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生物活性を持つ高分子の高次構造の高分解能NMRによる研究

研究課題

研究課題/領域番号 62430019
研究種目

一般研究(A)

配分区分補助金
研究分野 高分子物性・高分子材料
研究機関東京工業大学

研究代表者

中條 利一郎 (中絛 利一郎)  東京工業大学, 工学部, 教授 (60016285)

研究分担者 相沢 益男  東京工業大学, 工学部, 教授 (00016742)
中浜 精一  東京工業大学, 工学部, 教授 (90016410)
小見山 二郎  東京工業大学, 工学部, 教授 (60016574)
阿部 明廣 (阿部 明広 / 安部 明広)  東京工業大学, 工学部, 教授 (50114848)
戸田 不二緒  東京工業大学, 工学部, 教授 (80011021)
研究期間 (年度) 1987 – 1989
研究課題ステータス 完了 (1989年度)
配分額 *注記
38,200千円 (直接経費: 38,200千円)
1989年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1988年度: 13,000千円 (直接経費: 13,000千円)
1987年度: 24,500千円 (直接経費: 24,500千円)
キーワード高分解能NMR / 高分子の高次構造 / 蛋白質 / ポリペプチド / 酵素 / シクロデキストリン / 糖蛋白質 / 人工酵素 / ^1HーNMR / ^<13>CーNMR / ^2HーNMR / イオノホア / コンホメーション / 水素結合 / 高次構造 / 高分子 / ^1HーNMMR / ペプチド / 遺伝子
研究概要

この研究は、高分解能NMR法を主手段として生物活性を持つ高分子の種々の環境のもとでの高次構造を決定し、機能との関係を明らかにすることを目的として昭和62年度から平成元年度までの3年間にわたり実施した。主たる研究対象として(1)糖蛋白質、(2)酵素と人工酵素、(3)蛋白質モデル化合物を選び、初年度には溶液用の、2年目には固体用の高分解能NMR装置を導入し、溶液状態および固体状態でのそれぞれの高次構造を解析し、機能を解明した。研究成果の概要は以下の通り(カッコ内は分担研究者名)。課題(1)では極地の海に住む魚の血液凍結を防止する活性を持つ糖蛋白質のモデルとして、ガラクトサミン基結合スレオニン残基を含む数種のオリゴ糖ペプチドを合成し、高次構造、糖-ペプチド間相互作用などを調べ、不凍化活性発現の機構を推定した(中條,井上)。課題(2)では化学修飾基としてヒスタミン基を持つシクロデキストリン(CD)がキモトリプシン類似の触媒活性を持つことを明らかにし(戸田)、また単糖または二糖を枝として持つ分岐CDの基質認識機能における枝の役割を明らかにした(山本)。さらに結合蛋白質プロテインAとメタピロカテ-ゼを融合した蛋白質を遺伝子工学的に合成し、発現蛋白質が両蛋白質の機能を併せ持つことを認めた(相沢)。課題(3)ではポリ-γ-ベンジル-L-グルタメ-トについて高次構造の安定化に対する側鎖間相互作用の役割を明らかにし(安部)、ポリ-L-グルタミン酸塩の溶液中の構造に対する対イオンの効果を検討した(小見山)。また天然イオノホアのモデルとしてのカルボン酸型ポリエ-テルのアルカリ金属錯体の溶液中の構造をH-NMR化学シフトから検討した(中浜)。さらに固体状態の種々のペプチドおよび蛋白質トロポミオシンの高次構造を固体高分解能NMRから得られる化学シフトに基づいて検討した(安藤)。

報告書

(4件)
  • 1989 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1988 実績報告書
  • 1987 実績報告書
  • 研究成果

    (98件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (98件)

  • [文献書誌] Nobuyoshi J.Maeji: "Conformation-Determining Role for the N-Acetyl Group in the O-Glycosidic Linkage,α-GalNAc-Thr" Biopolymers. 26. 1753-1767 (1987)

