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ヒト培養肝実質細胞の肝炎診断・肝炎ワクチン・肝臓薬開発への応用

研究課題

研究課題/領域番号 59870013
研究種目

試験研究

配分区分補助金
研究分野 病態医化学
研究機関徳島大学

研究代表者

中村 敏一  徳島大, 医学部, 助教授 (00049397)

研究分担者 野田 千征子  徳島大学, 医学部, 講師 (40035506)
町川 房市  大塚アッセイ研究所, 研究員
寺本 英雄  大塚アッセイ研究所, 研究員
中嶋 克行  大塚アッセイ研究所, 所長 (10444051)
冨田 優美子  徳島大学, 医学部, 教務員 (00089913)
TERAMOTO Hideo  
MATCHIKAWA Fusaichi  
研究期間 (年度) 1984 – 1986
研究課題ステータス 完了 (1986年度)
配分額 *注記
9,600千円 (直接経費: 9,600千円)
1986年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
1985年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1984年度: 6,300千円 (直接経費: 6,300千円)
キーワードヒト初代 / 養肝細胞 / 肝炎ウイルス / 非A非B型肝炎ウイルス / 肝臓薬 / 肝再生 / 人工肝臓 / 毒性研究 / ヒト初代培養肝細胞 / 肝炎 / 肝炎ウィルス / ヒト肝細胞 / 初代培養 / ワクチン
研究概要

初代培養肝細胞はin vivo肝臓の示す多種多様な肝特異機能と高いホルモン応答能を発現維持するミニ肝臓とも呼べる優れたin vitro実験系である。ラット肝細胞について四塩化炭素によるin vitro実験肝炎を作製し、この系を用いて肝炎治療薬の簡便で正確なスクリーニングができることを明らかにした。また、この系によって従来in vivoレベル(臨床レベル)で抗肝炎効果が確認されているグリチルリチンやグルココルチコイドがin vitroでも証明され、これら抗肝炎剤は直接肝細胞に作用して肝炎を抑制することが明らかになった。そこで、直接ヒト肝細胞への肝炎ウイルスや肝臓薬の作用を研究したり臨床上有効な新薬開発上ぜひとも必要なヒト初代培養肝細胞系の確立をめざした。その結果、コラゲナーゼ消化とデスパーゼ消化の2段階消化法によってバイオプシによる少量肝組織からも元気のよいヒト肝実質細胞が高収率で分離できるようになった。分離成人肝細胞はラットの場合と同様にして初代単層培養することができる。ヒト初代培養肝細胞は肝臓毒検出のためのスクリーニング系として、肝臓薬開発のためのスクリーニング系、肝炎診断への応用のみならず、肝炎ウイルスのin vitro感染系としての利用、さらにはワクチン生産から人工肝臓に至るまで広範囲の応用が可能である。また、大変困難と考えられていたin vitroでのヒト肝細胞の増殖にも成功し、バイオプシによる少量肝組織から得られたヒト肝細胞を増殖させ、上記多目的に適応可能な道が開かれた。さらに、ヒト肝細胞のin vitro増殖系は近い将来に、この肝細胞を用いたハイブリド型人工肝臓が実用化される可能性をも示唆している。

報告書

(3件)
  • 1986 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1985 実績報告書
  • 研究成果

    (94件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (94件)

  • [文献書誌] Noda,C;Tomomura,M;Nakamura,T.;Ichihara,A.: J.Biochem.95. 37-45 (1984)

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  • [文献書誌] Asami,O;Nakamura,T;Mura,T.;Ichihara,A.: J.Biochem.95. 299-309 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T;Kato,S;Ichihara,A: J.Biochem.95. 1691-1696 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T;Tomomura,A;Kato,S;Noda,C.;Ichihara,A.: J.Biochem.96. 127-136 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T;Nakayama,Y.;Ichihara,A.: J.Biol.Chem.259. 8056-8058 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Asami,O;Tanaka,K.;Ichihara,A.: Exp.Cell Res.155. 81-91 (1984)

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  • [文献書誌] Noda,C.;Shinjyo,F.;Tomomura,A.;Kato,S.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: J.Biol.Chem.259. 7747-7754 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Nakayama,Y.;Teramoto,H.;Nawa,K.;Ichihara,A.: Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81. 6398-6402 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Teramoto,H.;Tomita,Y.;Ichihara.A.: Biochem.Biophys.Res.122. 884-891 (1984)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Nawa,K.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Res.Commun.122. 1450-1459 (1984)

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  • [文献書誌] Tanaka,K.;Nakamura,T.;Ichihara,A.;eds E.A.Khairallah,J.S.Bond;J.W.C.Bird: "Symposium on Intracellular Protein Catabolism". 261-263 (1985)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Ichinara,A.;eds Murakami,H.;Yamane,I.;Hayashi,I.;Mather,J.P.;Barnes,D.B.;Sato,G.H: "Growth and Differentiation of Cells in Defined Environment". 19-24 (1985)

