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細菌病原性の分子遺伝学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 62304036
研究種目

総合研究(A)

配分区分補助金
研究分野 細菌学
研究機関東京大学

研究代表者

吉川 昌之介  東京大学, 医科学研究所, 教授 (80012714)

研究分担者 山本 達男  順天堂大学, 医学部, 講師 (80095843)
寺脇 良郎  信州大学, 医学部, 教授 (10014333)
笹川 千尋  東京大学, 医科学研究所, 助教授 (70114494)
江崎 孝行  岐阜大学, 医学部, 講師 (90151977)
檀原 宏文  北里研究所, 室長 (40114558)
渡辺 治雄  国立予防衛生研究所, 細菌, 室長 (70142130)
岡村 登  国立公衆衛生院, 微生物, 室長 (00111592)
橋本 一  群馬大学, 医学部, 教授 (90008235)
吉村 文信  北海道大学, 歯学部, 助手 (50001962)
研究期間 (年度) 1987 – 1989
研究課題ステータス 完了 (1989年度)
配分額 *注記
23,900千円 (直接経費: 23,900千円)
1989年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
1988年度: 8,600千円 (直接経費: 8,600千円)
1987年度: 11,200千円 (直接経費: 11,200千円)
キーワード病原細菌学 / 病原性 / ビルレンス遺伝子 / 組換えDNA実験 / 分子遺伝学的研究 / 遺伝子解析 / 病原菌 / プラスミド / 細菌 / ビルレンス / 遺伝子 / 分子遺伝学 / 病原細菌 / 塩基配列 / クローン化 / ピルレンス / 毒素 / 遺伝的制御機構 / 分子進化 / 赤痢菌 / コレラ菌 / サルモネラ / チフス菌 / ビブリオ / 緑膿菌 / ブローブ / 嫌気性菌
研究概要

組換えDNA実験技術を始めとする分子生物学的、分子遺伝学的技術を病原細菌の病原性の解析に応用することを目的としてこの総合研究班を結成し、3年間補助金を受けた。研究分担者総数21名という大規模な班員構成からなり、各分担者の対象とする菌種も多岐にわたり、ビルレンス遺伝子の存在部位も染色体性、プラスミド性、およびバクテリオファ-ジ性と異るため各分担者の研究達成の難易度には著しい差があった。組換え体の選択方法、汎用される宿主・ベクタ-系でクロ-ン化できるか否か、EK系を用いることができるか否か、仮にクロ-ン化できたとしてそれが完全に形質発現するかなどにも大きな差があった。この壁を乗り切るためにベクタ-系を開発するところから始めたり、新たに宿主に特殊の変異を生じさせたり、遺伝子導入のために特殊の方法を採用したり多くの試行錯誤が行われた。幸に長時間にわたる班会議の議論を通じてこれら問題点の克服の方法が模索され、解決のための示唆が与えられた結果、各分担者それぞれがほぼ所期の目的を達した。セラチアの線毛、サルモネラの病原性、赤痢菌の病原性、大腸菌の表層構造、赤痢菌の抗原、らい菌の抗原、バクテロイデスの病原性、とくに線毛、腸管感染病原菌の粘着因子、コレラ菌の溶血毒、ナグビブリオの溶血毒、腸炎ビブリオの溶血毒、緑膿菌のサイトトキシン、Pseudomonas cepaciaの溶血毒などにつき、その遺伝子の存在様式、遺伝的構造、塩基配列の決定、形質発現の調節機構、前駆体物質のプロセツシング機構などを明らかにし、その病原的意義の解明に一定の知見を得ることができた。これらは多くの原著論文の他、シンポジウム、講演、研究会、総説などに発表したが、各分担者それぞれにより深く研究を堀り下げ、より完全な形で完成するべく努力を続けることになろう。ともあれ本邦のこの領域の発展に大いに寄与したことは間違いないと思う。

報告書

(4件)
  • 1989 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1988 実績報告書
  • 1987 実績報告書
  • 研究成果

    (159件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (159件)

  • [文献書誌] T.Yamamoto: "Evolutionary origin of pathogenic determinants in enterofoxigenic Escherichia coli and Vibrio cholerae 01" J.Bactferiol. 169. 1352-1357 (1987)

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  • [文献書誌] Y.Ichinose: "Enterotoxicity of E1 Tor-like hemolysin of non-01 Vibrio cholerae" Infect Immun. 55. 1090-1093 (1987)