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  • [文献書誌] Hiroshi Ikeda: "Catalytic Properties of Dimethyl- -Cyclodextrin Bearing Imidazolylethyl Group.pH Dependence and Regioselectivity of the Hydrolysis of Nitrophenyl Acetates" Tetrahedron Letters. 29. 311-312 (1988)

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  • [文献書誌] Toshimasa Yamazaki: "Conformational Studies of N-Acetyl-N'-Methylamide Derivatives of α-Aminobutyric Acid,Norvaline,and Valine.I.Prefered Conformations in Solution as Studied by ^1H-NMR Spectroscopy" Biopolymers. 27. 969-984 (1988)

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  • [文献書誌] Akihiro Abe: "Conformational Studies of N-Acetyl-N'-Methylamide Derivatives of α-Aminobutyric Acid,Norvaline,and Valine.II.Experimental Results" Biopolymers. 27. 985-999 (1988)

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  • [文献書誌] Mitsuru Sato: "Hydration of Sodium and Caesium Salts of Poly(Acrylic Acid)in Aqueous Salt Solution" Polymer Commun.29. 49-51 (1988)

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  • [文献書誌] Mitsuru Sato: "A New Model of Counterion Condensation in Polyelectrite Solutions.II.Theoretical Predictions of Competitive Condensation between Counterions of Different Valences" Biophysical Chem.31. 209-215 (1988)

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  • [文献書誌] Hitoshi Kuboniwa: "Crystal Structure of Potassium Salt of Synthetic Carboxylic Ionophore" Chemistry Letters. 923-926 (1988)

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  • [文献書誌] Kazuo Yamaguchi: "Studies on Synthetic Ionophores VI.Synthesis of Polyether Carboxylic Acids and THeir Use as Carriers for Alkali Metal Ion Transport through Liquid Membrane" Bull.Chem.Soc.Japan. 61. 2047-2054 (1988)

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  • [文献書誌] Shinji Ando: "Intermolecular Hydrogen-Bonding Effect on ^<13>C NMR Chemical Shifts of Glycine Residue Carbonyl Carbons of Peptides in the Solid State" J.Am.Chem.Soc.110. 3380-3386 (1988)

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  • [文献書誌] Takeshi Yamanobe: "Conformational and Dynamic Aspects of Poly(γ-n-octadecyl L-glutamate)in the Solid State and Liquid-Crystalline state as Studied by Variable-Temperature ^<13>C CP/MAS NMR Spectroscopy" Macromolecules. 21. 48-50 (1988)

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  • [文献書誌] Yasuhiko Yamamoto: "^1H-Nuclear Magnetic Resonance Study of 6-O-α-D-Glucopyranosyl α-Cyclodextrin/para-Nitrophenol Inclusion Complex" Chem.Letters. 495-498 (1988)

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  • [文献書誌] Yasuhiko Yamamoto: "Determination of the Host-Guest Geometry in the Inclusion Complexes of Cyclomalto-Oligosaccharides with p-Nitrophenol in Solution" Carbohydrate Research. 182. 41-52 (1988)

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  • [文献書誌] Mitsuhiko Onda: "^1H-NMR Study of Intramolecular-Hydrogen Bonding Interaction in Cyclodextrins and Their Di-O-Methylated Derivatives" Bull.Chem.Soc.Japan. 61. 4015-4021 (1988)

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  • [文献書誌] Yoshimasa Mimura: "NMR Study on Conformation of Ac-Thr(α-GalNAc)-Ala-Ala-OMe as a Model for Mucin Type Glycoprotein" Int.J.Peptide & Protein Research. 34. 363-368 (1989)

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  • [文献書誌] Yoshimasa Mimura: "NMR Study on Interaction between Sugar and Peptide Moieties in Mucin Type Model Glycopeptides" Rep.Prog.Polym.Phys.Japan. 32. 503-506 (1989)