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  • [文献書誌] Nakamura,T;Ichihara,A.: Cell Str.Func.10. 1-16 (1985)

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  • [文献書誌] Ichihara,A.;Nakamura,T.;Noda,C.;Tanaka,K.;eds Guillouzo,A.;Guduen-Guillouzo,C.: "Isolated and Cultured Hepatocytes". (1985)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Fujii,T.;Ichihara,A.: Cell Biol.Toxicol.1. 285-295 (1985)

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  • [文献書誌] Noda,C.;Tomomura,M.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Res.Commun.132. 232-239 (1985)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Tomita,Y.;Hirai,R.;Yamaoka,K.;Kaji,K.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Res.Commun.133. 1042-1050 (1985)

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  • [文献書誌] Tanaka,K.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: J.Biol.Chem.291. 2610-2615 (1986)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Teramoto,H.;Tomita,Y.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Res.Commun.134. 755-763 (1985)

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  • [文献書誌] Nagao,M.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Acta.863. 179-186 (1986)

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  • [文献書誌] Moor,M.A.;Nakamura,T.;Ito,N.;Ichihara,A.: Gann.(1986)

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  • [文献書誌] Moor,M.A.;Nakamura,T.;Ichihara,A.;Ito,N.: Carcinogenesis.7. 1393-1396 (1986)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Teramoto,H.;Ichihara,A.: Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.83. 6489-6493 (1986)

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  • [文献書誌] Shiota,K.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: Intern.13. 893-901 (1986)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Kitazawa,T.;Ichihara,A.: Biochem.Biophys.Res.Commun.141. 176-184 (1986)

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  • [文献書誌] Nawa,K.;Nakamura,T.;Kumatori,A.;Noda,C.;Ichihara,A.: J.Biol.Chem.261. 816883-1688 (1986)

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  • [文献書誌] Moor,M.A.;Nakamura,T.;Ito,N.: Carcinogenesis.7. 1419-1424 (1986)

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  • [文献書誌] Ichihara,A.;Nakamura,T.;Noda,C.;Tanaka,K.;eds.Guillouzo,A.;Gugen-Guilloulo.C.: "Isolated and Cultured Hepatocytes". (1986)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Niimi,S.;Nawa,K.;Noda,C.et el.: J.Biol.Chem.262. 727-733 (1987)

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  • [文献書誌] Nakamura,T.;Nagao,M.;Ichihara,A.: Exp.Cell Res.in press.(1987)

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  • [文献書誌] Takai,S.;Nakamura,T.;Takehara,H.;Komi,N;Ichihara,A.: Gastroenterology.(1987)