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  • [文献書誌] T.Yutsudo: "Cloning of a Vero toxin(VT2)gene from a VT2-converting phage isolated from Escherichia coli 0157:H7" FEMS Microbiol Letters. 48. 273-276 (1987)

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  • [文献書誌] T.Yamamoto: "Vibrio cholerae 01 adherence to villi and lymphoid follicle epithelium:In vitro model using formalin-treated human small intestine and correlation between adherence and cell-associated hemagglutinin levels" Infect Immun. 56. 3241-3250 (1988)

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  • [文献書誌] S.L.Liu: "Intact motility as a Salmonella typhi invasion-related factor" Infect.Immun. 56. 1967-1973 (1988)

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  • [文献書誌] N.Terakado: "Plasmid-mediated serum resistance and alterations in the composition of lipopolysaccharide in Salmonella dublin" J.Gen Microbiol. 134. 2089-2093 (1988)

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  • [文献書誌] Y.Suzuki: "Detection of fimbriae and fimbrial antigens on the oval anaerobe Bacteroides gingivalis by negative staining and serological methods" J.Gen Microbiol. 134. 2713-2720 (1988)

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  • [文献書誌] K.Kawahara: "Evidence of correlation between 50-kilobase plasmid of Salmonella choleraesuis and its virulence" Microbial Pathogenesis. 4. 155-163 (1988)

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  • [文献書誌] S.Makino: "Genetic relatedness of the basic replicon of the virulence plasmid in shigellae and enteroinvasive Escherichia coli" Microbial Pathogenesis. 5. 267-274 (1988)

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  • [文献書誌] P.Pramoonjago: "Bactericidal activity of C9-deficient human serum" in preparation.

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  • [文献書誌] T.Ono: "Cloning and expression of the Bactroides Fragilis neuraminidese gene nanH in Exherichia coli" in Preparation.

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  • [文献書誌] T.Sakai: "Eexpression of four virulence antigens of shigella Flexneri is positivety regulated at the transuiptional level by the 30 kiloDalton virF protein" Molec.Microbiol. 2. 589-597 (1988)

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  • [文献書誌] C.Sasakawa: "virulence-associated genetic regions conprising 31 Kb of the 230-kb plasmid in Shigella Flexneri 2a" J.Bacteriol. 170. 2480-2484 (1988)

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  • [文献書誌] D.Dickinson: "Molecular cloning and scquencing of the gene encoding the fimbrial subunit protein of Bacteroides gingivalis" J.Bacteriol. 170. 1658-1665 (1988)

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  • [文献書誌] Y.Mizunoe: "Cloning and sequence of the gene encoding the major structural component of mannose-resistant Fimbriae of S.marcescens" J.Bacteriol. 170. 3567-3574 (1988)

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  • [文献書誌] P.Pramoonjago: "Anticomplementary activity of TraT protein of Esherichia coli R100 plasmid" in preparation.

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  • [文献書誌] H.Ibagon: "Detection of ST-type toxin genes in Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii with synthetic short oligonucleotide probes" in preparation.

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  • [文献書誌] S-L Liu: "Isolation of intraccllular multiplication mutants of Salmonella typhi" in preparation.

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  • [文献書誌] S.Akimoto: "Transformation of Bacteroides thetaiotaomicron by electroporation" in preparation.

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  • [文献書誌] T.Nakazawa: "Cloning and sequence analysis of the recA gene from Pseudomonas Cepacia" in preparation.

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  • [文献書誌] T.Nakazawa: "Cloning and sequence analysis of a hemolysin-like gene from Pseudomonas cepacia" in preparation.

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  • [文献書誌] M.Makino: "Construction of genomic library of Mycobacterium leprae gene and its expression in Streptomyces lividans" Internatl.J.Leprosy(submitted and revised).

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  • [文献書誌] T.Iida: "Cloning and expression of two genes encoding highly homologous hemolysins from a kanagawa phenomenon-positive Vibrio para haemolyticus T4750 strain" Gene(Submitted and revised).

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  • [文献書誌] P.Pramoonjago: "Tra T,anticomplementary protein of Escherichia coli R100 plasmid:mono clonal antibodies to Tra T and purification of Tra T protein" in preparation.

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  • [文献書誌] M.Abe: "Purification and properties of a heat-stable hemolysin from Pseudomonas cepacia" in preparation.

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  • [文献書誌] Y.Yoshida: "Molecular clolning and characterization of formI antigen aenes of shigella sonnei" in preparation.