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  • [文献書誌] Hiroshi Ishii: "Synthesis and Conformational Analysis of Aib-Containing Peptide Modelling for N-Glycosylation Site in N-Glycoprotein" Int.J.Biol.Macromole.11. 329-334 (1989)

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  • [文献書誌] Hiroshi Ikeda: "Artificial Hydrlase Using Modified Dimethyl-α-Cyclodextrin" J.Inclusion Phenomena. 7. 117-124 (1989)

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  • [文献書誌] Akihiro Abe: "Deuterium NMR Analysis of Poly(γ-benzyl-L-glutamate)in the Lyotropic Liquid-Crystalline State: Orientational Order of the α-Helical Backbone and Conformation of the Pendant Side Chain" Macromolecules. 22. 2138-2145 (1989)

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  • [文献書誌] Akihiro Abe: "Orientational Order of α-Helical Poly(γ-benzyl glutamate)in the Lyotropic Liquid-Crystalline State.Comparison of Theory with Experiments" Macromolecules. 22. 2145-2149 (1989)

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  • [文献書誌] Toshimasa Yamazaki: "Conformational Characteristics of Polyglutamic Acids Esters:Persistence of Orientational Correlation Along the Side-Chain Flanking the α-Helical Backbone" Biopolymers. 28. 1959-1967 (1989)

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  • [文献書誌] Soichi Yabuki: "Electro-Conductive Enzyme Membrane" J.Chem.Soc.,Chem.Commun.945-946 (1989)

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  • [文献書誌] Eiri Kobatake: "Application of a Fusion Protein,Metapyrocatechase/Protein A,to an Enzyme Immunoassay" Anal.Biochem.(印刷中).

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  • [文献書誌] Shinji Ando: "Conformational Characterization of Glycine Residues Incorporated into Some Homopolypeptides by Solid State ^<13>C NMR Spectroscopy II." J.Molecular Structure. 192. 153-161 (1989)

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  • [文献書誌] Satoru Tsuji: "The ^<13>C-NMR Chemical Shift and the Higher Order Structure of L-Alanine Residues in Tropomyosine in the Solid State and in Solution" J.Molecular Structure. 196. 317-325 (1989)

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  • [文献書誌] Shinji Ando: "A Conformational Study of Oligopeptides Containing Gly-Pro Sequence in the Solid State by ^<13>C CP/MAS NMR" J.Molecular Structure. 212. 123-135 (1989)

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  • [文献書誌] M.Okabe: "Conformational Behavior of Poly(β-Aspartate)with n-Alkyl Side Chains in the Solid State as Studied by ^<13>C-CP/MAS NMR Spectroscopy" J.Molecular Structure. 213. 213-220 (1989)

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  • [文献書誌] Yasuhiko Yamamoto: "NMR Studies of Cyclodextrin Inclusion Complex" J.Carbohydrate Chemistry. 8. 29-46 (1989)

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  • [文献書誌] Yoshihiro Kanda: "High-Resolution Nuclear Magnetic Resonance Study of 6-O-α-D-Glucopyranosyl-α-Cyclodextrin-para-Nitrophenol Inclusion Complex in Aqueous Solution" Bull.Chem.Soc.Japan. 62. 2002-2008 (1989)

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  • [文献書誌] Yoshio Inoue: "Elucidation of the Host-Guest Geometrical Relationship in a Branched Cyclomaltohexaose Inclusion-Complex by Measurements of Intermolecular Nuclear Overhauser Effects in the Rotating-Frame" Carbohydrate Chemistry. 194. C8-13 (1989)

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  • [文献書誌] N. J. Maeji, Y. Inoue, and R. Chujo: "Conformation Determining Role for the N-Acetyl Group in the O-Glycosidic Linkage, alpha-GalNAc-Thr" Biopolymer. 26. 1753-1767 (1987)

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  • [文献書誌] Y. Mimura, Y. Inoue, N. J. Maeji, and R. Chujo: "NMR Study on Study on Conformation of Ac-Thr( alpha-GalNAc) -Ala-Ala-OMe as a Model for Mucin Type Glycoprotein" Int. J. Peptide Protein Res. 34, 363-368(1989).

