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SDS類縁体の活用による生体膜蛋白質の可溶化状態の制御そして分子構築の解明

研究課題

研究課題/領域番号 60470157
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 物質生物化学
研究機関大阪大学

研究代表者

高木 俊夫  大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (00029943)

研究分担者 林 雄太郎  杏林大学, 医学部, 講師 (10086556)
研究期間 (年度) 1985 – 1987
研究課題ステータス 完了 (1987年度)
配分額 *注記
4,900千円 (直接経費: 4,900千円)
1987年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1986年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
1985年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
キーワード電気泳動 / 生体膜蛋白質 / 可溶化 / 界面活性剤 / 電気詠動
研究概要

生化学研究において陰イオン性界面活性である, ドデシル硫酸ナトリウムが広範に使用されている. 我々はSDSの周辺の類縁体が持つ特性に注目しそこに新たな可能性を見いだす一連の研究を企画した. 着目したものの一般構造式は:n-C_<12>H_<25>(OCH_2CH_2)mSO^-_3X^+. その結果次の事を明らかにすることが出来た.
(1)m=O, X=リチウム, トリス, トリエタノールアミンあるいはトリイソプロパノールアミンの場合について検討したところ, リチウムはSDSに優る強力な界面活性剤として働き, 後の3種は表記の順序でより穏やかな界面活性剤として働く.
(2)このような一連の界面活性剤の選択使用によって, 階層構造を有する蛋白質分子集合体の構成を解析する新手法を提案できた. 適用例としてホウレン草のチラコイド膜蛋白質の分子構築解析を提示した.
(3)2%のトリス塩を用いることにより, ラットのコラーゲン分子の可溶化そしてクロマトグラフィーによって, それを高次の架橋によって生成する集合体から変性を起こさせずに分離する事に成功した. これは加齢に伴う架橋の形成の解析に有用である.
(4)m=2〜8の類縁体を検討した結果, mが6以上のものと水溶性蛋白質に対して親和性を欠いた. それらは, 非イオン性界面活性剤と同様に膜蛋白質に対して高い親和性を示し, 大量の負電荷を導入する. 従って, これらの存在下において, 電気泳動を実施すると, 生体膜蛋白質を変性させる事なく高率的に分離・分析出来る.
(5)上記の界面活性剤に類似し, 多量に得易い汎溶品としてアルキル基の鎖長そしてナキシエチレン重合度にそれぞれ13そして8を中心に分布があるものが実用品として有用なことを示した. 3年間の成果は, "SDS類縁体の生化学領域における活用"と題した総説にまとめ, 油化学会誌に寄稿した.

報告書

(2件)
  • 1987 研究成果報告書概要
  • 1986 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (14件)

  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Toshio Takagi: Collagen Rel. Res.4. 201-208 (1984)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Tohsio Takagi: J. Biochem.99. 1545-1548 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Tohsio Takagi: Anal. Biochem. 156. 11-16 (1988)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 高木俊夫: 油化学.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo,Nobuo Okabe,Toshio Takagi: "Separation of Cross-linked Products of Rat Tail Tendon Collagen from Monomeric Components by %gel Chromatogtaphy in the Presence of Tris Dodecyl Sulfate at 4゜C" Collagen Rel. Res.5. 149-156 (1985)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo,Toshio Takagi: "Polyacrylamide Gel Electrophoresis in the Presence of Lithium Dodecyl Sulfate -Problems and Merits-" Seikagaku. 57. 117-120 (1985)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo,Toshio Takagi: "Marked Effect of Cations on the Separation of Spinach Thylacoid Chlorophyll-proteins in Polyacrylamide Gel Electrophoresis in the Presence of Alkanolammonium Dodecyl Sulfates" J.Biochem.99. 1545-1548 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo,Toshio Takagi: "Binding of Lithium Dodecyl Sulfate to Polyacrylamide Gel at 4゜C Perturds Electrophoresis of Proteins" Anal.Biochem.156. 11-16 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Misao Koide,Masahiro Fukuda,Kazuo Ohbu,Yasushi Watanabe,Yutaro Hayashi, Toshio Takagi: "Polyacrylamide Gel Electrophoresis of Several Proteins in the Presence of Sodium Oligooxyethylene Dodecyl Ether Sulfates or a Commercially Available Analog" Anal. Biochem.164. 150-155 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Toshio Takagi: Collagen Rel.Res.5. (1985)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Toshio Takagi: J.Biochem.99. 1545-1548 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Kanenobu Kubo;Toshio Takagi: Anal.Biochem.156. 11-16 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Shio Makino;Shigenori Maezawa;Ryuichi Moriyama;Toshio Takagi: Biochem.Biophys.Acta. 874. 216-219 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Misao Koide;Masahiro Fukuda;Kazuo Ohbu;Yasushi Watanabe;Yutaro Hayashi;Toshio Takagi: Anal.Biochem.

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書

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公開日: 1987-03-31   更新日: 2016-04-21  

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