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  • [文献書誌] Y.Takahashi: "Cloning and overproduction in Escherichia coli of the fimbrin gene and possible genes responsible for the fimbriation in an oral anaerobe Bacteroides gingivalis" in preparation.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Inouye: "Flagellation of pseudomonas putida is dependent on the ntrA(vpoN) gene" Mol.Gen.Genet.(in press).

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  • [文献書誌] K.Kawahara: "Identification and mapping of mba regions of the salmonella choleraesuis virulence plasmid pKDSC5C responsible for the mouse bacteremia" Microbial Pathogenesis(in press).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Nishibuchi: "Comparative analysis of the hemolysin genes of Vibrio cholcrae non-01,V.mimicus,and V.hollisae that are similar to the tdh gene of V.parahaemolyticus" FEMS Microbiol.Letters(in press).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Taniguchi: "cloning and charactervization of a gene encoding a new thermostable hemolysin from Vibrio parahaemolyticus" FEMS Microbiol.Letlers(in press).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Yamamoto: "Two step processing for activation of cytolysin/hemolysin of Vibrio chalerae 01, El Tor:nucleotide sequence of the structural gene(nly A)and characterization of the processed products" Infect.Immun.(submitted and revised).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Terakado: "Transposon-insertion mutogenesis of a genetic region encoding serum resistance in an 80Kb plasmid of salmonella dublin" J.Gen.Microbiol(submitted and revised).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Kawahara: "Lipopolysaccharide alteration mediated by the virulence plasmid of salmonella" Microbial Pathogenesis. 7. 195-202 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Sekizaki: "Loss of virulence associated with plasmid curing of chicken pathogenic Escherichia coli" Jpn.J.Vet.Sci. 51. 659-661 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Yamamoto: "Vibrio cholerae 01 adherence to human small intestinal M cells in vitro" J.Infect.Dis. 160. 168-169 (1989)

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  • [文献書誌] M.Mori: "Identification of species and capsular types of klebsiella clinical isolates with special reference to klebsiella planticola" Microbiol.Immunol. 33. 887-895 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Watanabe: "Genetic analysis of aninvasion region by use of a Tn3-eactransposon and identification of a second positive regulator gene,invE,for all invasion of shigella sonnei:significant homology of InvE with ParB of plasmid P1" J.Bacteriol(in press). (1990)

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  • [文献書誌] N.Kido: "Detection of lipopoly saccharides by ethidium bromide staining after sodium dodeeye sulfate-polyacvylamide gel electrophoresis" J.Bacteriol.(in press).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.I Kato: "cloning of regions requived for contact hemolysis and entry into LLC-MK2 cells fron Shigella sonnei form I plasucid virF is apositive regulator gene for these phenotypes" Infect Immun. 57. 1391-1398 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Moriya: "A cryptic fimbrial gene in Serratia marcescens" J.Bacteriol. 171. 6629-6636 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.kido: "Partial deletion of the Cloned rfb gene of Escherichia coli 09 results in synthesis of a new 0-antigenic lipopolysaccharide" J.Bacteriol. 171. 3629-3633 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Chosa: "Loss of viruleuce in Shigella strains preserved in culture collections due to molecular altevation of the invasion plasmid" Microbiol Pathogenesis. 6. 337-342 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Kawahara: "Lipopolysaccharide alteration mediated by the virulence plasmid of Salmorella" Microbiol Pathogenesis. 7. 195-202 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Hayashi: "Purification and chavacterization of oytotoxin from the crude extract of Pseudomonas aeruginosa" Microbiol Pathogenesis. 6. 103-112 (1989)

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  • [文献書誌] Y.Ike: "Genetic analysis of the pAD1 hemolysin/bacteriocin determinant in Enterococcus faecalis:Tn917 insertional mutagenesis and cloning" J Bacteriol. 172. 155-163 (1990)

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  • [文献書誌] C.Sasakawa: "Functional organization and nucleotide sequence of virulence Region-2 on the large virulence plasmid in shigolla flexneri 2a" Molec.Microbiol. 3. 1191-1201 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Yamada: "Molecular cloning and characterization of chromosomal virulence region kcpA of shigella flexneri" Molec.Microbiol. 3. 207-213 (1989)

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  • [文献書誌] B.Adler: "A dual transcriptional activation system for the 230 kb plasmid genes coding for virulence-associated antigens of shigellae flexnevi" Molec.Microbiol. 3. 627-635 (1989)

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  • [文献書誌] T.Hayashi: "Pseudomonas aeruginosa cytotoxin:the nucleotide sequence of the genes and the mechanism of activation of the protoxin" Molec Microbiol. 3. 861-868 (1989)

