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Rh式血液型抗原支配のDNAおよびRNAの解析と法医学的応用

研究課題

研究課題/領域番号 61480176
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 法医学
研究機関信州大学

研究代表者

福島 弘文  信州大学, 医学部, 助教授 (70135218)

研究期間 (年度) 1986 – 1987
研究課題ステータス 完了 (1987年度)
配分額 *注記
6,300千円 (直接経費: 6,300千円)
1987年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1986年度: 5,300千円 (直接経費: 5,300千円)
キーワードDNA分析 / mRNA / Rh抗原 / LW抗原 / RIA / ELISA / クローニング / DNA解析 / Lh抗原
研究概要

我々はすでに^<125>I-proteinAを用いたRIA法は確立しているが, さらにRh抗原を検出するためにアルカリホスファターゼ標識抗体を二次抗体として検討した. 本法はアイソトープを用いないELISAであるため, 遺伝子操作のススリーニングに用いられることが期待される. 今回使用したのは発色度の差からRh抗原のホモ型・ヘテロ型血球の判別に利用した. その結果感度的にはRIAより落ちるがO+血球とD-血球の差が十分に認められ, その他の表現型の差も得られたが, 抗C, 抗E, 抗e, 抗Fyb, 抗Jkb, 血清では判定不可能であった. 家系調査等のために検査資料を直ちに処理出来ない場合がありこれらを一時凍結保存する必要がある. 凍結した資料血液の抗原活性の安定性を検討したところ-80°Cでハギンズ液に保存するとABO式血液型及びRh式血液型抗原活性の長期保存による減少はみられなかった. Rh抗原に関与したmRNAを分離するためにヒト由来の白血病細胞K567を用いてRh抗原の有無を検討した. K567細胞は血液型抗原のi,Iが検出されるがheminによる誘導によって血液抗原P, Kel等が発現される. この細胞にheminを添加し分化した後Rh抗原の発現を前述のRIA法によって検討したところ認められなかった. 従って現在のところ培養細胞での実験が不可能であるため, サルのヒ臓からRNA及びmRNAを分離することを試みた. サルの赤血球にはRh25(LW)抗原がありヒトの抗原活性と比較すると非常に活性が高い. RNAはタンパク変性剤のグアニジンチオシアネート(GTC)を用いる方法によってRNA及びmRNAの精製を試みている. mRNAは3'-末端にpoly(A)を持つものでoligo(dT)-セルロースカラムクロマトグラフィーによりその他のRNAをとりのぞくことが出来現在検討中である.

報告書

(2件)
  • 1987 研究成果報告書概要
  • 1986 実績報告書
  • 研究成果

    (16件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (16件)

  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Comp. Biochem. Physiol. 86B. 303-305 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: J. Forens. Sa. 32. 531-534 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Act. Crim. Japon. 53. 43-46 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Act. Crim. Japon. 53. 244-247 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Naoko Misawa: Act. Crim. Japon. 53. 153-157 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Machie Nishizawa: Act. Crim. Japon. 53. 158-162 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi,Fukushima: "Localization of Rh 1(D),2(C),3(E),4(c),5(E) and 25(LW) antigens of humar Rh blood groups in fetal erythrocyte membranes" Comp. Buichem. Physial.86B. 303-305 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi,Fukushima: "Determination of ABO blood groups by radio immunoassay using 125I-proteinA" J.Forensi.Sci. 32. 531-534 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi,Fukushima: "A radioimmunoassay using 125I-proteinA for the cletermination of red cell Rh blood group antigens, Rn2(C),Rh3(E),Rh4(C) and Bh5(e)." Act. Crim. Japan. 53. 43-46 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi,Fukushima: "Retention of red cell antigens during storage of frozen blood, with reference to the ABO and Rh systems" ACT. Crim Japan 53. 244-247 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Naoko,Misawa: "Determination of the Rho(D) antigen on red cells by ELISA using alkaline phosphatase-cojugated antiglobulin" Act. Crin Japan. 53. 153-157 (1987)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1987 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Jpn J Legal Med. 40. 101-104 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Jpn J Legal Med. 40. 366-369 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] 福島弘文: 法医学の実際と研究. 29. 29-31 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Int J.Biochem. 18. 1147-1149 (1986)

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書
  • [文献書誌] Hirofumi Fukushima: Comp Biochem Physiol.

    • 関連する報告書
      1986 実績報告書

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公開日: 1987-03-31   更新日: 2016-04-21  

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