| 研究課題/領域番号 |
60580158
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
代謝生物化学
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| 研究機関 | 大阪医科大学 |
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研究代表者 |
渡邊 恭良 阪医大, 医学部, 講師 (40144399)
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| 研究期間 (年度) |
1985 – 1986
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| 研究課題ステータス |
完了 (1986年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1986年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1985年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
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| キーワード | 中枢神経系 / プロスタグランジン / シクロオキシゲナーゼ / 細胞局在 / 免疫組織化学 |
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| 研究概要 |
牛精のう腺より均一精製したプロスタグランジンエンドパーオキサイド合成酵素(シクロオキシゲナーゼ、PES)のモノクローナル抗体を用いて、牛脳の各部位におけるPESの局在を免疫組織化学的手法で調べてきた。大脳皮質・海馬・尾状核などPES活性の高い部位で、グリア細胞・血管内皮細胞のほか、典型的な神経細胞である錐体細胞などに陽性所見が見られたが、個体間のばらつきが多く、再現性のある結果は得られていない。また、発生・分化に関する局在の検討を行うため、牛胎児の脳より成牛の脳まで固定法の再検討をしたが、組織の保存が余り良くないので良好な結果が得られなかった。これらの結果は、牛の臓器を用いていることで、と殺場より入手する際、死後時間の不定、血液の残存,弾傷の存在など多くの不利な条件が原因となっていると思われる。モノクローナル抗体PES-7とPES-5は、ラットの臓器のPESと反応しないことが判っており、適当な実験動物を捜す必要に迫られた。そこで、今回、サルやヒトの血小板のPESとの交叉性を調べたところ、サルのPESとは交叉するので、サルを用いて、左心室より灌流固定し、血液を除き、免疫組織化学的検索を再試している。また、PESの抗原性が固定により失われるかどうかを固定後のPESのimmunoblotting法や、ガラスビーズに固定することなどにより検討し、パラホルムアルデヒド2%溶液に6時間浸漬することや2.5%グルタルアルデヒド溶液に1〜2時間さらすことでは、抗原性は有意には低下しないことがわかった。
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