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  • [文献書誌] M C Lett: "virG a plasmid-coded virulence gene of Shigella flexneri identification of the virG protein and determination of the complete coding seguence" J.Baeteriol. 171. 353-359 (1989)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizunoe, Y., Y. Nokabeppu, M. Sekiguchi, S. Kawabata, T. Moriya, and K. Amako: "Cloning and sequence of the gene encoding the major structural component of mannose-resistant fimbriae of Serratia marcescens." J. Bacteriol.170. 3567-3574 (1988)

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Moriya, T., S. Kawabata, Y. Mizunoe, and K. Amako.: "A cryptic fimbrial genein Serratia marcescens." J. Bacteriol., 171: 6629-6636, 1989.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawahara, K., Y. Haraguchi, M. Tsuchimoto, N. Terakado, and H. Danbara.: "Evidence of correlation between 50-kilobase plasmid of Salmonella choleraesuis and its virulence." Microbial Pathogenesis, 4:155-163, 1988.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawahara, K., T. Hamaoka, S. Suzuki, M. Nakamura, S. Y. Murayama, T. Arai, N. Terakado, and H. Danbara.: "Lipopolysaccharide alteration mediated by the virulence plasmid of Salmonella." Microbial Pathogenesis, 7: 195-202, 1989.

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  • [文献書誌] Liu, S.-L., T. Ezaki, H. Miura, K. Matsui, and E. Yabuuchi.: "Intact motility as a Salmonella typhi invasion-related factor." Infect. Immun., 56: 1967-1973, 1988.

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  • [文献書誌] Ike, Y., D. B. Clewell, R. A. Segarra, and M. S. Gilmore.: "Genetic analysis of the pAD1 hemolysin/ bacteriocin determinant in Enterococcus faecalis: Tn917 insertional mutagenesis and cloning." J. Bacteriol., 172: 155-163, 1990.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yutsudo, T., H. Kurazono, C. Sasakawa, M. Yoshikawa, M. Iwaya, T. Takeda, and Y. Takeda.: "Cloning of a Vero toxin (VT2) gene from a VT2-converting phage isolated from Escherichia coli O157:H7." FEMS Microbiol. Letts, 48: 273-276, 1987.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kido, N., M. Ohta, K. Iida, T. Hasegawa, H. Ito, Y. Arakawa, T. Komatsu, and N. Kato.: "Partial deletion of the cloned rfb gene of Escherichia coli O9 results in synthesis of a new O-antigenic lipopolysaccharide." J. Bacteriol., 171: 3629-3633, 1989.

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mori, M., M. Ohta, N. Agata, N. Kido, Y. Arakawa, H. Ito, T. Komatsu, and N. Kato.: "Identification of species and capsular types of Klebsiella clinical isolates with special reference to Klebsiella planticola." Microbiol. Immunol., 33: 887-895, 1989.

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  • [文献書誌] Sasakawa, C., K. Kamata, T. Sakai, S. Makino, M. Yamada, N. Okada, and M. Yoshikawa.: "Virulence-associated genetic regions comprising 31 kilobases of the 230-kilobase plasmid in Shigella flexneri 2a." J. Bacteriol., 170: 2480-2484, 1988.

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  • [文献書誌] Sakai, T., C. Sasakawa, and M. Yoshikawa.: "Expression of four virulence antigens of Shigella flexneri is positively regulated at the transcriptional level by the 30 kilodalton virF protein." Molec. Microbiol., 2: 589-597, 1988.

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  • [文献書誌] Makino, S., C. Sasakawa, and M. Yoshikawa.: "Genetic relatedness of the basic replicon of the virulence plasmid in shigellae and enteroinvasive Escherichia coli." Microbial Pathogenesis, 5: 267-274, 1988.

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  • [文献書誌] Lett, M.-C., C. Sasakawa, N. Okada, T. Sakai, S. Makino, M. Yamada, K. Komatsu, and M. Yoshikawa.: "virG, a plasmid-coded virulence gene of Shigella flexneri ; identification of the virG protein and determination of the complete coding sequence." J. Bacteriol., 171: 353-359, 1989.

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  • [文献書誌] Yamada, M., C. Sasakawa, N. Okada, S. Makino, and M. Yoshikawa.: "Molecular cloning and characterization of chromosomal virulence region kcpA of Shigella flexneri." Molec. Microbiol., 3: 207-213, 1989.