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  • [文献書誌] Y. Mimura, Y. Yamamoto, Y. Inoue, and R. Chujo: "NMR Study on Interaction between Sugar and Peptide Moieties in Mucin Type Model Glycopeptides" Rep. Prog. Polym. Phys. Jpn. 32, 503-506(1989).

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  • [文献書誌] H. Ishii, O. Nadaoka, Y. Mimura, Y. Inoue, and R. Chujo: "Synthesis and Conformational Analysis of Aib-Containing Peptide Modelling for N-Glycosylation Site in N-Glycoprotein" Int. J. Biol. Macromol., 11, 329-334(1989).

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  • [文献書誌] H. Ikeda, R. Kojin, C.-J. Yoon, T. Ikeda, and F. Toda: "Catalytic Properties of Dimethyl-beta-Cyclodextrin Bearing Imidazolylethyl Group. pH Dependence and Regioselectivity of the Hydrolysis of Nitrophenyl Acetates" Tetrahedron Letters, 29, 311-312(1988).

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  • [文献書誌] H. Ikeda, R. Kojin, C.-J. Yoon, T. Ikeda, and F. Toda: "Artificial Hydrolase Using Modified Dimethyl-beta-cyclodextrin" J. Inclusion Phenomena, 7, 117-124(1989).

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  • [文献書誌] T. Yamazaki and A. Abe: "Conformational Studies of N-Acetyl-N'-Methylamide Derivatives of alpha-Aminobutyric Acid, Norvaline, and Valine. I. Preferred Conformations in Solution as Studied by 'H-NMR Spectroscopy" Biopolymers, 27, 969-984(1988).

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  • [文献書誌] A. Abe and T. Yamazaki: "Conformational Studies of N-Acetyl-N'-Methylamide Derivatives of alpha-Aminobutyric Acid, Norvaline, and Valine. II. Conformational Energy Calculations and Comparison with Experimental Results" Biopolymers, 27, 985-999(1988).

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  • [文献書誌] A. Abe and T. Yamazaki: "Orientational Order of alpha-Helical Poly(gamma-benzyl glutamate) in the Lyotropic Liquid-Crystalline State. Comparison of Theory with Experiments" Macromolecules 22, 2145-2149(1989).

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  • [文献書誌] T. Yamazaki, A. Abe, H. Ono, and H. Toriumi: "Conformational Characteristics of Polyglutamic Acid Esters:Persistence of Orientational Correlation Along the Side Chain Flanking the alpha-Helical Backbone" Biopolymers, 28, 1959-1967(1989).

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  • [文献書誌] M. Sato, M. Hayashi, J. Komiyama, and T. Iijima: "Hydration of Sodium and Caesium Salts of Poly(Acrylic Acid) in Aqueous Salt Solutions" Polymer Commun., 29, 49-51(1988).

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      1989 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M. Sato, T. Kawashima, and J. Komiyama: "A New Model of Counterion Condensation in a Polyelectrolyte Solutions. II. Theoretical Predictions of Competitive Condensation between Counterions of Different Valences" Biophys. Chem., 31, 209-215(1988).

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  • [文献書誌] H. Kuboniwa, K. Yamaguchi, S. Nakahama, K. Hori, and Y. Ohashi: "Crystal Structure of Potassium Salt of Synthetic Carboxylic Ionophore" Chemistry Letters, 923-926(1988).

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  • [文献書誌] K. Yamaguchi, S. Negi, S. Kozakai, R. Nagano, H. Kuboniwa, A. Hirao, S. Nakahama, and N. Yamazaki: "Studies on Synthetic Ionophores. VI. Synthesis of Polyether Carboxylic Acids and Their Use as Carriers for Alkali Metal Ion Transport Through Liquid Membrane" Bull. Chem. Soc., Jpn., 61, 2047-2054(1988).

