya Mizuno, Hisashi Oishi, Chia-Jui Ku, Mary Hermann, Tomonori Hosoya, Satoru Takahashi, James Douglas Engel
  • 雑誌名: the journal of clinical investigation 巻: 126 号: 3 ページ: 865-878
  • DOI: 10.1172/jci83894
  • NAID: 120007129597
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Peri-implantation lethality in mice carrying megabase-scale deletion on 5qc3.3 is caused by Exoc1 null mutation (2015)
  • 著者名/発表者名: Seiya Mizuno, Kohei Takami, Yoko Daitoku, Yoko Tanimoto, Tra Thi Huong Dinh, Saori Mizuno-Iijima, Yoshikazu Hasegawa, Satoru Takahashi, Fumihiro Sugiyama, Ken-ichi Yagami
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 5 号: 1 ページ: 13632-13632
  • DOI: 10.1038/srep13632
  • NAID: 120007136187
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Simple generation of albino C57BL/6J mice with G291T mutation in the tyrosinase gene by the CRISPR/Cas9 system. (2014)
  • 著者名/発表者名: Mizuno S, Dinh TT, Kato K, Mizuno-Iijima S, Tanimoto Y, Daitoku Y, Hoshino Y, Ikawa M, Takahashi S, Sugiyama F, Yagami KI.
  • 雑誌名: Mamm Genome. 巻: 25 号: 7-8 ページ: 327-34
  • DOI: 10.1007/s00335-014-9524-0
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] CRISPR/Cas9システムを用いた多様な遺伝子改変マウス作製の実際 (2016)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉、高橋智、杉山文博
  • 学会等名: 生化学会大会
  • 発表場所: 宮城県仙台市.仙台国際センター
  • 年月日: 2016-09-25
  • 招待講演
• [学会発表] 順・逆遺伝学的手法を駆使した変異マウスの異常形質原因遺伝子の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉
  • 学会等名: 日本実験動物学会
  • 発表場所: 神奈川県川崎市.ミューザ川崎シンフォニーホール
  • 年月日: 2016-05-18
• [学会発表] CRISPR/Casを用いたマウスゲノム編集の実際 (2016)
  • 著者名/発表者名: 水野 聖哉、高橋 智、杉山 文博、八神 健一
  • 学会等名: 第121回日本解剖学会総会全国学術集会
  • 発表場所: ビッグパレットふくしま
  • 年月日: 2016-03-28
  • 招待講演
• [学会発表] Applied Genome Editing with CRISPR/Cas9 Plasmid in Mice (2015)
  • 著者名/発表者名: Seiya Mizuno, Kanako Kato, Saori Iijima, Yuko Hamada, Tra Dinh Thi Huong, Yoshikazu Hoshino, Yoko Tanimoto, Satoru Takahashi, Fumihiro Sugiyama, Ken-ichi Yagami
  • 学会等名: トランスポゾン転移とゲノム編集技術に関する国際会議2015
  • 発表場所: 奈良県新公会堂
  • 年月日: 2015-11-17
  • 国際学会
• [学会発表] ゲノム編集による遺伝子改変動物の作製の実際 (2015)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉
  • 学会等名: 第１７回ＲＥＧ部会講演会
  • 発表場所: 東京都健康長寿医療センター
  • 年月日: 2015-11-14
  • 招待講演
• [学会発表] 早期胚発生致死を示すWS変異マウスにおける原因遺伝子の同定 (2015)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉、高見幸平、飯島沙織、加藤花名子、大徳陽子、谷本陽子、杉山文博、八神健一
  • 学会等名: 実験動物学会
  • 発表場所: 京都テルサ
  • 年月日: 2015-05-28
• [学会発表] Applied Genome Efiting with CRISPR/Cas9 Plasmid in Mice (2014)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉・加藤花名子・飯島沙織・Dinh Thi Huong Tra・谷本陽子・大徳陽子・石田みゆき・高橋智・杉山文博・八神健一
  • 学会等名: 28th International Mammalian Genome Conference
  • 発表場所: アメリカメイン州
  • 年月日: 2014-10-26 – 2014-10-29
• [学会発表] Generation of gene-modified mice with CRISPR/Cas9 system (2014)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉
  • 学会等名: The 11th Annual Conference of Chinese Association for Laboratory Animal Science (CALAS)
  • 発表場所: 中国重慶
  • 年月日: 2014-06-25 – 2014-06-27
  • 招待講演
• [学会発表] CRISPR/Cas9プラスミドを介したマウスゲノム編集の応用 (2014)
  • 著者名/発表者名: 水野聖哉・加藤花名子・飯島沙織・Dinh Thi Huong Tra・谷本陽子・大徳陽子・石田みゆき・依馬正次・伊川正人・高橋智・杉山文博・八神健一
  • 学会等名: 第61回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 北海道札幌市
  • 年月日: 2014-05-15 – 2014-05-17
• [備考] 筑波大学実験動物学研究室
  • URL: http://www.md.tsukuba.ac.jp/basic-med/lab-animal/
• [備考] 筑波大学実験動物学研究室ホームページ
  • URL: http://www.md.tsukuba.ac.jp/basic-med/lab-animal/