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  • [文献書誌] Chosa, H., S. Makino, C. Sasakawa, N. Okada, K. Komatsu, J.-S. Suk, and M. Yoshikawa.: "Loss of virulence in Shigella strains preserved in culture collections due to molecular alteration of the invasion plasmid." Microbial Pathogenesis, 6: 337-342, 1989.

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  • [文献書誌] Adler, B., C. Sasakawa, T. Tobe, S. Makino, K. Komatsu, and M. Yoshikawa.: "A dual transcriptional activation system for the 230 kb plasmid genes coding for virulence-associated antigens of Shigella flexneri." Molec. Microbiol., 3: 627-635, 1989.

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  • [文献書誌] Sasakawa, C., B. Adler, T. Tobe, N. Okada, S. Nagai, K. Komatsu, and M. Yoshikawa.: "Functional organization and nucleotide sequence of virulence Region-2 on the large virulence plasmid in Shigella flexneri 2a." Molec. Microbiol., 3: 1191-1201, 1989.

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  • [文献書誌] Sekizaki, T., I. Nonomura, and Y. Imada.: "Loss of virulence associated withplasmid curing of chicken pathogenic Escherichia coli." Jpn. J. Vet. Sci., 51: 659-661, 1989.

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  • [文献書誌] Terakado, N., T. Hamaoka, and H. Danbara.: "Plasmid-mediated serum resistance and alterations in the composition of lipopolysaccharide in Salmonella dublin." J. Gen. Microbiol., 134: 2089-2093, 1988.

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  • [文献書誌] Kawahara, K., T. Hamaoka, S. Suzuki, M. Nakamura, S. Y. Murayama, T. Arai, N. Terakado, and H. Danbara.: "Lipopolysaccharide alteration mediated by the virulence plasmid of Salmonella." Microbial Pathogenesis, 7: 195-202, 1989.

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  • [文献書誌] Hayashi, T., Y. Kamio, and Y. Terawaki.: "Purification and characterization of cytotoxin from the crude extract of Pseudomonas aeruginosa." Microbial Pathogenesis, 6: 103-112, 1989.

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  • [文献書誌] Hayashi, T., Y. Kamio, F. Hishinuma, Y. Usami, K. Titani, and Y. Terawaki.: "Pseudomonas aeruginosa cytotoxin: the nucleotide sequence of the gene and the mechanism of activation of the protoxin." Molec. Microbiol., 3: 861-868, 1989.

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  • [文献書誌] Kato, J.-I., K.-I. Ito, A. Nakamura, and H. Watanabe: "Cloning of regions required for contact hemolysis and entry into LLC-MK2 cells from Shigella sonnei form I plasmid: virF is a positive regulator gene for these phenotypes." Infect. Immun., 57: 1391-1398, 1989.

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  • [文献書誌] Ichinose, Y., K. Yamamoto, N. Nakasone, M. J. Tanabe, T. Takeda, T. Miwatani, and M. Iwanaga.: "Enterotoxicity of El Tor-like hemolysin of non-O1 Vibrio cholerae." Infect. Immun., 55: 1090-1093, 1987.

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  • [文献書誌] Yamamoto, T., T. Gojobori, and T. Yokota.: "Evolutionary origin of pathogen-ic determinants in enterotoxigenic Escherichia coli and Vibrio cholerae O1." J. Bacteriol., 169: 1352-1357, 1987.

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  • [文献書誌] Yamamoto, T., T. Kamano, M. Uchimura, M. Iwanaga, and T. Yokota.: "Vibrio cholerae O1 adherence to villi and lymphoid follicle epithelium: In vitro model using formalin-treated human small intestine and correlation between adherence and cell-associated hemagglutinin levels." Infect. Immun., 56: 3241-3250, 1988.

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  • [文献書誌] Yamamoto, T., and T. Yokota.: "Vibrio cholerae O1 adherence to human small intestinal M cells in vitro." J. Infect. Dis., 160: 168-169, 1989.

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  • [文献書誌] Dickinson, D. P., M. A. Kubiniec, F. Yoshimura, and R. J. Genco.: "Molecular cloning and sequencing of the gene encoding the fimbrial subunit protein of Bacteroides gingivalis." J. Bacteriol., 170: 1658-1665, 1988.

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  • [文献書誌] Suzuki, Y., F. Yoshimura, K. Takahashi, H. Tani, and T. Suzuki.: "Detection of fimbriae and fimbrial antigens on the oral anaerobe Bacteroides gingivalis by negative staining and serological methods." J. Gen. Microbiol., 134: 2713-2720, 1988.

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公開日: 1987-04-01   更新日: 2016-04-21  

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