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  • [文献書誌] Noda,C.;Yakiyama,M.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: J.Biol.Chem.(1987)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shimaoka,S.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: Exp.Cell.Res.(1987)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiota,K.;Nakamura,T.;Ichihara,A.: J.Cell.Physiol.(1987)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Noda,C.,Tomomura,M.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Hormonal control of serine dehydratase mRNA in primary cultures of adult rat hepatocytes." J. Biochem.95. 37-45 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Asami,O.,Nakamura,T.,Mura,T. and Ichihara,A.: "Identification of trypsin inhibitor in bovine pituitary extracts as a survival factor for adult rat hepatocytes in primary culture." J. Biochem.95. 299-309 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Kato,S. and Ichihara,A.: "Glucagon and glucose as major regulators of glycogen metabolism in primary cultured rat hepatocytes." J. Biochem.95. 1691-1696 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Tomomura,A.,Kato,S.,Noda,C. and Ichihara,A.: "Reciprocal expressions of alpha-and beta-adrenergic receptors, but constant expression of glucagon receptor by rat hepatocytes during development and primary culture." J. Biochem.96. 127-136 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Nakayama,Y. and Ichihara,A.: "Reciprocal modulation of growth and liver functions of mature rat hepatocytes in primary culture by an extract of hepatic plasma membranes." J. Biol. Chem.259. 8056-8058 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Asami,O.,Tanaka,K. and Ichihara,A.: "Increased survival of rat hepatocytes in serum-free medium by inhibition of a trypsin-like protease asscciated with their plasma membranes." Exp. Cell Res.155. 81-91 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Noda,C., Shinjyo,F.,Tomomura,A.,Kato,S.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Mechanism of heterologous desensitization of the adenylate cyclase system by glucagon in primary cultures of adult rat hepatocytes." J. Biol. Chem.259. 7747-7754 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,nakayama,Y.,Teramoto,H.,Nawa,K. and Ichihara, A.: "Loss of reciprocal modulations of growth and liver function of helatoma cells in culture by contact with cells and cell membranes." Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.81. 6398-6402 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Teramoto,H.,Tomita,Y. and Ichihara,A.: "L-Proline is an essential amino acid for hepatocyte growth in culture." Biochem. Biophys. Res. Commun.122. 884-891 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Nawa,K. and Ichihara,A.: "Partial purification and characterization of hepatocyte growth factor from serum of hepatectomized rats." Biochem. Biophys. Res. Commun.122. 1450-1459 (1984)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tanaka,K.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "A novel trypsin-like endoprotease associated with plasma membranes of rat liver and related with the survival of hepatocytes in primary culture." "Symposium on Intracellular Protein Catabolism"(eds E.A.Khairallan,J.S.Bond, and J.W.C.Bird). 261-263 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Reciprocal modulation of growth and differentiated functions of mature rat hepatocytes in primary culture by cell membranes (cell surface modulator), serum growth factor and liver collagen." "Growth and Differentiation of Cells in Defined Environment"(eds Murakami,H.,Yamane,I., Hayashi,I.,Mather,J.P.,Barnes,D.B. and Sato,G.H.). 19-24 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Control of growth and expression of differentiated functions of mature hepatocytes in primary culture." Cell Str. Func.10. 1-16 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ichihara,A.,Nakamura,T.,Noda,C. and Tanaka,K.: "Control of enzyme expression deduced from studies on primary cultures of hepatocytes." Isolated and Cultured hepatocytes (eds Guillouzo,A. and Guguen-Guillouzo,C.). (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Fujii,T. and Ichihara,A.: "Enzyme leakage due to change of membrane permeability of primary cultured rat hepatocytes treated with various hepatotoxine and its prevention by glycyrrhizin." Cell Biol. Toxicol.1. 285-295 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Noda,C.,Tomomura,M.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Molecular cloning of DNA complementary to mRNA of rat liver serine dehydratase." Biochem. Biophys. Res. Commun.132. 232-239 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Tomita,Y.,Hirai,R.,Yamaoka,K.,Kaji,K. and Ichihara,A.: "Inhibitory effect of transforming growth factor- <beta> on DNA synthesis of adult rat hepatocytes in primary culture." Biochem. Biophys. Res. Commun.133. 1042-1050 (1985)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tanaka,K.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "A unique trypsin-like protease associated with plasma membranes of rat liver : Purification and characterization." J. Biol. Chem.261. 2610-2615 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Teramoto,H.,Tomita,Y. and Ichihara,A.: "Two types of growth inhibitor in rat platelets for primary cultured rat hepatocytes." Biochem. Biophys. Res. Commun.134. 755-763 (1986)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagao,M.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Developmental control of gene expression of tryptophan 2,3-dicxygenase in neonatal rat liver." Biochem. Biophys. Acta.863. 179-186 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moor,M.A.,Nakamura,T.,Ito,Ito,N. and Ichihara,A.: "Immunochemical identification of glucose-6-phosphate dehydrogenase in putative preneoplastic lesions of rat liver and pancreas." Gann.(1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moor,M.A.,Nakamura,T.,Ichihara,A. and Ito,N.: "Immunohistochemically demonstrated suppressed expression of tryptophan oxygenase, a marker for a liver differentiation, within putative preneoplastic rat liver legions." Carcinogenesis.7. 1393-1397 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,Teramoto,H. and Ichihara,A.: "Purification and characterization of a growth factor from rat platelets for mature parenchymal hepatocytes in primary cultures." Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.83. 6489-6493 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shiota,K.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Distinct effects of transforming growth factor- <beta> on EGF receptors and EGF-induced DNA synthesis in primary cultured rat hepatocytes." Biochem. Intern.13. 893-901 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,T.,kitazawa,T. and Ichihara,A.: "Partial purification and characterization of masking protein for <beta> -type transforming growth factor from rat platelets." Biochem. Biophys. Res. Commun.141. 176-184 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nawa,K.,Nakamura,T.,Kumatori,A.,Noda,C. and Ichihara,A.: "Glucocorticoid-dependent expression of albumin gene in adult rat hepatocytes." J. Biol. Chem.261. 16883-16888 (1986)

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      1986 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moor,M.A.,Nakamura,T. and Ito,N.: "Immunohistochemically demonstrated glucose-6-phosphate dehydrogenase, gammaglutamyl transpeptidase, ornithine decarboxylase and glutathione S-transferase enzymes : Absence of direct correlation with cell proliferation in rat liver putative preneoplasti lesions." Carcinogenesis.7. 1419-1429 (1986)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1986 研究成果報告書概要
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  • [文献書誌] Nakamura,T.,Niimi,S.,Nawa,K.,Noda,C. et al: "Multihormonal regulation of transcription of the tryptophan 2,3-dicxygenase gene in primary cultures of adult rat hepatocytes with special reference of a transcriptional protein mediating the action of glucocorticoids." J. Biol. Chem.262. 727-733 (1987)

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  • [文献書誌] Nakamura,T., Nagao,M. and Ichihara,A.: "In vitro induction of terminal differentiation of neonatal rat hepatocytes by direct contact with adult rat hepatocytes." Exp. Cell Res.(1987)

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  • [文献書誌] Shiota,K.,Nakamura,T. and Ichihara,A.: "Mode of inhibition by <beta> -type transforming growth factor of growth of adult rat hepatocytes in primary culture." J. Cell Physiol.(1987)

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公開日: 1987-03-31   更新日: 2017-03-27  

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