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カルパスタチンの細胞内プロテオリシス制御機構

研究課題

研究課題/領域番号 60440031
研究種目

一般研究(A)

配分区分補助金
研究分野 医化学一般
研究機関京都大学

研究代表者

村地 孝  京都大学, 医学部, 教授 (10089104)

研究分担者 田中 春高  京都大学, ウイルス研究所, 教授 (10027310)
神奈木 玲児  京都大学, 医学部, 講師 (80161389)
研究期間 (年度) 1985 – 1987
研究課題ステータス 完了 (1987年度)
配分額 *注記
22,700千円 (直接経費: 22,700千円)
1987年度: 2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
1986年度: 3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
1985年度: 16,000千円 (直接経費: 16,000千円)
キーワードカルパスタチン / 阻害ドメイン / カルパイン / プロテオリシス / 細胞内プロティナーゼ / 繰返しドメイン構造 / 脳下垂体前葉 / ACTH産生細胞 / 細胞内プロテイナーゼ / カルモデュリン様蛋白質
研究概要

カルパスタチンはカルパイン(カルシウムイオン依存性システインプロテイナーゼ)の特異的内因性インヒビターであって, カルパインとカルパスタチンは両者で1つの生体内制御系を形成しているものと考えられる. 昭和60年・61年・62年度における本研究にあっては, 特にカルパスタチンの細胞内における機能の解明に注目しつつ, カルパインとカルパスタチンに関する生化学的研究を広範に行い, 次のような成果を得た.
(1)カルパイン及びカルパスタチンに対する特異抗体を作製し, これを用いて動物各組織における両因子の分布を詳細に研究した. 特にカルパスタチンについては, ヒト脳下垂体において, その前葉のACTH産生細胞に局在していることが明らかになった.
(2)カルパスタチンの2つの分子種(ゲル電気泳動的に68KDaと107KDaのもの)をそれぞれ精製し, そのアミノ酸組成, 等電点, 免疫学的交叉性を調べたところ. 両者は極めて類似の分子であることが知られた. また, カルパイン阻害活性の比較から, カルパスタチン分子には約14KDaの阻害ドメインの繰り返し構造があることを推定した.
(3)カルパスタチンに対するCDNAクローニングを行い, そのヌクレオチド配列を決定することによって, カルパスタチン蛋白質の一次構造を明らかにした. これによって, 先に推定された繰り返しドメイン構造の実在が証明された.
(4)カルパスタチンの単位ドメインに対するCDNAを大腸菌で発現させることにより得られたペプチドが, カルパイン阻害活性を有することを明からにした. このようなドメインへの分節化が細胞内においても起こるかどうかは, 今回の研究では明らかにすることができなかった.

報告書

(3件)
  • 1987 研究成果報告書概要
  • 1986 実績報告書
  • 1985 実績報告書
  • 研究成果

    (21件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (21件)

  • [文献書誌] Murachi,T.: Transactions of the Biochemical Society. 13. 1015-1018 (1985)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takano,E.: Biochemical Journal. 235. 97-102 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Maki,M.: Biochemical and Biophysical Research Communications. 143. 300-308 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Maki,M.: FEBS Letters. 223. 174-180 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kannagi,R.: Haemastaseologie. 7. 151-157 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kannagi,R.: "Proposal of the double regulation mechanism for the action of calpain. In ″cysteine Proteinases and Their Inhibitors″ (Turk, V.,ed.)" Walter de Gruyter, Berlin, PP339-357 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Murachi, T.: "The proteolytic system involving calpains" Transactions of the Biochemical Society. 13. 1015-1018 (1985)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takano, E.: "Two different molecular species of porcine calpastatin: Structural and functional relationship between 107-kDa and 68-kDa molecules" Biochemical Journal. 235. 97-102 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Maki, M.: "Repetitive region of calpastatin is a functional unit of the proteinase inhibitor" Biochemical and Biophusical Research Communications. 143. 300-308 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Maki, M.: "All of the four internally repetitive domains of pig calpastatin possess inhibitory activities against calpains I and II" FEBS Letters. 223. 174-180 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kannagi, R.: "Calpain und Calpastatin in Menschlichen Blutplaetchen" Haemastaseologie. 7. 151-157 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kannagi, R.: Proposal of the double regulation mechanism for the action of calpain. In "Cysteine Proteinases and Their Inhibitor" (Turk, V., ed.). Walter de Gruyter, Berlin, 339-357 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] TAKANO,Emiko: Biochemical Journal. 235. 97-102 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] KITAHARA,Aiko: Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 63. 343-348 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] TAKANO,Emiko: FEBS Letter. 208. 199-202 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] KANNAGI,Reiji ed.Turk,V.: ""Cysteine Proteinases and Their Inhibitors,"" Walter de Gruyter,Berlin & New York, 18 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Biochemistry International. 10. .187 (1985)

    • 関連する報告書
      1985 実績報告書
  • [文献書誌] FEBS Letters. 184. .120 (1985)

    • 関連する報告書
      1985 実績報告書
  • [文献書誌] Proceedings of the National Academy of Sciences,U.S.A.82. .6075 (1985)

    • 関連する報告書
      1985 実績報告書
  • [文献書誌] Investigative Ophthalmolgy and Visual Science. 26. .953 (1985)

    • 関連する報告書
      1985 実績報告書
  • [文献書誌] Archives of Biochemistry and Biophysics. 242. .557 (1985)

    • 関連する報告書
      1985 実績報告書

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公開日: 1987-03-31   更新日: 2016-04-21  

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