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  • [文献書誌] S. Yabuki, H. Shinohara, and M. Aizawa: "Electro-Conductive Enzyme Membrane" J. Chem. Soc., Chem. Commun 945-946(1989).

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  • [文献書誌] E. Kobatake, Y. Nishimori, Y. Ikariyama, M. Aizawa, and S. Kato: "Application of a Fusion Protein, Metapyrocatechase/Protein A, to an Enzyme Immunoaasay" Anal. Biochem.

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  • [文献書誌] S. Ando, I. Ando, A. Shoji, and T. Ozaki: "Intermolecular Hydrogen-Bonding Effect on ^<13>C NMR Chemical Shifts of Glycine Residue Carbonyl Carbons of Peptides in the Solid State" J. Am. Chem. Soc., 110, 3380-3386(1988).

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  • [文献書誌] T. Yamanobe, M. Tsukahara, T. Komoto, J. Watanabe, I. Ando, I. Uematsu, K. Deguchi, T. Fujito, and M. Imanari: "Conformation and Dynamic Aspects of Poly(gamma-n-octadecyl L-glutamate) in the Solid State and Liquid-Crystalline State as Studied by Variable-Temperature ^<13>C CP/MAS NMR Spectroscopy" Macromolecules, 21, 48-50(1988).

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  • [文献書誌] S. Ando, I. Ando, A. Shoji, and T. Ozaki: "Conformational Characterization of Glycine Residues Incorporated into Some Homopolypeptides by Solid State ^<13>C NMR Spectroscopy. II." J. Molecular Structure, 192, 153-161(1989).

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  • [文献書誌] S. Tuji and I. Ando: "The C-NMR Chemical Shift and the Higher Order Structure of L-Alanine Residues in Tropomyosine in the Solid State and in Solution" J. Molecular Structure 196, 317-325(1989).

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  • [文献書誌] S. Ando, K. Matsumoto, I. Ando, A. Shoji, and T. Ozaki: "A Conformational Study of Oligopeptides Containing Gly-Pro Sequence in the Solid State by ^<13>C CP/MAS NMR" J. Molecular Structure, 212, 123-135(1989).

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  • [文献書誌] M. Okabe, T. Yamanobe, T. Komoto, J. Watanabe, I. Ando, and I. Uematsu: "Conformational Behavior of Poly(beta-Aspartate) with n-Alkyl Side Chains in the Solid State as Studied by ^<13>C-CP/MAS-NMR Spectroscopy" J. Molecular Structure 213, 213-220(1989).

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  • [文献書誌] Y. Yamamoto, Y. Kanda, Y. Inoue, R. Chujo, and S. Kobayashi: "^1H-Nuclear Magnetic Resonance Study of 6-O- alpha-D-Glucopyranosyl alpha-Cyclodextrin/para-Nitrophenol Inclusion Complex" Chemistry Letters, 495-498(1988).

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  • [文献書誌] Y. Yamamoto, M. Onda, Y. Takahashi, Y. Inoue, and R. Chujo: "Determination of the Host-Guest Geometry in the Inclusion Complexes of Cyclomaltooligosaccharides with p-Nitrophenol in Solution" Carbohydr. Res., 182, 41-52(1988).

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  • [文献書誌] M. Onda, Y. Yamamoto, Y. Inoue, and R. Chujo: "^1H-NMR Study of Intramolecular-Hydrogen Bonding Interaction in Cyclodextrins and Their Di-O-Methylated Derivatives" Bull. Chem. Soc. Jpn., 61, 4015-4021(1988).

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  • [文献書誌] Y. Yamamoto and Y. Inoue: "NMR Studies of Cyclodextrin Inclusion Complex" J. Carbohydrate Chem., 8, 29-46(1989).

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公開日: 1987-04-01   更新日: 2016-04-21  

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