| 研究概要 |
1.ニワトリ胎児繊維芽細胞を35Sメチオニンでラベルし, 標識された蛋白質のうち, ゼラチンアフィニティカラムを用いて, コラーゲンに結合し得る蛋白質を分離・精製したところ, 分子量47,000の蛋白質が検出された. この蛋白質(47K蛋白質)は, I型およびIV型のコラーゲンに結合能をもっている.
2.47K蛋白質を精製し, ラットに免疫して, I〓Mクラスの単クローン抗体を得た. また同じ蛋白質をウサギに免疫し, 多クローン抗体を得た. この抗体は, 免疫沈降法およびウエスタンブロッティング法によって, 47KDaの一本のバンドだけを認識することが確かめられた. 間接螢光抗体法を用いてニワトリ胎児繊維芽細胞を染色すると, 細胞内の小胞体に特異的な染色が認められた. 螢光抗体法で見るかぎり, 細胞膜表面に認められず, この点で同じ蛋白質について英国のB.Hoganらが主張していた. 47K蛋白質が細胞表面蛋白質であるという知見は誤りであることを明らかにした.
3.しかしながらこの47K蛋白質は興味深い性質をもっていることが判明した. 47K蛋白質は熱ショックによって誘導される, いわゆる熱ショック蛋白質であるが, 一方, 細胞の悪性転換によって合成量が減少し, 逆に, マウステラトーマ細胞の分化誘導に伴って, その合成量が著しく増大する. このような熱ショック蛋白質はほかに例がなく, われわれは現在47K蛋白質遺伝子のクローニングを進めている.
4.47K蛋白質がコラーゲンレセプターではないことが明らかになったので, われわれは現在, I型およびIV型コラーゲンをアフィニティカラムにカップルさせて, マウスのメラノーマ細胞よりコラーゲンレセプターの同定を行っている.
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