異種移植における超急性拒絶反応を抑制する遺伝子ダブルノックアウトブタの開発

• 研究課題/領域番号: 26870630
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 外科学一般; 統合動物科学
• 研究機関: 明治大学
• 研究代表者: 松成 ひとみ 明治大学, 研究・知財戦略機構, 特任講師 (70639517)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2015年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円); 2014年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 異種移植 / ブタ / ゲノム編集 / 体細胞核移植 / 臓器移植 / 遺伝子ノックアウト / 移植・再生医療 / トランスレーショナルリサーチ

研究成果の概要

絶対的なドナー臓器不足を解決する一つとして，ブタ臓器を用いる異種移植が提唱されている。異種移植では，免疫拒絶の克服が必須である。最初に起こる超急性拒絶の引き金としてαGal抗原があるが，我々はこの抗原を持たないGalTノックアウト(KO)ブタを作出している。本研究では，GalT-KOブタを基盤に，超急性拒絶の別要因とされるH-D抗原を除去したCMAH遺伝子KOブタの作出を目的とした。ゲノム編集技術を用いてCMAH遺伝子をKOした細胞の体細胞核移植を行い，クローン産仔を作出した。主要組織において抗原糖鎖の消失が確認できた。本研究により国内初のGalT/CMAH両遺伝子KOブタの作出に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of α1,3-galactosyltransferase and cytidine monophospho-<i>N</i>-acetylneuraminic acid hydroxylase gene double-knockout pigs (2015)
  • 著者名/発表者名: Miyagawa S, Matsunari H, Watanabe M, Nakano K, Umeyama K, Sakai R, Takayanagi S, Takeishi T, Fukuda T, Yashima S, Maeda A, Eguchi H, Okuyama H, Nagaya M, Nagashima H.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 61 号: 5 ページ: 449-457
  • DOI: 10.1262/jrd.2015-058
  • NAID: 130005104116
  • ISSN: 0916-8818, 1348-4400
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] Production of alpha 1,3-galactosyltransferase and cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase gene double-knockout pigs by genome editing and somatic cell cloning (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsunari H, Watanabe M, Nakano K, Uchikura A, Asano Y, Hatae S, Takeishi T, Yashima S, Fukuda T, Sakai S, Umeyama K, Nagaya M, Maeda A, Eguchi H, Okuyama H, Miyagawa S, Nagashima H.
  • 学会等名: 2015 IPITA・IXA・CTS JOINT CONGRESS
  • 発表場所: Melbourne, Australia
  • 年月日: 2015-11-15
  • 国際学会
• [学会発表] α-ガラクトシル抗原およびH-D抗原を発現しない遺伝子ノックアウトブタの作出 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松成ひとみ，渡邊將人，中野和明，内倉鮎子，浅野吉則，武石透輝，福田暢，八島紗耶香，梅山一大，高柳就子，坂井理恵子，前田晃，江口寛，奥山宏臣，宮川周士，長嶋比呂志
  • 学会等名: 第17回日本異種移植研究会
  • 発表場所: 自治医科大学(栃木県・下野市)
  • 年月日: 2015-03-14
• [学会発表] Production efficiency of gene knockout pigs using genome editing and somatic cell cloning (2015)
  • 著者名/発表者名: Hitomi Matsunari, Masahito Watanabe, Kazuaki Nakano, Ayuko Uchikura, Yoshinori Asano, Shota Hatae, Toki Takeishi, Kazuhiro Umeyama, Masaki Nagaya, Shuji Miyagawa, Yutaka Hanazono, Hiromitsu Nakauchi, Hiroshi Nagashima
  • 学会等名: 41st Annual Conference of the International Embryo Transfer Society
  • 発表場所: Versailles (France)
  • 年月日: 2015-01-12
• [備考] 明治大学バイオリソース研究国際インスティテュート
  • URL: http://muiibr.com
• [備考] 明治大学バイオリソース研究国債インスティテュート(MUIIBR)
  • URL: http://muiibr.com